Imaging al microscopio confocale a fluorescenza in fibra in pazienti con malattie polmonari parenchimali diffuse

Le malattie polmonari parenchimali diffuse (DPLD) rappresentano un gruppo ampio ed eterogeneo di disturbi che comprende una raccolta di malattie polmonari che colpiscono l'interstizio tra cui l'epitelio alveolare, l'endotelio capillare polmonare, la membrana basale, i tessuti perivascolari e perilinfatici. Questo spettro di malattie si incontra non solo nella medicina polmonare come insieme di condizioni idiopatiche, ma anche nella medicina dei trapianti (di organi solidi ed ematologici), nelle malattie infettive (polmoniti atipiche) e nella reumatologia (malattia del tessuto connettivo/vasculite). Anche se nuove tecniche come la tomografia computerizzata ad alta risoluzione (HRCT) e approfondimenti sulla patogenesi hanno portato a una migliore comprensione della DPLD, la diagnosi clinica, la gestione e la prognosi rimangono una sfida.

L'attuale standard diagnostico di DPLD è una correlazione tra decorso clinico, caratteristiche radiologiche su HRCT e reperti patologici. Anche nella fibrosi polmonare idiopatica (IPF) in cui un tipico schema interstiziale usuale su HRCT è patognomonico senza il requisito della patologia, questo è diagnostico solo nell'80% dei pazienti e un pattern atipico su HRCT non preclude una diagnosi di IPF. Pertanto, la diagnosi finale dipende spesso dalla conferma istopatologica che tradizionalmente richiede una biopsia polmonare chirurgica in anestesia generale tramite toracoscopia o toracotomia. Ciò comporta una significativa morbilità e mortalità in questo gruppo di pazienti che hanno già una compromissione respiratoria. Le procedure endoscopiche minimamente invasive come il lavaggio broncoalveolare (BAL) e la biopsia polmonare transbronchiale (TBLB) tramite broncoscopia flessibile sono sempre più utilizzate nella maggior parte dei casi in sostituzione della biopsia chirurgica. Sfortunatamente, anche questa non è una procedura del tutto benigna: il BAL può peggiorare l'ipossiemia e il TBLB può portare a sanguinamento significativo o pneumotorace in circa il 5% dei pazienti. Inoltre, la resa diagnostica di TBLB è fortemente limitata a causa delle piccole dimensioni del tessuto e della natura cieca della scelta dei segmenti broncopolmonari target per la biopsia. Altre limitazioni includono una significativa variazione inter-osservatore nell'interpretazione dell'istologia e il problema dell'"errore di campionamento": la possibilità che un campione bioptico sia stato prelevato da un'area non rappresentativa del processo patologico predominante. Queste limitazioni si riflettono nelle basse rese diagnostiche riportate: nei pazienti immunocompromessi, la resa diagnostica di BAL o TBLB è stata del 38% con un tasso di complicanze del 13% e sono state riportate rese diagnostiche <50% con TBLB nella polmonite da ipersensibilità e circa 30% nella normale polmonite interstiziale.

Una diagnosi definitiva è essenziale nella gestione delle patologie polmonari parenchimali diffuse. Le eziologie infettive richiedono una terapia antimicrobica mentre le cause immuno-mediate sono gestite dall'immunosoppressione. La patologia indotta da farmaci richiederà una revisione dei farmaci attuali mentre le condizioni fibrotiche possono essere gestite in attesa. La prognosi è anche marcatamente alterata dall'eziologia e dalla diagnosi. Il divario nella pratica medica attuale è la disponibilità di procedure minimamente invasive con poche complicanze e un'elevata fedeltà diagnostica.

La microscopia a fluorescenza confocale in fibra (FCFM) (CellvizioR Lung, MaunaKea Technologies, Francia) è una tecnica nuova, sicura e minimamente invasiva che può essere utilizzata per ottenere immagini microstrutturali ad alta risoluzione in tempo reale delle strutture polmonari lobulari e alveolari negli esseri umani viventi. FCFM fornisce un'immagine chiara e a fuoco di una sezione sottile all'interno di un campione biologico, dove l'obiettivo del microscopio è sostituito da una minisonda a fibre ottiche flessibile. La tecnica consente di ottenere immagini di alta qualità da fluorofori tissutali endogeni o esogeni, attraverso una sonda a fibre ottiche di 1,4 mm di diametro che può essere introdotta nel canale di lavoro di un broncoscopio flessibile standard. Ciò potrebbe potenzialmente fornire informazioni diagnostiche sulla fibrosi e l'infiammazione degli spazi aerei distali associati a malattie polmonari parenchimali diffuse senza la necessità di biopsie polmonari.

I dati attuali e l'imaging per la FCFM polmonare sono disponibili negli alveoli normali sia dei fumatori che dei non fumatori. L'imaging FCFM patologico del polmone per DPLD deve ancora essere pubblicato. Nei pazienti in attesa di broncoscopia come parte della normale assistenza clinica/diagnostica, gli investigatori offriranno al paziente l'imaging di microscopia a fluorescenza confocale in fibra simultanea da eseguire durante la procedura broncoscopica. Gli investigatori mirano a identificare e catalogare le caratteristiche distinte e discriminanti viste sulle immagini ottenute da FCFM in questo gruppo di pazienti e a correlare questi risultati con caratteristiche HRCT specifiche e risultati patologici, se disponibili. Gli investigatori sperano di essere in grado di dimostrare la riproducibilità dell'interpretazione dell'immagine FCFM, con una minima variabilità intra e inter osservatore e valori Kappa elevati. Alla fine gli investigatori sperano di definire criteri diagnostici e modelli per l'interpretazione dell'immagine FCFM da correlare con specifiche entità DPLD, creando così un atlante di FCFM per DPLD. Ciò migliorerebbe la nostra attuale diagnosi e gestione della DPLD con rischi aggiuntivi minimi per i pazienti.