A védő és súlyosbodó steatohepatitis (NASH) faktorok azonosítása

A közelmúltban Franciaországban végzett epidemiológiai tanulmányok az elhízás erős előfordulását (12,4%) és az elmúlt 20 évben erőteljes növekedést mutattak ki. Az elhízással összefüggő többszörös szövődmények közül a májszövődmények (steatosis és steatohepatitis (NASH)) a leggyakoribbak. Legutóbbi munkánk kimutatta, hogy a zsírszövet a májszövet példáját követve CRP-t, hepcidint és IL-6-ot is expresszált gén és fehérje szinten. Azt is észrevettük, hogy betegeink 5%-a elhízottsága ellenére normális májat mutatott, steatosis nélkül.

Ennek a munkának a fő célja a génexpresszió olyan profiljának meghatározása lesz a májban microarray segítségével, amely lehetővé teszi a normál májú elhízott alanyok és a steatohepatitisben vagy steatosisban szenvedők megkülönböztetését. A génvizsgálatokat kezdetben kórosan elhízott, cukorbetegségben nem szenvedő alanyokon (nők, testtömegindex > 40 kg/m2) végzik. 10 normál májú, 10 NASH-s betegből és 10 egyszerű steatosisú betegből álló mintát választunk ki. Ezeket a génvizsgálatokat ugyanazon betegek májában és zsigeri zsírszövetében végzik el, ami lehetővé teszi a máj és a zsírszövet közötti kölcsönhatás értékelését. 10 túlsúlyos és NASH-t (csak májbiopsziával végzett vizsgálat) is bevonunk. A májkontrollokat (10) Pr Jean Gugenheim sebészeti osztályáról biztosítják, és gyakorlatilag mindegyik elérhető. Ezek "egészséges" szövetek a máj jóindulatú daganatai közelében. A kereskedelmi ARN-t (Biosciences, Stratagene) is használni fogják. Miután azonosítottuk ezeket a génexpressziós profilokat korlátozott számú betegben, jelentősebb számú betegnél fogjuk validálni ezeket a génexpressziós profilokat (30-45 NASH-ban szenvedő betegnél, míg 30-45 egyszerű steatosisban szenvedő betegnél).

A másodlagos célok a következők lesznek:

A kóros elhízott alanyok mája és zsíros zsigeri és bőr alatti szövete közötti génexpresszió profiljának összehasonlítása Miután azonosítottunk egy olyan érdeklődésre számot tartó gének csoportot, amelyek expressziója módosult kis számú NASH-ban szenvedő betegben, folytatjuk vizsgálatunkat. korlátozottabb számú génnel.

• Jelentősebb számú betegben validálni e gének expressziójának módosulását valós idejű PCR módszerrel
• Ezen faktorok expressziós helyének meghatározása a májban vagy a zsírszövetben immunhisztokémiai elemzéssel
• Ezen faktorok expressziós sebességének meghatározása a májban vagy a zsírszövetben biokémiai elemzéssel (Western blot)
• Végül elvégezhető egy szérumadagolás annak meghatározására, hogy a szérumfehérjék a NASH vagy a steatosis prediktív indexét képezhetik-e.

A nizzai CHU elhízott pácienseinek sorozatát fogjuk használni, akiknek az elhízás sebészeti megközelítését programozták. A műtét előtti feltárások közé tartoznak a klinikai-biológiai értékelések. A beavatkozás során a máj- és zsírszövet biopsziák szisztematikusan valósulnak meg kutatás céljából. Felhasználjuk a túlsúlyos és NASH-ban szenvedő betegek májbiopsziáit is.

A munka megvalósíthatósága nem jelent problémát. A sebészeti osztályon havonta 10 elhízás műtétet végeznek. Már van egy 280 betegből álló sorozatunk. 150 beteget kell bevonnunk ahhoz, hogy elegendő mennyiségű normális májú beteget tudjunk szerezni. A többi beteg esetében a már elvégzett szövetbankot használjuk, amelyhez a betegek már hozzájárultak. Végül létre kell hoznunk egy májszövet bankot a túlsúlyos betegek számára. Mindezeket az alapvető technikákat az INSERM U 568 csapata ellenőrzi. Várt eredmények: Ezzel a stratégiával kiválaszthatjuk a steatohepatitis (NASH) védő és súlyosbító faktorait, amelyek képesek lesznek a steatohepatitis elváltozásainak prediktív biológiai markereinek azonosítására, és ezáltal azonosítására. a májelváltozások kockázatának kitett betegek. Ezek a tényezők a jövőben terápiás célpontként is szolgálhatnak.