Identifiering av skyddande och förvärrade Steatohepatit (NASH) faktorer

Nyligen genomförda epidemiologiska studier i Frankrike visade en stark förekomst av fetma (12,4 %) och dess kraftiga ökning under de senaste 20 åren. Bland de många komplikationerna relaterade till fetma är leverkomplikationerna (steatos och steatohepatit (NASH)) bland de vanligaste. Vårt senaste arbete visade att fettvävnaden, efter exemplet med levervävnad, också uttryckte CRP, hepcidinet och IL-6 på gen- och proteinnivå. Vi märkte också att 5 % av våra patienter trots sin fetma uppvisade en normal lever utan steatos.

Huvudsyftet med detta arbete kommer att vara att identifiera en profil av genuttryck genom mikroarray i levern som kan göra det möjligt att skilja de överviktiga patienterna med en normal lever från de med steatohepatit eller steatos. Genstudierna kommer initialt att utföras på sjukliga överviktiga personer utan diabetes (kvinnor, kroppsviktsindex > 40 kg/m2). Vi kommer att välja ett urval av 10 patienter som har en normal lever, 10 patienter som har en NASH och 10 patienter som har en enkel steatos. Dessa genstudier kommer att utföras i levern och den viscerala fettvävnaden från samma patienter, vilket kommer att göra det möjligt att utvärdera det inbördes förhållandet mellan levern och fettvävnaden. Vi kommer också att inkludera 10 patienter som har en övervikt och en NASH (studie endast på leverbiopsi). Leverkontrollerna (10) kommer att tillhandahållas från operationsavdelningen hos Pr Jean Gugenheim och är praktiskt taget alla tillgängliga. De är "frisk" vävnad nära benigna levertumörer. Kommersiell ARN (Biovetenskap, Stratagene) kommer också att användas. Efter identifiering av dessa genuttrycksprofiler hos ett begränsat antal patienter kommer vi att validera dessa genuttrycksprofiler hos ett mer betydande antal patienter (30 till 45 patienter som har en NASH jämfört med 30 till 45 patienter som har en enkel steatos).

De sekundära målen kommer att vara:

För att jämföra profilen för genuttryck mellan levern och fettvävnaden i den viscerala och subkutana vävnaden från sjukliga överviktiga personer Efter identifieringen av en grupp av intressanta gener vars uttryck är modifierat i ett litet antal patienter som har en NASH, fortsätter vi vår studie med ett mer begränsat antal gener.

• Att validera i ett mer betydande antal patienter modifieringarna av uttrycket av dessa gener genom ett tillvägagångssätt med realtids-PCR
• För att bestämma platsen för uttryck av dessa faktorer i levern eller fettvävnaden genom immunhistokemisk analys
• För att bestämma uttryckningshastigheten för dessa faktorer i levern eller fettvävnaden genom biokemisk analys (Western blot)
• En serumdosering kunde slutligen utföras för att bestämma om serumproteinerna skulle kunna utgöra ett prediktivt index för NASH eller steatos.

Vi kommer att använda serien av överviktiga patienter från CHU i Nice vars en kirurgisk metod för fetma var programmerad. Preoperativa undersökningar inkluderar klinisk-biologiska bedömningar. Under interventionen kommer lever- och fettvävnadsbiopsierna att systematiskt realiseras för forskning. Vi kommer också att använda de leverbiopsier som utförs av patienter med övervikt och NASH.

Genomförbarheten av arbetet utgör inga problem. Kirurgiavdelningen genomför 10 operationer av fetma per månad. Vi har redan en serie på 280 patienter. Vi måste inkludera 150 patienter för att kunna få tillräckligt med patienter med normal lever. För de andra patienterna kommer vi att använda vävnadsbanken som redan är genomförd och patienterna redan gett sitt samtycke. Slutligen måste vi skapa en levervävnadsbank för patienter med övervikt. Alla dessa grundläggande tekniker kontrolleras inom teamet från INSERM U 568 väntade resultat: Vi skulle med denna strategi kunna välja skyddande och försämrande faktorer av steatohepatit (NASH) som kommer att kunna leda till att identifiera prediktiva biologiska markörer för lesioner av steatohepatit och därmed identifiera patienter med risk för leverskador. Dessa faktorer kan också tjäna som framtida terapeutiska mål.