Выявление защитных и усугубляющих стеатогепатит (НАСГ) факторов

Недавние эпидемиологические исследования во Франции показали сильную распространенность ожирения (12,4%) и его сильное увеличение в течение последних 20 лет. Среди многочисленных осложнений, связанных с ожирением, наиболее частыми являются печеночные осложнения (стеатоз и стеатогепатит (НАСГ)). Наша недавняя работа показала, что жировая ткань, по примеру печеночной ткани, также экспрессирует CRP, гепсидин и IL-6 на уровне генов и белков. Мы также заметили, что у 5% наших пациентов, несмотря на их ожирение, была нормальная печень без стеатоза.

Основная цель этой работы будет состоять в том, чтобы определить профиль экспрессии генов с помощью микрочипов в печени, что может позволить дифференцировать пациентов с ожирением, имеющих нормальную печень, от пациентов со стеатогепатитом или стеатозом. Генетические исследования будут первоначально проводиться на субъектах с патологическим ожирением без диабета (женщины, индекс массы тела > 40 кг/м2). Мы выберем выборку из 10 пациентов с нормальной печенью, 10 пациентов с НАСГ и 10 пациентов с простым стеатозом. Эти генные исследования будут проводиться в печени и висцеральной жировой ткани этих же пациентов, что позволит оценить взаимосвязь между печенью и жировой тканью. Мы также включим 10 пациентов с избыточной массой тела и НАСГ (исследование только при биопсии печени). Контрольные образцы печени (10) будут предоставлены хирургическим отделением профессора Жана Гугенхайма и практически все доступны. Они представляют собой «здоровую» ткань рядом с доброкачественными опухолями печени. Также будет использоваться коммерческий ARN (Biosciences, Stratagene). После идентификации этих профилей экспрессии генов у ограниченного числа пациентов мы проверим эти профили экспрессии генов у более значительного числа пациентов (от 30 до 45 пациентов с НАСГ по сравнению с 30-45 пациентами с простым стеатозом).

Второстепенными целями будут:

Сравнить профиль экспрессии генов между печенью и жировой, висцеральной и подкожной тканью у пациентов с патологическим ожирением. После идентификации группы представляющих интерес генов, экспрессия которых изменена у небольшого числа пациентов с НАСГ, мы продолжаем наше исследование. с более ограниченным числом генов.

• Подтвердить у большего числа пациентов модификации экспрессии этих генов с помощью ПЦР в реальном времени.
• Определить место экспрессии этих факторов в печени или жировой ткани с помощью иммуногистохимического анализа.
• Определить скорость экспрессии этих факторов в печени или жировой ткани с помощью биохимического анализа (Вестерн-блоттинг)
• Наконец, можно было определить дозу сыворотки, чтобы определить, могут ли белки сыворотки представлять собой прогностический индекс НАСГ или стеатоза.

Мы будем использовать серию пациентов с ожирением из CHU Ниццы, у которых был запрограммирован хирургический подход к ожирению. Предоперационные исследования включают клинико-биологическую оценку. Во время вмешательства для исследований будут систематически проводиться биопсии печени и жировой ткани. Мы также будем использовать биопсии печени, проведенные у пациентов с избыточной массой тела и НАСГ.

Осуществимость работы не вызывает никаких вопросов. В отделении хирургии проводится 10 операций по поводу ожирения в месяц. У нас уже есть серия из 280 пациентов. Мы должны включить 150 пациентов, чтобы получить достаточно пациентов с нормальной печенью. Для других пациентов мы будем использовать банк тканей, который уже создан, и пациенты уже дали согласие. Наконец, мы должны создать банк тканей печени для пациентов с избыточным весом. Все эти фундаментальные методы контролируются командой из INSERM U 568. Ожидаемые результаты: с помощью этой стратегии мы могли бы выбрать защитные и усугубляющие факторы стеатогепатита (НАСГ), которые позволят определить прогностические биологические маркеры поражений стеатогепатита и, таким образом, выявить пациенты с риском поражения печени. Эти факторы также могут служить будущими терапевтическими мишенями.