Resposta imunológica após vacina pandêmica contra influenza A (H1N1) em pacientes onco-hematológicos

Objetivo primário

1) Avaliar se os pacientes oncológicos e hematológicos desenvolvem uma resposta imunológica protetora após a vacina pandêmica contra Influenza A (H1N1) Objetivos secundários

1. Comparar os níveis de resposta de anticorpos contra o vírus influenza A (H1N1) entre pacientes oncológicos e hematológicos em relação a uma coorte de voluntários saudáveis
2. Avaliar a incidência de infecção por A (H1N1) em pacientes oncológicos e hematológicos vacinados em comparação com uma coorte de voluntários saudáveis ​​vacinados. Avaliar os sintomas clínicos atribuíveis à infecção por influenza em pacientes oncológicos e hematológicos vacinados e voluntários saudáveis.
3. Comparar os níveis de resposta de anticorpos contra o vírus influenza A (H1N1) entre os seguintes subgrupos: pacientes com quimioterapia em andamento; pacientes que concluíram o tratamento quimioterápico; pacientes tratados com transplante autólogo ou alogênico de células-tronco hematopoiéticas de sangue periférico (PBSCT) População e desenho do estudo

A população do estudo consiste em pacientes consecutivos com doenças oncológicas ou hematológicas que planejam receber a vacina contra influenza A (H1N1)

Procedimentos do estudo Os pacientes realizarão uma coleta de amostra de sangue (frasco de soro) no dia 0 (intervalo: 0- 2 dias antes da vacinação) antes da vacinação, uma coleta de amostra de sangue (frasco de soro) no dia +21 (intervalo: +/- 5 dias) após a vacinação, uma colheita de amostra de sangue (frasco de soro) no dia +50 (intervalo: +/- 5 dias) e no dia +90 intervalo: +/- 5 dias) após a vacinação. As amostras serão congeladas em alíquotas de 500 mcl a -20°C. Ao final da coleta realizaremos teste imunológico para avaliar o título de anticorpos e a resposta celular. As amostras de soro serão armazenadas no laboratório de Virologia da Universidade de Milão. O título de anticorpos contra a cepa vacinal será medido em todas as amostras por meio de ensaios de inibição da hemaglutinação (HI) com o uso de eritrócitos de peru e de acordo com as diretrizes da EMEA. O critério de resposta será a obtenção de um título protetor de teste de HI > 1:40. Além disso, avaliaremos: títulos médios geométricos e um aumento de quatro vezes em relação aos títulos pré-vacinais. A resposta mediada por células será analisada por incubação de células de pacientes CD3+ com antígenos influenza A e avaliação de: 1) expansão celular por análise de citometria de fluxo de diluição de carboxifluoresceína succinimidiléster (CFSE); 2) Produção de IFN-gama por ELISPOT.

Uma coorte controle de voluntários saudáveis ​​que receberam a vacina A(H1N1) realizará a mesma coleta de amostra de sangue para comparar a resposta imunológica entre pacientes oncológicos e hematológicos em relação à coorte saudável.

Avaliação da resposta clínica:

Os pacientes oncológicos e hematológicos serão acompanhados como pacientes ambulatoriais ou internados de acordo com os controles de rotina para sua doença. Caso surjam sintomas das vias aéreas superiores ou sintomas semelhantes aos da gripe, os sintomas serão registrados no banco de dados clínico, as trocas nasais e faríngeas serão realizadas de acordo com o médico que está cuidando do paciente. Para avaliar a eficácia clínica da vacinação, as trocas serão testadas para infecção pelo vírus influenza A (H1N1).

Nenhum estudo adicional será realizado após 3 meses da vacinação.

Tamanho da amostra O estudo incluirá 25 pacientes para cada subpopulação a ser analisada. Este tamanho de amostra tem um poder de 90% para avaliar um aumento da probabilidade de ter uma resposta biológica de um valor teórico de 20% (baixa eficácia da vacina) para um valor de 50% (alvo de eficácia) ao nível de significância de 5%. (teste t de Student, uma cauda). As subpopulações são as seguintes: pacientes com quimioterapia em andamento; pacientes que concluíram o tratamento quimioterápico; pacientes tratados com transplante autólogo ou alogênico de células-tronco hematopoiéticas.

Agregaremos um grupo de "calibração" composto por pelo menos 100 voluntários saudáveis. Este grupo será composto por pessoas que trabalham no Instituto Nacional do Câncer em Milão, que assinaram um consentimento informado para participar do estudo. Este tamanho da amostra permite uma precisão na avaliação da probabilidade de obtenção de uma resposta biológica (metade do intervalo de confiança) não inferior a 10%.

Duração do estudo A duração estimada da inscrição é de 6 meses. A inclusão dos pacientes hematológicos e oncológicos e da coorte de voluntários saudáveis ​​será realizada em 3 meses e o estudo será encerrado no dia +90 com coleta de amostra de sangue.

Critérios de seleção Critérios de inclusão

• Idade ≥18 anos
• Paciente oncológico e hematológico com plano de receber a vacina A (H1N1)
• Grupo Controle: história silenciosa para doenças oncológicas e hematológicas; planejou receber a vacina A (H1N1)
• Consentimento informado por escrito

Critério de exclusão

• Infusão de Imunoglobulina Humana em andamento ou nos últimos 30 dias
• Terapia com anticorpos monoclonais ou policlonais em andamento ou nos últimos 30 dias
• Terapia com IL-1 ou IL-2 ou IFN-gama em andamento ou nos últimos 30 dias
• PBSCT autólogo com menos de 1 mês ou PBSCT alogênico com menos de 6 meses
• Gravidez ou lactação
• Hipersensibilidade tipo I
• Terapia anticoagulante em curso ou plaquetas < 50.000/ul

Procedimentos do estudo na linha de base: Histórico médico para doenças oncológicas e hematológicas; história ginecológica para mulheres com menos de 50 anos de idade

• Amostra de soro no dia da vacinação ou 2 dias antes