Estudo genético de enzimas hepáticas em pacientes com efeitos colaterais de antidepressivos

Desenho do estudo Este é um estudo naturalístico de sessenta pacientes, que incluirá 30 pacientes que tiveram reações adversas significativas do tratamento com antidepressivos metabolizados por CYP2D6 e 2C19 (grupo TRATAMENTO-INTOLERANTE) e 30 pacientes que responderam ao tratamento com o mesmo grupo de antidepressivos sem efeitos adversos significativos (grupo CONTROLE). A previsão é de que o estudo dure um ano.

Uma vez obtido o recrutamento, o consentimento do sujeito e a competência para participar, o diagnóstico será avaliado por meio de entrevista clínica, auxiliada por prontuários, quando disponível. Um histórico completo de medicamentos será obtido, incluindo todos os medicamentos conhecidos, suas doses e duração do uso, para determinar a exposição a antidepressivos metabolizados por CYP450 2D6 e 2C19 e ausência de inibidores concomitantes de CYP 2D6 e 2C19. Uma lista dos antidepressivos metabolizados pelo CYP450 2D6 e 2C19 e seus inibidores está anexa. Se a exposição for confirmada, cada indivíduo será entrevistado usando a versão em inglês da UKU (Udvalg for Kliniske Undersogelser) Rating Scale14 para avaliar retrospectivamente seus efeitos colaterais de medicamentos metabolizados pelas enzimas CYP 2D6 e 2C19. Utilizaremos os módulos 1, 3 e 4 da UKU, para efeitos colaterais "psíquicos", "autônomos" e, respectivamente, "outros". Somente os pacientes que tiveram efeitos colaterais marcantes de um medicamento ou efeitos colaterais moderados ou marcantes de dois medicamentos metabolizados pelas enzimas CYP 2D6 e 2C19, de acordo com UKU, serão incluídos no grupo TRATAMENTO INTOLERANTE. Indivíduos que não apresentarem nenhum ou efeitos adversos leves serão incluídos no grupo CONTROLE. Espera-se que a entrevista com o sujeito dure aproximadamente noventa minutos e será conduzida por uma subinvestigadora (Adriana Foster, MD).

Os participantes do estudo serão solicitados a enxaguar a boca com água para remover partículas de alimentos e cuspir saliva em um copo de coleta até que o nível do líquido atinja a linha indicada no recipiente (~ 2ml). Usaremos o kit de autocoleta de DNA Oragene™ (DNA Genotek, Inc, Ottawa, Ontário, Canadá).

A saliva será transportada para o GEM Labs, localizado no campus do MCG, pela equipe de pesquisa. O DNA genômico será extraído com o reagente e método fornecidos pelo fabricante Oragene. Isso será usado como modelo para amplificar as regiões relevantes de CYP450 2D6 e 2C19. Os produtos de PCR serão clivados aleatoriamente em 50 a 100 pb por digestão com DNase I. Esses fragmentos serão posteriormente marcados com ficoeritrina (PE), um corante fluorescente. Os fragmentos marcados com PE serão hibridizados com o P450 Roche AmpliChip, lavados e escaneados pela estação de fluidos GeneChip automatizada Affymetrix 450Dx e pelo scanner Affymetrix GeneChip 3000Dx com GeneChip Operating Software Dx 1.1.3. Os dados serão analisados ​​pelo AmpliChip CYP450_US Data Analysis para determinar o genótipo para 2D6 (avalia totalmente 27 sítios de mutação, deleção e duplicação) e 2C19 (2 sítios de mutação). Os resultados da genotipagem serão analisados ​​pelo mesmo software para prever o fenótipo (metabolizador ultrarrápido, extenso, intermediário e pobre).

No geral, o estudo requer apenas uma visita do participante; após a conclusão da entrevista e da amostra de saliva, o papel do participante na pesquisa será cumprido. Este estudo será realizado em sua totalidade nas instalações do Medical College of Georgia. Esperamos demonstrar que a taxa dos alelos 2D6 e 2C19 que estão associados ao estado metabolizador ruim na população intolerante ao tratamento excederá em muito a taxa encontrada na população de pacientes que toma antidepressivos sem efeitos adversos.