Die Wirkung der Serum-LDL-Senkung auf die Aspirin-Resistenz

Die Patienten werden mit einer Aspirin-Ladedosis von 500 mg und dann 100 mg/Tag für die anderen 4 Tage behandelt. Bei Patienten, die in die regulären Arbeitszeiten aufgenommen werden, werden zu Studienbeginn ein Thrombozytenaggregationstest und der Cholesteringehalt in den Thrombozytenmembranen durchgeführt.

Am zweiten Tag werden Bluttests für Lipide, Leber (ALT, AST, GGT, alkalische Phosphatase und Bilirubin) und Nierenfunktionstests (Blut-Harnstoff-Stickstoff und Kreatinin), ein großes Blutbild, ein allgemeiner Urintest und Serum-Homocystein durchgeführt.

Am fünften Tag wird ein optischer Thrombozytenaggregationstest, Cholesteringehalt in Thrombozytenmembranen, Thrombozytenfunktion im PFA-100-System und lösliches p-Selectin im Plasma durchgeführt. mit ADP) wird LDL im Plasma von 20 Patienten durch hypolipidämische Medikamente (Statin allein oder in Kombination mit Ezetimib) gesenkt. Weitere 20 Patienten werden weiterhin nur mit Aspirin behandelt.

Einen Monat später werden Bluttests für Lipide, Leber (ALT, AST, GGT, alkalische Phosphatase und Bilirubin) und Nierenfunktionstests (Blut-Harnstoff-Stickstoff und Kreatinin), ein großes Blutbild, ein allgemeiner Urintest und Serum-Homocystein für den zweiten durchgeführt Zeit und Thrombozytenaktivität werden bei allen Patienten erneut getestet.

Thrombozytentrennung:

Für Thrombozytenstudien wird venöses Blut (30 ml) durch silikonisierte Spritzen in saurer Citrat-Dextrose-Lösung (1,4 % Citronensäure, 2,5 % Natriumcitrat und 2 % Dextrose) in einem Verhältnis von 9:1 (v:v) gesammelt Vorbereitung der gewaschenen Blutplättchen (WP). WP wird durch 20-minütige Zentrifugation bei 240 g hergestellt. Die Thrombozytenglocke wird zweimal in 5 mmol Hepes-Puffer, pH 7,4 (140 mmol NaCl, 2 mmol KCL, 1 mmol MgCl2, 5 mmol Hepes, 12 mmol NaHCO3 und 5,5 mmol Glucose) gewaschen. Zur Herstellung der WP-Suspension werden 15 ul Essigsäure (1 mmol) zu 1 ml Thrombozytensuspension während der gesamten WP-Zubereitung gegeben, um die für die Thrombozyten-Resuspension erforderlichen sauren Bedingungen sicherzustellen. Dieses Verfahren reduziert den pH-Wert des Mediums auf 6,5 und beeinflusst nicht die Aggregationsreaktion des WP.

Thrombozytenaggregation:

Kollagen (Nycomed, Deutschland) wird als Aggregationsmittel in einer Konzentration von 4 ug/ml verwendet (diese Konzentration kann bis zu 60 % Aggregationsamplitude bei WP verursachen). Die Thrombozytenaggregation wird bei 37 °C im Aggregometer unter Verwendung von Hepes als Referenzsystem durchgeführt. Die Ergebnisse werden als Ausmaß der maximalen Aggregation (% der maximalen Amplitude) und auch als Steigung der Aggregationskurve (cm/min) ausgedrückt.

Cholesteringehalt in Thrombozytenmembranen:

Blutplättchen werden dreimal mit Hepes-Puffer gewaschen und dann zweimal für 20 Sekunden bei 80 Watt beschallt. Blutplättchenlipide werden mit Hexan:Isopropanolol (3:2, v:v) extrahiert. Der Cholesteringehalt wird in der getrockneten Hexanphase nach dem Verfahren von Chiamori et al. (12) gemessen. Blutplättchenprotein wird unter Verwendung des Verfahrens von Lowry (13) bestimmt.