Seerumin LDL:n alentamisen vaikutus aspiriiniresistenssiin

Potilaita hoidetaan aspiriinin kyllästysannoksella 500 mg ja sitten 100 mg/vrk muiden 4 päivän ajan. Potilaille, jotka otetaan mukaan normaaliin työaikaan, tehdään verihiutaleiden aggregaatiotesti ja verihiutaleiden kalvojen kolesterolipitoisuus lähtötilanteessa.

Verikokeet lipideille, maksalle (ALT,AST,GGT, alkalinen fosfataasi ja bilirubiini) ja munuaisten toimintakokeet (veren ureatyppi ja kreatiniini), täydellinen verikuva, yleinen virtsakoe ja seerumin homokysteiinitutkimus tehdään toisena päivänä.

Viidennen päivän optinen verihiutaleiden aggregaatiokoe, verihiutaleiden kalvojen kolesterolipitoisuus, verihiutaleiden toiminta PFA-100-järjestelmässä ja liukoinen p-selektiini plasmassa tehdään Jos potilaalla on aspiriiniresistenssi (verihiutaleiden aggregaatio 20 % epinefriinillä tai 70 % ADP:n kanssa), LDL alenee 20 potilaan plasmassa hypolipideemisten lääkkeiden avulla (pelkästään statiini tai yhdistettynä etsetimibin kanssa). Muut 20 potilasta saavat jatkossakin hoitoa pelkällä aspiriinilla.

Kuukautta myöhemmin tehdään toisen kerran verikokeet lipidien, maksan (ALT,AST,GGT, alkalinen fosfataasi ja bilirubiini) ja munuaisten toimintakokeet (veren ureatyppi ja kreatiniini), täydellinen verenkuva, yleinen virtsakoe ja seerumin homokysteiini. aika ja verihiutaleiden aktiivisuus testataan uudelleen kaikille potilaille.

Verihiutaleiden erotus:

Verihiutaletutkimuksia varten laskimoveri (30 ml) kerätään silikonoitujen ruiskujen kautta happamaan sitraattidekstroosiliuokseen (1,4 % sitruunahappoa, 2,5 % natriumsitraattia ja 2 % dekstroosia) suhteessa 9:1 (tilavuus:tilavuus) pestyjen verihiutaleiden (WP) valmistus. WP valmistetaan sentrifugoimalla 240 g:ssä 20 minuutin ajan. Verihiutalepelletti pestään kahdesti 5 mmol:ssa Hepes-puskurissa, pH 7,4 (140 mmol NaCl, 2 mmol KCL, 1 mmol MgCl2, 5 mmol Hepes, 12 mmol NaHC03 ja 5,5 mmol glukoosia). WP-suspension valmistusta varten 15 ul etikkahappoa (1 mmol) lisätään 1 ml:aan verihiutaleiden suspensiota koko WP-valmisteen ajan, jotta varmistetaan verihiutaleiden uudelleensuspendointiin vaadittavat happamat olosuhteet. Tämä menettely laskee väliaineen pH:n arvoon 6,5, eikä se vaikuta WP:n aggregaatiovasteeseen.

Verihiutaleiden aggregaatio:

Kollageenia (Nycomed, Saksa) käytetään aggregointiaineena pitoisuutena 4 ug/ml (tämä pitoisuus voi aiheuttaa jopa 60 % aggregaatioamplitudin WP:ssä). Verihiutaleaggregaatio suoritetaan 37 ºC:ssa aggregometrissä käyttäen hepesiä vertailujärjestelmänä. Tulokset ilmaistaan ​​maksimaalisen aggregaation laajuutena (% maksimiamplitudista) ja myös aggregaatiokäyrän kaltevuutena (cm/min).

Verihiutaleiden kalvojen kolesterolipitoisuus:

Verihiutaleet pestään kolme kertaa Hepes-puskurilla ja sitten sonikoidaan kahdesti 20 sekunnin ajan 80 watilla. Verihiutaleiden lipidit uutetaan heksaani:isopropanololilla (3:2, tilavuus:tilavuus). Kolesterolipitoisuus mitataan kuivatussa heksaanifaasissa Chiamori et al (12) menetelmällä. Verihiutaleproteiini määritetään Lowryn menetelmällä (13).