Het effect van serum-LDL-verlaging op aspirineresistentie

De patiënten zullen worden behandeld met een oplaaddosis aspirine van 500 mg en daarna 100 mg/dag gedurende de overige 4 dagen. Voor patiënten die in de reguliere werkuren zullen worden ingeschreven, zullen bij aanvang een bloedplaatjesaggregatietest en cholesterolgehalte in bloedplaatjesmembranen worden uitgevoerd.

Bloedonderzoek voor lipiden, lever (ALT, AST, GGT, alkalische fosfatase en bilirubine) en nierfunctietesten (bloedureumstikstof en creatinine), volledig bloedbeeld, algemene urinetest en serumhomocysteïne worden op de tweede dag uitgevoerd.

Op de vijfde dag wordt een optische bloedplaatjesaggregatietest gedaan om het cholesterolgehalte in de bloedplaatjesmembranen, de bloedplaatjesfunctie in het PFA-100-systeem en oplosbaar p-selectine in het plasma te controleren. met ADP), zal LDL in het plasma van 20 patiënten worden verlaagd door hypolipidemische geneesmiddelen (statine alleen of gecombineerd met ezetimibe). Andere 20 patiënten zullen alleen met aspirine behandeld blijven worden.

Een maand later zullen bloedtesten voor lipiden, lever (ALT, AST, GGT, alkalische fosfatase en bilirubine) en nierfunctietesten (bloedureumstikstof en creatinine), volledig bloedbeeld, algemene urinetest en serumhomocysteïne worden gedaan voor de tweede tijd en bloedplaatjesactiviteit zullen opnieuw worden getest voor alle patiënten.

Scheiding van bloedplaatjes:

Voor bloedplaatjesonderzoek wordt veneus bloed (30 ml) verzameld via gesiliconiseerde injectiespuiten in een zure citraat-dextrose-oplossing (1,4% citroenzuur, 2,5% natriumcitraat en 2% dextrose) in een verhouding van 9:1 (v:v) voor gewassen bloedplaatjes (WP) bereiding. WP wordt bereid door gedurende 20 minuten te centrifugeren bij 240 g. De bloedplaatjesbellet wordt tweemaal gewassen in 5 mmol Hepes-buffer, pH 7,4 (140 mmol NaCl, 2 mmol KCL, 1 mmol MgCl2, 5 mmol Hepes, 12 mmol NaHC03 en 5,5 mmol glucose). Voor de bereiding van WP-suspensie wordt 15 µl azijnzuur (1 mmol) toegevoegd aan 1 ml bloedplaatjessuspensie tijdens de WP-bereiding om te zorgen voor zure omstandigheden die nodig zijn voor hersuspensie van bloedplaatjes. Deze procedure verlaagt de pH van het medium tot 6,5 en heeft geen invloed op de aggregatierespons van de WP.

Bloedplaatjesaggregatie:

Collageen (Nycomed, Duitsland) zal worden gebruikt als het aggregatiemiddel in een concentratie van 4 µg/ml (deze concentratie kan tot 60% aggregatie-amplitude in WP veroorzaken). Bloedplaatjesaggregatie zal worden uitgevoerd bij 37°C in een aggregometer met behulp van hepes als referentiesysteem. De resultaten worden uitgedrukt als de mate van maximale aggregatie (% van de maximale amplitude) en ook als de helling van de aggregatiecurve (cm/min).

Cholesterolgehalte in bloedplaatjesmembranen:

Bloedplaatjes worden drie keer gewassen met Hepes-buffer en daarna tweemaal gedurende 20 seconden gesoniceerd bij 80 watt. Bloedplaatjeslipiden worden geëxtraheerd met hexaan:isopropanolol (3:2, v:v). Het cholesterolgehalte zal worden gemeten in de gedroogde hexaanfase volgens de methode van Chiamori et al (12). Bloedplaatjeseiwit zal worden bepaald met behulp van de methode van Lowry (13).