Réponse immunologique après le vaccin contre la grippe pandémique A (H1N1) chez les patients onco-hématologiques

Objectif principal

1) Évaluer si les patients oncologiques et hématologiques développent une réponse immunitaire protectrice après le vaccin contre la grippe pandémique A (H1N1) Objectifs secondaires

1. Comparer les niveaux de réponse en anticorps contre le virus de la grippe A (H1N1) entre les patients oncologiques et hématologiques par rapport à une cohorte de volontaires sains
2. Évaluer l'incidence de l'infection A (H1N1) chez les patients oncologiques et hématologiques vaccinés par rapport à une cohorte de volontaires sains vaccinés. Évaluer les symptômes cliniques attribuables à l'infection grippale chez les patients oncologiques et hématologiques vaccinés et les volontaires sains.
3. Comparer les niveaux de réponse anticorps contre le virus de la grippe A (H1N1) entre les sous-groupes suivants : patients sous chimiothérapie en cours ; les patients qui ont terminé le traitement de chimiothérapie ; patients traités par greffe autologue ou allogénique de cellules souches hématopoïétiques du sang périphérique (PBSCT) Population et conception de l'étude

La population à l'étude est constituée de patients consécutifs atteints de maladies oncologiques ou hématologiques qui doivent recevoir le vaccin contre la grippe A (H1N1)

Procédures de l'étude Les patients effectueront un prélèvement sanguin (flacon de sérum) au jour 0 (intervalle : 0-2 jours avant la vaccination) avant la vaccination, un prélèvement sanguin (flacon de sérum) au jour +21 (intervalle : +/- 5 jours) après la vaccination, un prélèvement sanguin (flacon de sérum) à jour +50 (intervalle : +/- 5 jours) et à jour +90 intervalle : +/- 5 jours) après vaccination. Les échantillons seront congelés en aliquotes de 500 mcl à -20°C. À la fin de la collecte, nous effectuerons un test immunologique pour évaluer le titre d'anticorps et la réponse cellulaire. Les échantillons de sérum seront conservés au laboratoire de virologie de l'Université de Milan. Le titre d'anticorps contre la souche vaccinale sera mesuré dans tous les échantillons au moyen de tests d'inhibition de l'hémagglutination (IH) avec l'utilisation d'érythrocytes de dinde et conformément aux directives de l'EMEA. Les critères de réponse seront l'obtention d'un titre protecteur de test HI > 1h40. De plus, nous évaluerons : les titres moyens géométriques et une multiplication par quatre des titres par rapport aux titres avant la vaccination. La réponse à médiation cellulaire sera analysée en incubant des cellules de patients CD3+ avec des antigènes de la grippe A et en évaluant : 1) l'expansion cellulaire par analyse par cytométrie en flux de la dilution de l'ester succinimidylique de carboxyfluorescéine (CFSE) ; 2) Production d'IFN-gamma par ELISPOT.

Une cohorte témoin de volontaires sains ayant reçu le vaccin A(H1N1) effectuera le même prélèvement sanguin afin de comparer la réponse immunologique entre les patients oncologiques et hématologiques par rapport à la cohorte saine.

Évaluation de la réponse clinique :

Les patients oncologiques et hématologiques seront suivis en ambulatoire ou en hospitalisation selon les contrôles de routine de leur maladie. En cas de développement de symptômes des voies respiratoires supérieures ou de symptômes pseudo-grippaux, les symptômes seront enregistrés dans la base de données clinique, des permutations nasales et pharyngées seront effectuées selon le médecin qui prend en charge le patient. Afin d'évaluer l'efficacité clinique de la vaccination, les swaps seront testés pour l'infection par le virus de la grippe A (H1N1).

Aucune autre étude ne sera effectuée après 3 mois à compter de la vaccination.

Taille de l'échantillon L'essai portera sur 25 patients pour chaque sous-population à analyser. Cette taille d'échantillon a une puissance de 90% pour évaluer une augmentation de la probabilité d'avoir une réponse biologique d'une valeur théorique de 20% (faible efficacité du vaccin) à une valeur de 50% (cible d'efficacité) à la signification de 5% (test t de Student, une queue). Les sous-populations sont les suivantes : patients sous chimiothérapie en cours ; les patients qui ont terminé le traitement de chimiothérapie ; patients traités par greffe autologue ou allogénique de cellules souches hématopoïétiques.

Nous constituerons un groupe « calibrage » comprenant au moins 100 volontaires sains. Ce groupe comprendra des personnes travaillant à l'Institut national du cancer de Milan qui ont signé un consentement éclairé pour participer à l'étude. Cette taille d'échantillon permet une précision sur l'évaluation de la probabilité d'obtenir une réponse biologique (moitié de l'intervalle de confiance) non inférieure à 10%

Durée de l'étude La durée estimée de l'inscription est de 6 mois. Le recrutement des patients hématologiques et oncologiques et de la cohorte de volontaires sains sera réalisé en 3 mois et l'étude sera clôturée au jour +90 avec un prélèvement sanguin.

Critères de sélection Critères d'inclusion

• Âge ≥18 ans
• Patient oncologique et hématologique avec le projet de recevoir le vaccin A (H1N1)
• Groupe témoin : une histoire silencieuse pour les maladies oncologiques et hématologiques ; prévu de recevoir le vaccin A(H1N1)
• Consentement éclairé écrit

Critère d'exclusion

• Perfusion d'immunoglobuline humaine en cours ou dans les 30 jours précédents
• Traitement avec des anticorps monoclonaux ou polyclonaux en cours ou dans les 30 jours précédents
• Traitement par IL-1 ou IL-2 ou IFN-gamma en cours ou dans les 30 jours précédents
• PBSCT autologue moins de 1 mois ou PBSCT allogénique moins de 6 mois
• Grossesse ou allaitement
• Hypersensibilité de type I
• Traitement anticoagulant en cours ou plaquettes < 50 000/ul

Procédures d'étude au départ : Antécédents médicaux pour les maladies oncologiques et hématologiques ; antécédents gynécologiques pour les femmes de moins de 50 ans

• Échantillon de sérum le jour de la vaccination ou 2 jours à l'avance