Suojaavien ja pahenevien steatohepatiittitekijöiden (NASH) tunnistaminen

Viimeaikaiset epidemiologiset tutkimukset Ranskassa osoittivat liikalihavuuden voimakkaan esiintyvyyden (12,4 %) ja sen voimakkaan kasvun viimeisen 20 vuoden aikana. Lihavuuteen liittyvistä monista komplikaatioista maksakomplikaatiot (steatoosi ja steatohepatiitti (NASH)) ovat yleisimpiä. Viimeaikainen työmme osoitti, että rasvakudos, maksakudoksen esimerkin mukaisesti, ilmensi myös CRP:tä, hepsidiiniä ja IL-6:ta geeni- ja proteiinitasolla. Huomasimme myös, että 5 %:lla potilaistamme oli lihavuudestaan ​​huolimatta normaali maksa ilman steatoosia.

Tämän työn päätavoitteena on tunnistaa geenien ilmentymisen profiili mikrosirulla maksassa, mikä voisi mahdollistaa normaalin maksan lihavien henkilöiden erottamisen niistä, joilla on steatohepatiitti tai steatoosi. Geenitutkimukset tehdään aluksi sairaalloisille lihaville henkilöille, joilla ei ole diabetesta (naiset, painoindeksi > 40 kg/m2). Valitsemme otokseen 10 potilasta, joilla on normaali maksa, 10 potilasta, joilla on NASH ja 10 potilasta, joilla on yksinkertainen steatoosi. Nämä geenitutkimukset suoritetaan samojen potilaiden maksassa ja sisäelinten rasvakudoksessa, mikä mahdollistaa maksan ja rasvakudoksen välisen yhteyden arvioinnin. Mukaan otetaan myös 10 ylipainoista potilasta ja NASH-tutkimus (vain maksabiopsia). Maksakontrollit (10) toimitetaan Pr Jean Gugenheimin kirurgian osastolta, ja ne ovat käytännössä kaikki saatavilla. Ne ovat "terveitä" kudoksia lähellä maksan hyvänlaatuisia kasvaimia. Myös kaupallista ARN:ää (Biosciences, Stratagene) käytetään. Kun nämä geeniekspressioprofiilit on tunnistettu rajoitetussa määrässä potilaita, validoimme nämä geeniekspressioprofiilit merkittävämmällä määrällä potilaita (30–45 potilaalla, joilla on NASH, verrattuna 30–45 potilaaseen, joilla on yksinkertainen steatoosi).

Toissijaiset tavoitteet ovat:

Vertaaksemme sairaalloisten liikalihavien koehenkilöiden maksan ja viskeraalisen ja ihonalaisen rasvakudoksen välisen geeniekspression profiilia Kun on tunnistettu ryhmä kiinnostavia geenejä, joiden ilmentyminen on modifioitunut pienellä määrällä potilaita, joilla on NASH, jatkamme tutkimustamme rajoitetulla määrällä geenejä.

• Validoida näiden geenien ilmentymisen modifikaatiot merkittävämmällä määrällä potilaita reaaliaikaisen PCR:n avulla
• Näiden tekijöiden ilmentymiskohdan määrittäminen maksassa tai rasvakudoksessa immunohistokemiallisella analyysillä
• Näiden tekijöiden ilmentymisnopeuden määrittäminen maksassa tai rasvakudoksessa biokemiallisella analyysillä (Western blot)
• Seerumin annostelu voitaisiin lopulta suorittaa sen määrittämiseksi, voisivatko seerumin proteiinit muodostaa NASH:n tai steatoosin ennustavan indeksin.

Käytämme Nizzan CHU:n liikalihavien potilaiden sarjaa, joille ohjelmoitiin liikalihavuuden kirurginen lähestymistapa. Preoperatiiviset tutkimukset sisältävät kliinis-biologisia arviointeja. Intervention aikana maksa- ja rasvakudosbiopsiat toteutetaan systemaattisesti tutkimusta varten. Käytämme myös ylipainoisille ja NASH-potilaille tehtyjä maksabiopsioita.

Työn toteutettavuus ei aiheuta ongelmia. Kirurgian osastolla tehdään 10 lihavuusleikkausta kuukaudessa. Meillä on jo 280 potilaan sarja. Meidän on otettava mukaan 150 potilasta, jotta voimme saada riittävästi potilaita, joilla on normaali maksa. Muiden potilaiden osalta käytämme kudospankkia, joka on jo tehty ja potilaat ovat jo antaneet suostumuksensa. Lopuksi meidän on perustettava maksakudospankki ylipainoisille potilaille. Kaikkia näitä perustekniikoita ohjataan INSERM U 568:n tiimissä. Odotetut tulokset: Tällä strategialla voisimme valita steatohepatiitin (NASH) suojaavia ja pahentavia tekijöitä, jotka voivat johtaa steatohepatiitin leesioiden ennustavien biologisten merkkiaineiden tunnistamiseen ja siten tunnistamiseen. potilaille, joilla on maksavaurioiden riski. Nämä tekijät voivat toimia myös tulevaisuuden terapeuttisina kohteina.