Zobrazování pomocí vláknité konfokální fluorescenční mikroskopie u pacientů s difuzními parenchymálními plicními chorobami

Difuzní parenchymální plicní onemocnění (DPLD) představují velkou a heterogenní skupinu poruch zahrnující soubor plicních onemocnění, která postihují intersticium, včetně alveolárního epitelu, endotelu plicních kapilár, bazální membrány, perivaskulárních a perilymfatických tkání. S tímto spektrem onemocnění se setkáváme nejen v plicní medicíně jako soubor idiopatických stavů, ale také v transplantační medicíně (solidní orgánová a hematologická), infekční (atypické pneumonie) a revmatologii (onemocnění pojiva/vaskulitida). Ačkoli nové techniky, jako je počítačová tomografie s vysokým rozlišením (HRCT) a poznatky o patogenezi vedly k lepšímu pochopení DPLD, klinická diagnostika, léčba a prognóza zůstávají výzvou.

Současným diagnostickým standardem DPLD je korelace mezi klinickým průběhem, radiologickými znaky na HRCT a patologickými nálezy. I u idiopatické plicní fibrózy (IPF), kde je typický obvyklý intersticiální obrazec na HRCT patognomický bez nutnosti patologie, je tento diagnostický pouze u 80 % pacientů a atypický obrazec na HRCT diagnózu IPF nevylučuje. Konečná diagnóza jako taková často závisí na histopatologickém potvrzení, které tradičně vyžaduje chirurgickou plicní biopsii v celkové anestezii prostřednictvím torakoskopie nebo torakotomie. To s sebou nese významnou morbiditu a mortalitu u této skupiny pacientů, kteří již mají respirační potíže. Minimálně invazivní endoskopické postupy, jako je bronchoalveolární laváž (BAL) a transbronchiální plicní biopsie (TBLB) prostřednictvím flexibilní bronchoskopie, se ve většině případů stále častěji používají jako náhrada chirurgické biopsie. Ani toto bohužel není zcela benigní zákrok – BAL může zhoršit hypoxémii a TBLB může vést k významnému krvácení nebo pneumotoraxu u přibližně 5 % pacientů. Kromě toho je diagnostický výtěžek TBLB značně omezený kvůli malé velikosti tkáně a slepé povaze výběru cílových bronchopulmonálních segmentů k biopsii. Mezi další omezení patří významné rozdíly mezi pozorovateli v interpretaci histologie a problém „chyby vzorku“: možnost, že bioptický vzorek byl odebrán z oblasti, která není reprezentativní pro převládající chorobný proces. Tato omezení se odrážejí v hlášených nízkých diagnostických výtěžnostech – u imunokompromitovaných pacientů byla diagnostická výtěžnost BAL nebo TBLB 38 % s 13% mírou komplikací a diagnostická výtěžnost < 50 % s TBLB byla hlášena u hypersenzitivní pneumonitidy a přibližně 30 % u obvyklé intersticiální pneumonie.

Definitivní diagnóza je nezbytná při léčbě difuzních parenchymálních plicních onemocnění. Infekční etiologie vyžaduje antimikrobiální terapii, zatímco imunitně zprostředkované příčiny jsou řešeny imunosupresí. Patologie vyvolaná léky bude vyžadovat revizi současné medikace, zatímco fibrotické stavy lze zvládnout s očekáváním. Prognóza je také výrazně ovlivněna etiologií a diagnózou. Mezerou v současné lékařské praxi je dostupnost minimálně invazivních postupů s malým počtem komplikací a vysokou diagnostickou přesností.

Vláknová konfokální fluorescenční mikroskopie (FCFM) (CellvizioR Lung, MaunaKea Technologies, Francie) je nová, bezpečná a minimálně invazivní technika, kterou lze použít k získání mikrostrukturálních snímků s vysokým rozlišením v reálném čase lobulárních a alveolárních plicních struktur u živých lidí. FCFM poskytuje jasný, zaostřený obraz tenkého řezu v biologickém vzorku, kde je objektiv mikroskopu nahrazen flexibilní minisondou z optických vláken. Tato technika umožňuje získat vysoce kvalitní snímky z endogenních nebo exogenních tkáňových fluoroforů pomocí vláknové sondy o průměru 1,4 mm, kterou lze zavést do pracovního kanálu standardního flexibilního bronchoskopu. To by mohlo potenciálně poskytnout diagnostické informace o fibróze a zánětu distálních vzduchových prostorů spojených s difuzními parenchymálními plicními chorobami bez potřeby plicních biopsií.

Aktuální data a zobrazení pro plicní FCFM jsou k dispozici v normálních alveolech kuřáků i nekuřáků. Patologické zobrazení FCFM plic pro DPLD dosud nebylo publikováno. U pacientů, u kterých je plánována bronchoskopie jako součást pravidelné klinické péče/diagnostického vyšetření, vyšetřovatelé pacientovi nabídnou souběžné zobrazování konfokální fluorescenční mikroskopií s vlákny, které má být provedeno během bronchoskopického výkonu. Výzkumníci se snaží identifikovat a katalogizovat odlišné a rozlišující rysy pozorované na snímcích získaných z FCFM u této skupiny pacientů a korelovat tyto nálezy se specifickými rysy HRCT a patologickými nálezy, pokud jsou k dispozici. Výzkumníci doufají, že budou schopni prokázat reprodukovatelnost interpretace FCFM obrazu s minimální variabilitou mezi pozorovateli a mezi pozorovateli a vysokými hodnotami Kappa. Nakonec vyšetřovatelé doufají, že definují diagnostická kritéria a vzory pro interpretaci FCFM obrazu tak, aby korelovaly se specifickými entitami DPLD, čímž vytvoří atlas FCFM pro DPLD. To by zlepšilo naši současnou diagnostiku a léčbu DPLD s minimálními dodatečnými riziky pro pacienty.