Virkningen af ​​serum-LDL-sænkning på aspirinresistens

Patienterne vil blive behandlet med aspirindosis på 500 mg og derefter 100 mg/dag i de øvrige 4 dage. For patienter, der vil blive indskrevet i den almindelige arbejdstid, vil blodpladeaggregationstest og kolesterolindhold i blodplademembraner blive udført ved baseline.

Blodprøver for lipider, lever (ALT,AST,GGT,alkalisk fosfatase og bilirubin) og nyrefunktionsprøver (blodurinstofnitrogen og kreatinin), fuldstændig blodtælling, generel urinprøve og serumhomocystein vil blive udført den anden dag.

På den femte dag udføres optisk blodpladeaggregationstest, kolesterolindhold i blodplademembraner, trombocytfunktion i PFA-100-systemet og opløseligt p-selektin i plasmaet, hvis patienten har aspirinresistens (blodpladeaggregation 20 % med epinephrin eller 70 % med ADP), vil LDL blive sænket i plasma hos 20 patienter med hypolipidæmiske lægemidler (statin alene eller kombineret med ezetimib). Andre 20 patienter vil fortsat blive behandlet med aspirin alene.

En måned senere vil der blive taget blodprøver for lipider, lever (ALT,AST,GGT,alkalisk fosfatase og bilirubin) og nyrefunktionsprøver (blodurinstofnitrogen og kreatinin), fuldstændig blodtælling, generel urinprøve og serumhomocystein. tid og blodpladeaktivitet vil blive testet igen for alle patienter.

Blodpladeadskillelse:

Til blodpladeundersøgelser vil venøst ​​blod (30 ml) blive opsamlet gennem silikoniserede sprøjter i sur citrat dextroseopløsning (1,4 % citronsyre, 2,5 % natriumcitrat og 2 % dextrose) i et forhold på 9:1 (v:v) for vaskede blodplader (WP) præparation. WP vil blive fremstillet ved centrifugering ved 240 g i 20 min. Blodpladen vaskes to gange i 5 mmol Hepes-buffer, pH 7,4 (140 mmol NaCl, 2 mmol KCL, 1 mmol MgCl2, 5 mmol Hepes, 12 mmol NaHCO3 og 5,5 mmol glucose). Til fremstilling af WP-suspension tilsættes 15 uL eddikesyre (1 mmol) til 1 ml blodpladesuspension under hele WP-fremstillingen for at sikre sure forhold, som er nødvendige for blodpladeresuspension. Denne procedure vil reducere mediets pH til 6,5, og den påvirker ikke WP'ens aggregeringsrespons.

Blodpladeaggregering:

Kollagen (Nycomed, Tyskland) vil blive brugt som aggregeringsmiddel i en koncentration på 4 ug/ml (denne koncentration kan forårsage op til 60 % aggregeringsamplitude i WP). Blodpladeaggregering vil blive udført ved 37ºC i aggregometer ved brug af hepes som referencesystem. Resultater vil blive udtrykt som omfanget af maksimal aggregering (% af maksimal amplitude) og også som hældningen af ​​aggregeringskurven (cm/min).

Kolesterolindhold i blodplademembraner:

Blodplader vil blive vasket tre gange med Hepes-buffer og derefter sonikeret to gange i 20 sekunder ved 80 watt. Blodpladelipider vil blive ekstraheret med hexan:isopropanolol (3:2, v:v). Kolesterolindholdet vil blive målt i den tørrede hexanfase ved metoden ifølge Chiamori et al (12). Blodpladeprotein vil blive bestemt ved hjælp af metoden ifølge Lowry (13).