Влияние снижения уровня ЛПНП в сыворотке на резистентность к аспирину

Пациентов будут лечить нагрузочной дозой аспирина 500 мг, а затем 100 мг/день в течение следующих 4 дней. Для пациентов, которые будут включены в стандартное рабочее время, на исходном уровне будет проводиться тест на агрегацию тромбоцитов и содержание холестерина в мембранах тромбоцитов.

Анализы крови на липиды, печень (АЛТ, АСТ, ГГТ, щелочная фосфатаза и билирубин) и тесты функции почек (азот мочевины крови и креатинин), общий анализ крови, общий анализ мочи и сывороточный гомоцистеин будут сделаны на второй день.

На пятые сутки проводят тест на оптическую агрегацию тромбоцитов, содержание холестерина в мембранах тромбоцитов, функцию тромбоцитов в системе ПФА-100 и растворимый р-селектин в плазме. с АДФ), уровень ЛПНП в плазме будет снижен у 20 пациентов с помощью гиполипидемических препаратов (статин отдельно или в сочетании с эзетимибом). Еще 20 пациентов будут продолжать лечить только аспирином.

Через месяц будут проведены анализы крови на липиды, анализы печени (АЛТ, АСТ, ГГТ, щелочная фосфатаза и билирубин) и функции почек (азот мочевины крови и креатинин), общий анализ крови, общий анализ мочи и сывороточный гомоцистеин. время и активность тромбоцитов будут снова проверены для всех пациентов.

Разделение тромбоцитов:

Для исследования тромбоцитов венозную кровь (30 мл) собирают через силиконизированные шприцы в раствор кислого цитрата и декстрозы (1,4 % лимонной кислоты, 2,5 % цитрата натрия и 2 % декстрозы) в соотношении 9:1 (об.:об.) для приготовление промытых тромбоцитов (WP). WP готовят центрифугированием при 240 г в течение 20 мин. Беллет тромбоцитов дважды промывают в 5 ммоль буфера Hepes, рН 7,4 (140 ммоль NaCl, 2 ммоль KCL, 1 ммоль MgCl2, 5 ммоль Hepes, 12 ммоль NaHCO3 и 5,5 ммоль глюкозы). Для приготовления суспензии WP 15 мкл уксусной кислоты (1 ммоль) добавляют к 1 мл суспензии тромбоцитов во время приготовления WP, чтобы обеспечить кислые условия, необходимые для ресуспендирования тромбоцитов. Эта процедура снизит рН среды до 6,5 и не повлияет на реакцию агрегации WP.

Скопление тромбоцитов:

Коллаген (Nycomed, Германия) будет использоваться в качестве агрегирующего агента в концентрации 4 мкг/мл (эта концентрация может вызвать до 60% амплитуды агрегации в WP). Агрегацию тромбоцитов будут проводить при 37ºC в агрегометре с использованием Hepes в качестве эталонной системы. Результаты будут выражены в виде степени максимальной агрегации (% от максимальной амплитуды), а также в виде наклона кривой агрегации (см/мин).

Содержание холестерина в мембранах тромбоцитов:

Тромбоциты трижды промывают буфером Hepes, а затем дважды обрабатывают ультразвуком в течение 20 секунд при мощности 80 Вт. Липиды тромбоцитов экстрагируют смесью гексан:изопропанолол (3:2, об.:об.). Содержание холестерина будет измеряться в высушенной фазе гексана по методу Чиамори и др. (12). Белок тромбоцитов будет определяться по методу Лоури (13).