Identifikace ochranných a zhoršujících se faktorů steatohepatitidy (NASH).

Nedávné epidemiologické studie ve Francii ukázaly silnou prevalenci obezity (12,4 %) a její silný nárůst během posledních 20 let. Z vícečetných komplikací souvisejících s obezitou patří k nejčastějším jaterní komplikace (steatóza a steatohepatitida (NASH)). Naše nedávná práce ukázala, že tuková tkáň po vzoru jaterní tkáně také exprimovala CRP, hepcidin a IL-6 na genové a proteinové úrovni. Také jsme zaznamenali, že 5 % našich pacientů i přes svou obezitu mělo normální játra bez steatózy.

Hlavním cílem této práce bude identifikovat profil genové exprese pomocí microarray v játrech, který by umožnil odlišit obézní subjekty s normálními játry od subjektů se steatohepatitidou nebo steatózou. Genové studie budou zpočátku prováděny u morbidních obézních jedinců bez diabetu (ženy, index tělesné hmotnosti > 40 kg/m2). Vybereme vzorek 10 pacientů s normálními játry, 10 pacientů s NASH a 10 pacientů s jednoduchou steatózou. Tyto genové studie budou provedeny v játrech a viscerální tukové tkáni od stejných pacientů, což umožní vyhodnotit vzájemný vztah mezi játry a tukovou tkání. Zahrneme také 10 pacientů s nadváhou a NASH (studie pouze na jaterní biopsii). Jaterní kontroly (10) budou poskytnuty z chirurgického oddělení Pr Jean Gugenheim a jsou prakticky všechny dostupné. Jsou „zdravou“ tkání v blízkosti jaterních benigních nádorů. Bude také použito komerční ARN (Biosciences, Stratagene). Po identifikaci těchto profilů genové exprese u omezeného počtu pacientů ověříme tyto profily genové exprese u významnějšího počtu pacientů (30 až 45 pacientů s NASH ve srovnání s 30 až 45 pacienty s jednoduchou steatózou).

Vedlejšími cíli budou:

Porovnat profil genové exprese mezi játry a tukovou viscerální a podkožní tkání u morbidních obézních subjektů Po identifikaci skupiny zájmových genů, jejichž exprese je modifikována u malého počtu pacientů s NASH, pokračujeme v naší studii s omezenějším počtem genů.

• Ověřit u významnějšího počtu pacientů modifikace exprese těchto genů přístupem real-time PCR
• Stanovit místo exprese těchto faktorů v játrech nebo tukové tkáni imunohistochemickou analýzou
• Stanovit míru exprese těchto faktorů v játrech nebo tukové tkáni biochemickou analýzou (Western blot)
• Nakonec by mohla být provedena dávka séra, aby se určilo, zda by sérové ​​proteiny mohly představovat prediktivní index NASH nebo steatózy.

Použijeme sérii obézních pacientů z CHJ v Nice, u kterých byl naprogramován chirurgický přístup k obezitě. Předoperační průzkumy zahrnují klinicko-biologická vyšetření. Během intervence budou pro výzkum systematicky realizovány biopsie jater a tukové tkáně. Využijeme také jaterní biopsie provedené u pacientů s nadváhou a NASH.

Proveditelnost díla nepředstavuje žádný problém. Chirurgické oddělení provádí měsíčně 10 operací obezity. Máme již sérii 280 pacientů. Musíme zahrnout 150 pacientů, abychom byli schopni získat dostatek pacientů s normálními játry. Pro ostatní pacienty použijeme tkáňovou banku, která je již provedena a pacienti již dali souhlas. Nakonec musíme vytvořit banku jaterní tkáně pro pacienty s nadváhou. Všechny tyto základní techniky jsou řízeny týmem z INSERM U 568 Očekávané výsledky: Touto strategií bychom mohli vybrat protektivní a zhoršující faktory steatohepatitidy (NASH), které budou schopny vést k identifikaci prediktivních biologických markerů lézí steatohepatitidy a tím identifikovat pacientů s rizikem jaterních lézí. Tyto faktory by také mohly sloužit jako budoucí terapeutické cíle.