Imunologická odpověď po vakcíně proti pandemické chřipce A (H1N1) u onkologických hematologických pacientů

Primární cíl

1) Posoudit, zda se u onkologických a hematologických pacientů rozvine ochranná imunologická odpověď po pandemické vakcíně proti chřipce A (H1N1) Sekundární cíle

1. Porovnat úrovně protilátkové odpovědi proti viru chřipky A (H1N1) mezi onkologickými a hematologickými pacienty ve vztahu ke skupině zdravých dobrovolníků
2. Zhodnotit výskyt infekce A (H1N1) u očkovaných onkologických a hematologických pacientů ve srovnání s kohortou očkovaných zdravých dobrovolníků. Posoudit klinické příznaky přisuzované chřipkové infekci u očkovaných onkologických a hematologických pacientů a zdravých dobrovolníků.
3. Porovnat úrovně protilátkové odpovědi proti viru chřipky A (H1N1) mezi následujícími podskupinami: pacienti s probíhající chemoterapií; pacienti, kteří dokončili chemoterapeutickou léčbu; pacienti léčení autologní nebo alogenní transplantací hematopoetických kmenových buněk z periferní krve (PBSCT) Populace a design studie

Populaci studie tvoří po sobě jdoucí pacienti s onkologickým nebo hematologickým onemocněním, u kterých je plánována vakcína proti chřipce A (H1N1)

Postupy studie Pacienti provedou odběr vzorku krve (lahvička se sérem) v den 0 (rozsah: 0-2 dny před vakcinací) před vakcinací, odběr vzorku krve (lahvička séra) v den +21 (rozsah: +/- 5 dny) po vakcinaci odběr vzorku krve (lahvička séra) v den +50 (rozsah: +/- 5 dnů) a v den +90 v rozmezí: +/- 5 dnů) po vakcinaci. Vzorky budou zmrazeny v 500 mcl alikvotech při -20 °C. Na konci odběru provedeme imunologický test k vyhodnocení titru protilátek a buněčné odpovědi. Vzorky séra budou uloženy v laboratoři virologie Univerzity v Miláně. Titr protilátek proti vakcinačnímu kmeni bude měřen ve všech vzorcích pomocí testů inhibice hemaglutinace (HI) s použitím krůtích erytrocytů a podle pokynů EMEA. Kritériem odezvy bude dosažení ochranného titulu HI testu > 1:40. Dále budeme hodnotit: geometrický průměr titrů a čtyřnásobný nárůst titru ve srovnání s titry před vakcinací. Buněčně zprostředkovaná odpověď bude analyzována inkubací buněk CD3+ pacientů s antigeny chřipky A a vyhodnocením: 1) buněčné expanze analýzou ředění karboxyfluorescein sukcinimidyl esteru (CFSE) průtokovou cytometrií; 2) Produkce IFN-gama pomocí ELISPOT.

Kontrolní kohorta zdravých dobrovolníků, kteří dostali vakcínu A(H1N1), provede stejný odběr vzorku krve, aby porovnala imunologickou odpověď mezi onkologickými a hematologickými pacienty ve srovnání se zdravou kohortou.

Hodnocení klinické odpovědi:

Onkologickí a hematologičtí pacienti budou sledováni jako ambulantní nebo hospitalizovaní pacienti podle rutinních kontrol jejich onemocnění. V případě, že se rozvinou příznaky horních cest dýchacích nebo příznaky podobné chřipce, budou příznaky zaznamenány do klinické databáze, provedeny výměny nosu a hltanu podle lékaře, který o pacienta pečuje. Aby bylo možné vyhodnotit klinickou účinnost očkování, budou záměny testovány na infekci virem chřipky A (H1N1).

Po 3 měsících od očkování nebudou provedeny žádné další studie.

Velikost vzorku Studie bude zahrnovat 25 pacientů pro každou subpopulaci, která má být analyzována. Tato velikost vzorku má 90% schopnost vyhodnotit zvýšení pravděpodobnosti biologické odpovědi z teoretické hodnoty 20 % (nízká účinnost vakcíny) na hodnotu 50 % (cílová účinnost) při 5% významnosti. (studentský t test, jeden ocas). Subpopulace jsou následující: pacienti s probíhající chemoterapií; pacienti, kteří dokončili chemoterapeutickou léčbu; pacientů léčených autologní nebo alogenní transplantací krvetvorných kmenových buněk.

Vytvoříme „kalibrační“ skupinu zahrnující alespoň 100 zdravých dobrovolníků. Tato skupina se bude skládat z lidí pracujících v National Cancer Institute v Miláně, kteří podepsali informovaný souhlas s účastí ve studii. Tato velikost vzorku umožňuje přesnost vyhodnocení pravděpodobnosti získání biologické odpovědi (polovina intervalu spolehlivosti), která není nižší než 10 %

Délka studia Předpokládaná doba trvání zápisu je 6 měsíců. Zařazení hematologických a onkologických pacientů a kohorty zdravých dobrovolníků bude provedeno za 3 měsíce a studie bude uzavřena v den +90 odběrem vzorku krve.

Kritéria výběru Kritéria pro zařazení

• Věk ≥18 let
• Onkologický a hematologický pacient s plánem očkování A (H1N1).
• Kontrolní skupina: tichá anamnéza onkologických a hematologických onemocnění; plánuje dostat vakcínu A (H1N1).
• Písemný informovaný souhlas

Kritéria vyloučení

• Infuze lidského imunoglobulinu probíhá nebo před 30 dny
• Terapie monoklonálními nebo polyklonálními protilátkami probíhá nebo před 30 dny
• Terapie IL-1 nebo IL-2 nebo IFN-gama probíhá nebo před 30 dny
• Autologní PBSCT méně než 1 měsíc nebo alogenní PBSCT méně než 6 měsíců
• Těhotenství nebo kojení
• Hypersenzitivita I. typu
• Probíhající antikoagulační léčba nebo krevní destičky < 50000/ul

Základní postupy studie: Anamnéza onkologického a hematologického onemocnění; gynekologická anamnéza u žen mladších 50 let

• Vzorek séra v den očkování nebo 2 dny předem