Vliv snížení sérového LDL na rezistenci na aspirin

Pacienti budou léčeni úvodní dávkou aspirinu 500 mg a poté 100 mg/den po další 4 dny. U pacientů, kteří budou zařazeni do běžné pracovní doby, bude na začátku proveden test agregace krevních destiček a obsah cholesterolu v membránách krevních destiček.

Druhý den budou provedeny krevní testy na lipidy, jaterní testy (ALT, AST, GGT, alkalická fosfatáza a bilirubin) a renální testy (dusík močoviny v krvi a kreatinin), kompletní krevní obraz, obecný test moči a sérový homocystein.

Pátý den bude proveden test optické agregace krevních destiček, obsah cholesterolu v membránách krevních destiček, funkce krevních destiček v systému PFA-100 a rozpustný p-selektin v plazmě, pokud má pacient rezistenci na aspirin (agregace krevních destiček 20 % s adrenalinem nebo 70 % s ADP), bude LDL v plazmě snížen u 20 pacientů hypolipidemiky (statin samotný nebo v kombinaci s ezetimibem). Dalších 20 pacientů bude nadále léčeno pouze aspirinem.

O měsíc později budou podruhé provedeny krevní testy na lipidy, játra (ALT, AST, GGT, alkalická fosfatáza a bilirubin) a renální testy (dusík močoviny v krvi a kreatinin), kompletní krevní obraz, obecný test moči a sérový homocystein. čas a aktivita krevních destiček budou znovu testovány u všech pacientů.

Separace krevních destiček:

Pro studie krevních destiček bude venózní krev (30 ml) odebírána silikonizovanými injekčními stříkačkami do kyselého citrátového roztoku dextrózy (1,4% kyselina citrónová, 2,5% citrát sodný a 2% dextróza) v poměru 9:1 (v:v) pro příprava promytých destiček (WP). WP se připraví centrifugací při 240g po dobu 20 min. Krevní destička se dvakrát promyje v 5 mmol Hepes pufru, pH 7,4 (140 mmol NaCl, 2 mmol KCL, 1 mmol MgCl2, 5 mmol Hepes, 12 mmol NaHC03 a 5,5 mmol glukózy). Pro přípravu suspenze WP se během přípravy WP přidá 15 ul kyseliny octové (1 mmol) k 1 ml suspenze destiček, aby se zajistily kyselé podmínky, které jsou nutné pro resuspendování destiček. Tento postup sníží pH média na 6,5 ​​a neovlivní agregační odezvu WP.

Agregace krevních destiček:

Kolagen (Nycomed, Německo) bude použit jako agregační činidlo v koncentraci 4 ug/ml (tato koncentrace může způsobit až 60% amplitudu agregace ve WP). Agregace krevních destiček bude prováděna při 37ºC v agregometru s použitím hepes jako referenčního systému. Výsledky budou vyjádřeny jako rozsah maximální agregace (% maximální amplitudy) a také jako sklon agregační křivky (cm/min).

Obsah cholesterolu v membránách krevních destiček:

Krevní destičky se třikrát promyjí pufrem Hepes a poté se dvakrát sonikují po dobu 20 sekund při 80 wattech. Destičkové lipidy budou extrahovány směsí hexan:isopropanolol (3:2, v:v). Obsah cholesterolu bude měřen ve vysušené hexanové fázi metodou podle Chiamori et al (12). Destičkový protein bude stanoven metodou Lowryho (13).