Identificazione dei fattori protettivi e peggiorativi della steatoepatite (NASH).

Recenti studi epidemiologici in Francia hanno mostrato una forte prevalenza dell'obesità (12,4%) e il suo forte aumento negli ultimi 20 anni. Tra le molteplici complicanze legate all'obesità, le complicanze epatiche (steatosi e steatoepatite (NASH)) sono tra le più frequenti. Il nostro recente lavoro ha dimostrato che il tessuto adiposo, seguendo l'esempio del tessuto epatico, esprime anche CRP, epcidina e IL-6 a livello genico e proteico. Abbiamo anche notato che il 5% dei nostri pazienti, nonostante l'obesità, presentava un fegato normale senza steatosi.

Lo scopo principale di questo lavoro sarà quello di identificare un profilo di espressione genica mediante microarray nel fegato che possa permettere di differenziare i soggetti obesi con fegato normale da quelli con steatoepatite o steatosi. Gli studi genetici saranno condotti inizialmente in soggetti obesi patologici non diabetici (donne, indice di massa corporea > 40 kg/m2). Selezioneremo un campione di 10 pazienti con fegato normale, 10 pazienti con NASH e 10 pazienti con steatosi semplice. Questi studi genici saranno effettuati nel fegato e nel tessuto adiposo viscerale di questi stessi pazienti che permetteranno di valutare l'interrelazione tra il fegato e il tessuto adiposo. Includeremo anche 10 pazienti con sovrappeso e NASH (studio solo su biopsia epatica). I controlli dei fegati (10) saranno forniti dal reparto di chirurgia del Pr Jean Gugenheim e sono praticamente tutti disponibili. Sono tessuto "sano" vicino a tumori benigni epatici. Verrà utilizzato anche l'ARN commerciale (Biosciences, Stratagene). Dopo l'identificazione di questi profili di espressione genica in un numero ristretto di pazienti, convalideremo questi profili di espressione genica in un numero più significativo di pazienti (da 30 a 45 pazienti con NASH rispetto a 30-45 pazienti con steatosi semplice).

Gli obiettivi secondari saranno:

Per confrontare il profilo di espressione genica tra il fegato e il tessuto adiposo viscerale e sottocutaneo dei soggetti obesi patologici Dopo l'identificazione di un gruppo di geni di interesse la cui espressione è modificata in un piccolo numero di pazienti con NASH, continuiamo il nostro studio con un numero più ristretto di geni.

• Validare in un numero più significativo di pazienti le modificazioni di espressione di questi geni mediante un approccio mediante real-time PCR
• Determinare il sito di espressione di questi fattori nel fegato o nel tessuto adiposo mediante analisi immunoistochimica
• Determinare il tasso di espressione di questi fattori nel fegato o nel tessuto adiposo mediante analisi biochimiche (Western blot)
• Si potrebbe infine effettuare un dosaggio sierico per determinare se le proteine ​​sieriche possano costituire un indice predittivo della NASH o della steatosi.

Utilizzeremo la serie di pazienti obesi del CHU di Nizza per i quali è stato programmato un approccio chirurgico all'obesità. Le esplorazioni preoperatorie includono valutazioni clinico-biologiche. Durante l'intervento verranno sistematicamente realizzate biopsie del fegato e del tessuto adiposo per la ricerca. Utilizzeremo anche le biopsie epatiche effettuate su pazienti con sovrappeso e NASH.

La fattibilità dell'opera non pone alcun problema. Il reparto di chirurgia esegue 10 interventi chirurgici di obesità al mese. Abbiamo già una serie di 280 pazienti. Dobbiamo includere 150 pazienti per poter ottenere un numero sufficiente di pazienti con fegato normale. Per gli altri pazienti utilizzeremo la banca dei tessuti che è già stata realizzata ei pazienti hanno già dato il consenso. Infine dobbiamo costituire una banca del tessuto epatico per i pazienti in sovrappeso. Tutte queste tecniche fondamentali sono controllate all'interno del team di INSERM U 568 Risultati attesi: Con questa strategia potremmo selezionare fattori protettivi e peggiorativi della steatoepatite (NASH) che saranno in grado di portare a identificare marcatori biologici predittivi delle lesioni della steatoepatite e quindi identificare pazienti a rischio di lesioni epatiche. Questi fattori potrebbero anche servire come futuri bersagli terapeutici.