Risposta immunologica dopo il vaccino contro l'influenza pandemica A (H1N1) in pazienti onco-ematologici

Obiettivo primario

1) Valutare se i pazienti oncologici ed ematologici sviluppano una risposta immunitaria protettiva dopo il vaccino contro l'influenza pandemica A (H1N1) Obiettivi secondari

1. Per confrontare i livelli di risposta anticorpale contro il virus dell'influenza A (H1N1) tra pazienti oncologici ed ematologici rispetto a una coorte di volontari sani
2. Valutare l'incidenza dell'infezione da A (H1N1) nei pazienti oncologici ed ematologici vaccinati rispetto a una coorte di volontari sani vaccinati. Valutare i sintomi clinici attribuibili all'infezione influenzale in pazienti oncologici ed ematologici vaccinati e volontari sani.
3. Per confrontare i livelli di risposta anticorpale contro il virus dell'influenza A (H1N1) tra i seguenti sottogruppi: pazienti con chemioterapia in corso; pazienti che hanno completato il trattamento chemioterapico; pazienti trattati con trapianto autologo o allogenico di cellule staminali emopoietiche da sangue periferico (PBSCT) Popolazione e disegno dello studio

La popolazione in studio è composta da pazienti consecutivi con malattie oncologiche o ematologiche che dovrebbero ricevere il vaccino influenzale A (H1N1)

Procedure dello studio I pazienti eseguiranno un prelievo di sangue (fiala di siero) il giorno 0 (intervallo: 0-2 giorni prima della vaccinazione) prima della vaccinazione, un prelievo di sangue (fiala di siero) il giorno +21 (intervallo: +/- 5 giorni) dopo la vaccinazione, un prelievo di sangue (flacone di siero) il giorno +50 (range: +/- 5 giorni) e il giorno +90 range: +/- 5 giorni) dopo la vaccinazione. I campioni saranno congelati in aliquote da 500 mcl a -20°C. Al termine della raccolta eseguiremo test immunologici per valutare il titolo anticorpale e la risposta cellulare. I campioni di siero saranno conservati presso il laboratorio di Virologia dell'Università degli Studi di Milano. Il titolo di anticorpi contro il ceppo vaccinale sarà misurato in tutti i campioni mediante test di inibizione dell'emoagglutinazione (HI) con l'uso di eritrociti di tacchino e secondo le linee guida EMEA. I criteri di risposta saranno il raggiungimento di un titolo protettivo di HI test > 1:40. Inoltre valuteremo: titoli medi geometrici e un aumento del titolo quadruplicato rispetto ai titoli prevaccinali. La risposta cellulare-mediata sarà analizzata incubando le cellule dei pazienti CD3+ con antigeni dell'influenza A e valutando: 1) l'espansione cellulare mediante analisi in citometria a flusso della diluizione di carbossifluoresceina succinimidil estere (CFSE); 2) Produzione di IFN-gamma da parte di ELISPOT.

Una coorte di controllo di volontari sani che hanno ricevuto il vaccino A(H1N1) eseguirà la stessa raccolta di campioni di sangue per confrontare la risposta immunologica tra pazienti oncologici ed ematologici rispetto alla coorte sana.

Valutazione della risposta clinica:

I pazienti oncologici ed ematologici saranno seguiti ambulatorialmente o in regime di ricovero secondo controlli di routine per la loro malattia. Nel caso in cui si sviluppino sintomi delle prime vie aeree o sintomi simil-influenzali, i sintomi verranno registrati nel database clinico, verranno eseguiti scambi nasali e faringei in accordo con il medico che si prende cura del paziente. Al fine di valutare l'efficacia clinica della vaccinazione, gli swap saranno testati per l'infezione da virus influenzale A (H1N1).

Non verranno eseguiti ulteriori studi dopo 3 mesi dalla vaccinazione.

Dimensione del campione Lo studio accumulerà 25 pazienti per ogni sottopopolazione da analizzare. Questa dimensione del campione ha un potere del 90% per valutare un aumento della probabilità di avere una risposta biologica da un valore teorico del 20% (bassa efficacia del vaccino) ad un valore del 50% (target di efficacia) al 5% di significatività (test t dello studente, una coda). Le sottopopolazioni sono le seguenti: pazienti con chemioterapia in corso; pazienti che hanno completato il trattamento chemioterapico; pazienti trattati con trapianto autologo o allogenico di cellule staminali emopoietiche.

Accumuleremo un gruppo di "calibrazione" comprendente almeno 100 volontari sani. Questo gruppo comprenderà persone che lavorano presso l'Istituto Nazionale Tumori di Milano che hanno firmato un consenso informato per partecipare allo studio. Questa dimensione del campione consente una precisione sulla valutazione della probabilità di ottenere una risposta biologica (metà dell'intervallo di confidenza) non inferiore al 10%

Durata dello studio La durata stimata dell'iscrizione è di 6 mesi. L'arruolamento dei pazienti ematologici e oncologici e della coorte di volontari sani sarà effettuato in 3 mesi e lo studio sarà chiuso il giorno +90 con un prelievo di sangue.

Criteri di selezione Criteri di inclusione

• Età ≥18 anni
• Paziente oncologico ed ematologico con il piano di ricevere il vaccino A (H1N1).
• Gruppo di controllo: anamnesi silente per malattie oncologiche ed ematologiche; pianificato di ricevere il vaccino A (H1N1).
• Consenso informato scritto

Criteri di esclusione

• Infusione di immunoglobulina umana in corso o nei 30 giorni precedenti
• Terapia con anticorpi monoclonali o policlonali in corso o nei 30 giorni precedenti
• Terapia con IL-1 o IL-2 o IFN-gamma in corso o nei 30 giorni precedenti
• PBSCT autologo inferiore a 1 mese o PBSCT allogenico inferiore a 6 mesi
• Gravidanza o allattamento
• Ipersensibilità di tipo I
• Terapia anticoagulante in corso o piastrine < 50000/ul

Procedure di studio al basale: anamnesi per malattia oncologica ed ematologica; storia ginecologica per le donne sotto i 50 anni di età

• Campione di siero il giorno della vaccinazione o 2 giorni prima