Badanie genetyczne enzymów wątrobowych u pacjentów ze skutkami ubocznymi leków przeciwdepresyjnych

Projekt badania Jest to naturalistyczne badanie sześćdziesięciu pacjentów, które obejmie 30 pacjentów, u których wystąpiły istotne działania niepożądane leczenia lekami przeciwdepresyjnymi metabolizowanymi przez CYP2D6 i 2C19 (grupa LECZENIE-NIETOLERANCJA) oraz 30 pacjentów, u których wystąpiła odpowiedź na leczenie lekami przeciwdepresyjnymi z tej samej grupy bez znaczące działania niepożądane (grupa KONTROLNA). Oczekuje się, że badanie potrwa rok.

Po rekrutacji, uzyskaniu zgody uczestnika i uzyskaniu kompetencji do udziału, diagnoza zostanie oceniona za pomocą wywiadu klinicznego, wspomaganego dokumentacją medyczną, jeśli jest dostępna. Zostanie przeprowadzona pełna historia leczenia, w tym wszystkie znane leki, ich dawki i czas stosowania, aby określić ekspozycję na leki przeciwdepresyjne metabolizowane przez CYP450 2D6 i 2C19 oraz brak jednoczesnego stosowania inhibitorów CYP 2D6 i 2C19. W załączeniu wykaz leków przeciwdepresyjnych metabolizowanych przez CYP450 2D6 i 2C19 oraz ich inhibitory. Jeśli ekspozycja zostanie potwierdzona, każdy uczestnik zostanie przesłuchany przy użyciu angielskiej wersji Skali Oceny UKU (Udvalg dla Kliniske Undersogelser)14 w celu retrospektywnej oceny skutków ubocznych leków metabolizowanych przez enzymy CYP 2D6 i 2C19. Wykorzystamy moduły 1, 3 i 4 UKU dla „psychicznych”, „autonomicznych” i odpowiednio „innych” skutków ubocznych. Do grupy NIETOLERANCYJNYCH LECZENIA zostaną włączeni tylko pacjenci, u których wystąpiły wyraźne działania niepożądane jednego leku lub umiarkowane lub wyraźne działania niepożądane dwóch leków metabolizowanych przez enzymy CYP 2D6 i 2C19. Osoby, które nie mają żadnych lub mają łagodne działania niepożądane, zostaną włączone do grupy KONTROLNEJ. Oczekuje się, że rozmowa z pacjentem potrwa około dziewięćdziesięciu minut i zostanie przeprowadzona przez dodatkowego badacza (Adriana Foster, MD).

Uczestnicy badania zostaną poproszeni o przepłukanie ust wodą w celu usunięcia resztek pokarmu i wyplucie śliny do kubka zbiorczego, aż poziom płynu osiągnie linię wskazaną na pojemniku (~2 ml). Wykorzystamy zestaw do samodzielnego pobierania DNA Oragene™ (DNA Genotek, Inc, Ottawa, Ontario, Kanada).

Ślina zostanie przetransportowana do GEM Labs, zlokalizowanego na terenie kampusu MCG, przez personel badawczy. Genomowy DNA zostanie wyekstrahowany odczynnikiem i metodą dostarczoną przez producenta, firmę Oragene. Zostanie to użyte jako szablon do amplifikacji odpowiednich regionów CYP450 2D6 i 2C19. Produkty PCR będą losowo cięte na 50 do 100 pz przez trawienie DNazą I. Fragmenty te będą dalej znakowane fikoerytryną (PE), barwnikiem fluorescencyjnym. Fragmenty znakowane PE zostaną poddane hybrydyzacji z P450 Roche AmpliChip, przemyte i zeskanowane przez zautomatyzowaną stację płynową GeneChip firmy Affymetrix 450Dx i skaner Affymetrix GeneChip 3000Dx z oprogramowaniem operacyjnym GeneChip Dx 1.1.3. Dane zostaną przeanalizowane przez AmpliChip CYP450_US Data Analysis w celu określenia genotypu dla 2D6 (całkowicie ocenia 27 miejsc mutacji, delecji i duplikacji) i 2C19 (2 miejsca mutacji). Wyniki genotypowania będą analizowane przez to samo oprogramowanie w celu przewidywania fenotypu (bardzo szybki, intensywny, pośredni i słaby metabolizm).

Ogólnie rzecz biorąc, badanie wymaga tylko jednej wizyty od uczestnika; po przeprowadzeniu wywiadu i pobraniu próbki śliny rola uczestnika w badaniu zostanie spełniona. Badanie to zostanie przeprowadzone w całości w obiektach Medical College of Georgia. Mamy nadzieję wykazać, że odsetek alleli 2D6 i 2C19, które są związane ze słabym statusem metabolizatora w populacji nietolerującej leczenia, znacznie przekroczy odsetek stwierdzony w populacji pacjentów, którzy przyjmują leki przeciwdepresyjne bez skutków ubocznych.