Effekten av serum LDL-senking på aspirinresistens

Pasientene vil bli behandlet med aspirin-belastningsdose på 500 mg og deretter 100 mg/dag i andre 4 dager. For pasienter som skal innskrives i ordinær arbeidstid, vil blodplateaggregasjonstest og kolesterolinnhold i blodplatemembraner bli utført ved baseline.

Blodprøver for lipider, lever (ALT,AST,GGT,alkalisk fosfatase og bilirubin) og nyrefunksjonsprøver (blod urea nitrogen og kreatinin), fullstendig blodtelling, generell urinprøve og serumhomocystein vil bli tatt den andre dagen.

På den femte dagen vil optisk blodplateaggregasjonstest, kolesterolinnhold i blodplatemembraner, blodplatefunksjon i PFA-100-systemet og løselig p-selektin i plasma gjøres. Dersom pasienten har aspirinresistens (blodplateaggregering 20 % med epinefrin eller 70 % med ADP), vil LDL reduseres i plasma hos 20 pasienter med hypolipidemiske legemidler (statin alene eller kombinert med ezetimib). Andre 20 pasienter vil fortsatt bli behandlet med aspirin alene.

En måned senere vil det bli tatt blodprøver for lipider, lever (ALT,AST,GGT,alkalisk fosfatase og bilirubin) og nyrefunksjonsprøver (blod urea nitrogen og kreatinin), fullstendig blodtelling, generell urinprøve og serumhomocystein. tid og blodplateaktivitet vil bli testet på nytt for alle pasienter.

Blodplate-separasjon:

For blodplatestudier vil venøst ​​blod (30 ml) samles opp gjennom silikoniserte sprøyter i sur sitrat dekstroseløsning (1,4 % sitronsyre, 2,5 % natriumcitrat og 2 % dekstrose) i et forhold på 9:1 (v:v) for vaskede blodplater (WP) forberedelse. WP vil bli tilberedt ved sentrifugering ved 240g i 20 min. Blodplaten vaskes to ganger i 5 mmol Hepes buffer, pH 7,4 (140 mmol NaCl, 2 mmol KCL, 1 mmol MgCl2, 5 mmol Hepes, 12 mmol NaHCO3 og 5,5 mmol glukose). For fremstilling av WP-suspensjon vil 15 uL eddiksyre (1 mmol) tilsettes til 1 ml blodplatesuspensjon gjennom hele WP-prepareringen for å sikre sure forhold som er nødvendige for blodplatesuspensjon. Denne prosedyren vil redusere mediets pH til 6,5 og den påvirker ikke aggregeringsresponsen til WP.

Blodplateaggregering:

Kollagen (Nycomed, Tyskland) vil bli brukt som aggregeringsmiddel i en konsentrasjon på 4 ug/ml (denne konsentrasjonen kan forårsake opptil 60 % aggregasjonsamplitude i WP). Blodplateaggregering vil bli utført ved 37ºC i aggregometer ved bruk av hepes som referansesystem. Resultatene vil bli uttrykt som graden av maksimal aggregering (% av maksimal amplitude) og også som helningen til aggregeringskurven (cm/min).

Kolesterolinnhold i blodplatemembraner:

Blodplatene vaskes tre ganger med Hepes-buffer, og deretter sonikeres to ganger i 20 sekunder ved 80 watt. Blodplatelipider vil bli ekstrahert med heksan:isopropanolol (3:2, v:v). Kolesterolinnholdet vil bli målt i den tørkede heksanfasen ved metoden til Chiamori et al (12). Blodplateprotein vil bli bestemt ved å bruke metoden til Lowry (13).