Identification des facteurs de protection et d'aggravation de la stéatohépatite (NASH)

Des études épidémiologiques récentes en France ont montré une forte prévalence de l'obésité (12,4%) et sa forte augmentation au cours des 20 dernières années. Parmi les multiples complications liées à l'obésité, les complications hépatiques (stéatose et stéatohépatite (NASH)) sont parmi les plus fréquentes. Nos travaux récents ont montré que le tissu adipeux, à l'instar du tissu hépatique, exprimait également la CRP, l'hepcidine et l'IL-6 au niveau génique et protéique. Nous avons aussi remarqué que 5% de nos patients malgré leur obésité présentaient un foie normal sans stéatose.

L'objectif principal de ce travail sera d'identifier un profil d'expression génique par microarray dans le foie qui pourrait permettre de différencier les sujets obèses ayant un foie normal de ceux atteints de stéatohépatite ou de stéatose. Les études géniques seront réalisées dans un premier temps chez des sujets obèses morbides sans diabète (femmes, indice de masse corporelle > 40 kg/m2). Nous sélectionnerons un échantillon de 10 patients ayant un foie normal, 10 patients ayant une NASH et 10 patients ayant une stéatose simple. Ces études géniques seront réalisées dans le foie et le tissu adipeux viscéral de ces mêmes patients ce qui permettra d'évaluer l'interrelation entre le foie et le tissu adipeux. Nous inclurons également 10 patients ayant un surpoids et une NASH (étude uniquement sur biopsie hépatique). Les foies témoins (10) seront fournis par le service de chirurgie du Pr Jean Gugenheim et sont pratiquement tous disponibles. Ce sont des tissus "sains" proches des tumeurs hépatiques bénignes. Des ARN commerciaux (Biosciences, Stratagene) seront également utilisés. Après identification de ces profils d'expression génique chez un nombre restreint de patients, nous validerons ces profils d'expression génique chez un nombre plus important de patients (30 à 45 patients ayant une NASH contre 30 à 45 patients ayant une stéatose simple).

Les objectifs secondaires seront :

Comparer le profil d'expression des gènes entre le foie et le tissu adipeux viscéral et sous-cutané des sujets obèses morbides Après l'identification d'un groupe de gènes d'intérêt dont l'expression est modifiée chez un petit nombre de patients ayant une NASH, nous poursuivons notre étude avec un nombre plus restreint de gènes.

• Valider chez un nombre plus important de patients les modifications d'expression de ces gènes par une approche par PCR en temps réel
• Déterminer le site d'expression de ces facteurs dans le foie ou le tissu adipeux par analyse immunohistochimique
• Déterminer le taux d'expression de ces facteurs dans le foie ou le tissu adipeux par analyse biochimique (Western blot)
• Un dosage sérique pourrait enfin être réalisé pour déterminer si les protéines sériques pouvaient constituer un indice prédictif de la NASH ou de la stéatose.

Nous utiliserons la série de patients obèses du CHU de Nice dont une approche chirurgicale de l'obésité a été programmée. Les explorations préopératoires comprennent des bilans clinico-biologiques. Au cours de l'intervention, des biopsies du foie et des tissus adipeux seront systématiquement réalisées à des fins de recherche. Nous utiliserons également les biopsies hépatiques réalisées chez des patients ayant un surpoids et une NASH.

La faisabilité des travaux ne pose aucun problème. Le service de chirurgie réalise 10 chirurgies de l'obésité par mois. Nous avons déjà une série de 280 patients. Nous devons inclure 150 patients afin de pouvoir obtenir suffisamment de patients avec un foie normal. Pour les autres patients, nous utiliserons la banque de tissus qui est déjà réalisée et les patients ont déjà donné leur consentement. Enfin il faut constituer une banque de tissus hépatiques pour les patients ayant un surpoids. Toutes ces techniques fondamentales sont maîtrisées au sein de l'équipe de l'INSERM U 568 Résultats attendus : Nous pourrions par cette stratégie sélectionner des facteurs protecteurs et aggravants de la stéatohépatite (NASH) qui pourront conduire à identifier des marqueurs biologiques prédictifs des lésions de stéatohépatite et ainsi à identifier patients à risque de lésions hépatiques. Ces facteurs pourraient également servir de futures cibles thérapeutiques.