Identificatie van beschermende en verergerende factoren van steatohepatitis (NASH).

Recente epidemiologische studies in Frankrijk toonden een sterke prevalentie van obesitas (12,4%) en een sterke toename ervan gedurende de laatste 20 jaar. Van de vele complicaties die verband houden met obesitas, behoren de levercomplicaties (steatose en steatohepatitis (NASH)) tot de meest voorkomende. Ons recente werk toonde aan dat het vetweefsel, in navolging van het leverweefsel, ook CRP, de hepcidine en de IL-6 tot expressie bracht op gen- en eiwitniveau. We merkten ook dat 5% van onze patiënten ondanks hun zwaarlijvigheid een normale lever vertoonde zonder steatose.

Het belangrijkste doel van dit werk zal zijn om een ​​profiel van genexpressie te identificeren door middel van microarray in de lever, wat het mogelijk zou kunnen maken om zwaarlijvige personen met een normale lever te onderscheiden van personen met steatohepatitis of steatose. De genstudies zullen in eerste instantie worden uitgevoerd bij personen met morbide obesitas zonder diabetes (vrouwen, index van lichaamsgewicht > 40 kg/m2). We zullen een steekproef selecteren van 10 patiënten met een normale lever, 10 patiënten met een NASH en 10 patiënten met een eenvoudige steatose. Deze genstudies zullen worden uitgevoerd in de lever en het viscerale vetweefsel van dezelfde patiënten, wat het mogelijk zal maken om de onderlinge relatie tussen de lever en het vetweefsel te evalueren. We zullen ook 10 patiënten met overgewicht en een NASH includeren (studie alleen op leverbiopsie). De levercontroles (10) worden geleverd vanuit de afdeling chirurgie van Pr Jean Gugenheim en zijn praktisch allemaal beschikbaar. Het zijn "gezonde" weefsels in de buurt van goedaardige levertumoren. Commerciële ARN (Biosciences, Stratagene) zal ook worden gebruikt. Na identificatie van deze profielen van genexpressie bij een beperkt aantal patiënten, zullen we deze profielen van genexpressie valideren bij een groter aantal patiënten (30 tot 45 patiënten met een NASH in vergelijking met 30 tot 45 patiënten met een eenvoudige steatose).

De secundaire doelstellingen zijn:

Om het profiel van genexpressie tussen de lever en het viscerale en subcutane vetweefsel van de morbide zwaarlijvige personen te vergelijken. Na de identificatie van een groep interessante genen waarvan de expressie is gewijzigd bij een klein aantal patiënten met een NASH, vervolgen we onze studie met een beperkter aantal genen.

• Om bij een groter aantal patiënten de modificaties van de expressie van deze genen te valideren door middel van een real-time PCR-benadering
• Om de plaats van expressie van deze factoren in de lever of vetweefsel te bepalen door middel van immunohistochemische analyse
• Om de expressiesnelheid van deze factoren in de lever of vetweefsel te bepalen door middel van biochemische analyse (Western blot)
• Uiteindelijk zou een serumdosering kunnen worden uitgevoerd om te bepalen of de serumeiwitten een voorspellende index van de NASH of steatose zouden kunnen vormen.

We zullen de reeks zwaarlijvige patiënten van het CHU van Nice gebruiken bij wie een chirurgische benadering van zwaarlijvigheid was geprogrammeerd. Preoperatieve verkenningen omvatten klinisch-biologische beoordelingen. Tijdens de ingreep worden de lever- en vetweefselbiopten systematisch uitgevoerd voor onderzoek. We zullen ook de leverbiopten gebruiken die worden uitgevoerd bij patiënten met overgewicht en een NASH.

De haalbaarheid van het werk vormt geen enkel probleem. De afdeling chirurgie voert maandelijks 10 operaties over obesitas uit. We hebben al een reeks van 280 patiënten. We moeten 150 patiënten includeren om voldoende patiënten met een normale lever te kunnen krijgen. Voor de andere patiënten gebruiken we de weefselbank die al is uitgevoerd en de patiënten al toestemming hebben gegeven. Tot slot moeten we een leverweefselbank oprichten voor patiënten met overgewicht. Al deze fundamentele technieken worden gecontroleerd binnen het team van INSERM U 568. Verwachte resultaten: we zouden met deze strategie beschermende en verergerende factoren van steatohepatitis (NASH) kunnen selecteren die kunnen leiden tot het identificeren van voorspellende biologische markers van de laesies van steatohepatitis en zo identificeren patiënten die risico lopen op leverlaesies. Deze factoren kunnen ook dienen als toekomstige therapeutische doelen.