L'effet de la baisse des LDL sériques sur la résistance à l'aspirine

Les patients seront traités par une dose de charge d'aspirine de 500 mg, puis de 100 mg/jour pendant les 4 autres jours. Pour les patients qui seront inscrits pendant les heures de travail régulières, le test d'agrégation plaquettaire et la teneur en cholestérol dans les membranes plaquettaires seront effectués au départ.

Des tests sanguins pour les lipides, le foie (ALT, AST, GGT, la phosphatase alcaline et la bilirubine) et les tests de la fonction rénale (azote uréique sanguin et créatinine), la formule sanguine complète, le test d'urine général et l'homocystéine sérique seront effectués le deuxième jour.

Au cinquième jour, un test d'agrégation plaquettaire optique, la teneur en cholestérol dans les membranes plaquettaires, la fonction plaquettaire dans le système PFA-100 et la p-sélectine soluble dans le plasma seront effectués Si le patient présente une résistance à l'aspirine (agrégation plaquettaire 20 % avec épinéphrine ou 70 % avec ADP), les LDL seront abaissés dans le plasma de 20 patients par des médicaments hypolipidémiants (statine seule ou associée à l'ézétimibe). Les 20 autres patients continueront à être traités par l'aspirine seule.

Un mois plus tard, des tests sanguins pour les lipides, le foie (ALT, AST, GGT, Phosphatase alcaline et bilirubine) et les tests de la fonction rénale (azote uréique sanguin et créatinine), numération globulaire complète, test d'urine général et homocystéine sérique seront effectués pour le deuxième le temps et l'activité plaquettaire seront à nouveau testés pour tous les patients.

Séparation plaquettaire :

Pour les études plaquettaires, le sang veineux (30 ml) sera prélevé à l'aide de seringues siliconées dans une solution de dextrose de citrate acide (1,4 % d'acide citrique, 2,5 % de citrate de sodium et 2 % de dextrose) dans un rapport de 9:1 (v:v) pour préparation de plaquettes lavées (WP).WP sera préparé par centrifugation à 240g pendant 20 min. Le bellet plaquettaire sera lavé deux fois dans du tampon Hepes 5 mmol, pH 7,4 (NaCl 140 mmol, KCL 2 mmol, MgCl2 1 mmol, Hepes 5 mmol, NaHCO3 12 mmol et glucose 5,5 mmol). Pour la préparation de la suspension WP, 15 uL d'acide acétique (1 mmol) seront ajoutés à 1 ml de suspension plaquettaire tout au long de la préparation WP afin d'assurer les conditions acides nécessaires à la remise en suspension plaquettaire. Cette procédure réduira le pH du milieu à 6,5 et n'influencera pas la réponse d'agrégation du WP.

Agrégation plaquettaire :

Le collagène (Nycomed, Allemagne) sera utilisé comme agent agrégant à une concentration de 4 ug/ml (cette concentration peut provoquer jusqu'à 60 % d'amplitude d'agrégation dans le WP). L'agrégation plaquettaire sera réalisée à 37°C dans un agrégomètre en utilisant l'hepes comme système de référence. Les résultats seront exprimés comme l'étendue de l'agrégation maximale (% de l'amplitude maximale) et aussi comme la pente de la courbe d'agrégation (cm/min).

Teneur en cholestérol des membranes plaquettaires :

Les plaquettes seront lavées trois fois avec du tampon Hepes, puis soniquées deux fois pendant 20 secondes à 80 watts. Les lipides plaquettaires seront extraits avec de l'hexane:isopropanolol (3:2, v:v). La teneur en cholestérol sera mesurée dans la phase hexanique séchée par la méthode de Chiamori et al (12). La protéine plaquettaire sera déterminée selon la méthode de Lowry (13).