Identificación de factores protectores y de empeoramiento de la esteatohepatitis (NASH)

Recientes estudios epidemiológicos en Francia mostraron una fuerte prevalencia de obesidad (12,4%) y su fuerte aumento durante los últimos 20 años. Entre las múltiples complicaciones relacionadas con la obesidad, las complicaciones hepáticas (esteatosis y esteatohepatitis (EHNA)) se encuentran entre las más frecuentes. Nuestro trabajo reciente mostró que el tejido adiposo, siguiendo el ejemplo del tejido hepático, también expresaba PCR, la hepcidina y la IL-6 a nivel de genes y proteínas. También notamos que el 5% de nuestros pacientes a pesar de su obesidad presentaban un hígado normal sin esteatosis.

El objetivo principal de este trabajo será identificar un perfil de expresión génica por microarray en hígado que permita diferenciar a los sujetos obesos con hígado normal de aquellos con esteatohepatitis o esteatosis. Los estudios genéticos se realizarán inicialmente en sujetos obesos mórbidos sin diabetes (mujeres, índice de masa corporal > 40 kg/m2). Seleccionaremos una muestra de 10 pacientes con hígado normal, 10 pacientes con EHNA y 10 pacientes con esteatosis simple. Estos estudios génicos se realizarán en el hígado y tejido adiposo visceral de estos mismos pacientes lo que permitirá evaluar la interrelación entre el hígado y el tejido adiposo. También incluiremos 10 pacientes con sobrepeso y NASH (estudio solo en biopsia hepática). Los controles hepáticos (10) serán proporcionados por el departamento de cirugía del Pr Jean Gugenheim y están prácticamente todos disponibles. Son tejido "sano" cerca de tumores hepáticos benignos. También se utilizará ARN comercial (Biosciences, Stratagene). Tras la identificación de estos perfiles de expresión génica en un número restringido de pacientes, validaremos estos perfiles de expresión génica en un número más significativo de pacientes (30 a 45 pacientes con EHNA frente a 30 a 45 pacientes con esteatosis simple).

Los objetivos secundarios serán:

Comparar el perfil de expresión génica entre el hígado y el tejido adiposo visceral y subcutáneo de los sujetos con obesidad mórbida Tras la identificación de un grupo de genes de interés cuya expresión se ve modificada en un pequeño número de pacientes con EHNA, continuamos nuestro estudio con un número más restringido de genes.

• Validar en un número más significativo de pacientes las modificaciones de expresión de estos genes mediante un abordaje por PCR en tiempo real
• Determinar el sitio de expresión de estos factores en el hígado o tejido adiposo mediante análisis inmunohistoquímico
• Determinar la tasa de expresión de estos factores en hígado o tejido adiposo mediante análisis bioquímicos (Western blot)
• Finalmente se podría realizar una dosificación sérica para determinar si las proteínas séricas podrían constituir un índice predictivo de la EHNA o esteatosis.

Utilizaremos la serie de pacientes obesos del CHU de Niza a los que se programó un abordaje quirúrgico de la obesidad. Las exploraciones preoperatorias incluyen evaluaciones clínico-biológicas. Durante la intervención se realizarán sistemáticamente biopsias de hígado y tejido adiposo para investigación. También utilizaremos las biopsias hepáticas realizadas en pacientes con sobrepeso y EHNA.

La viabilidad de la obra no plantea ningún problema. El departamento de cirugía realiza 10 cirugías de obesidad al mes. Ya tenemos una serie de 280 pacientes. Debemos incluir 150 pacientes para poder obtener suficientes pacientes con hígado normal. Para los demás pacientes utilizaremos el banco de tejidos que ya está realizado y los pacientes ya dieron su consentimiento. Finalmente debemos constituir un banco de tejido hepático para pacientes con sobrepeso. Todas estas técnicas fundamentales son controladas dentro del equipo del INSERM U 568 Resultados esperados: Con esta estrategia podríamos seleccionar factores protectores y de empeoramiento de la esteatohepatitis (EHNA) que podrán conducir a identificar marcadores biológicos predictivos de las lesiones de la esteatohepatitis y así identificar pacientes con riesgo de lesiones hepáticas. Estos factores también podrían servir como futuras dianas terapéuticas.