Výběr embryí pomocí časosběrného monitorování pro přenos jednoho embrya ("SET")

Prospektivní RCT porovnávající dvě metody selekce embryí (algoritmus TL vs. založený na standardní morfologii) pro SET. Byly zařazeny neplodné páry, u kterých bylo plánováno podstoupit IVF nebo intracytoplazmatickou injekci spermie (ICSI) a splňující kritéria pro zařazení do studie. Randomizace do skupin 1 nebo 2 byla provedena před začátkem stimulace. Randomizace byla provedena v blocích po dvou, výběrem TL nebo kontrolních přiřazení z uzavřených, neprůhledných obálek. Pacienti byli zaslepeni, pokud jde o alokaci. Ke stimulaci byly použity standardní protokoly luteálního dlouhého (Suprefact, Sanofi Aventis) a flexibilního antagonisty hormonu uvolňujícího gonadotropin (GnRH) (Cetrotide, Merck Serono) a rekombinantního FSH (Gonal-f, Merck Serono). Embrya byla umístěna do jednotlivých jamek 9jamkové kultivační misky Primo Vision (Vitrolife AB, Švédsko) v den 1 kultivace, po kontrole oplodnění. Manipulace mimo inkubátor byla ve skupinách stejná;: den 1: kontrola oplodnění; den 3: výměna kultivačního média; 5. den: transfer. Ve dnech 3 a 5 byla embrya morfologicky hodnocena pod inverzním mikroskopem. Embrya ve skupině TL byla zobrazena v 10minutových intervalech. Pro analýzu TL snímků byl použit software Primo Vision. První výskyt 2, 3, 4 a 5 buněčných stádií (t2, t3, t4 a t5, v tomto pořadí) byl označen. Časování kinetických událostí bylo vypočítáno z doby oplodnění (t0). (definice parametrů TL viz příloha) Nebyly provedeny žádné úpravy kinetických událostí v závislosti na způsobu oplodnění. Morfologie blastocyst byla hodnocena pomocí Gardnerova skóre. Fragmentace byla hodnocena, když dosáhla nejvyššího stupně v sekvenci TL snímků. Zaznamenány byly také cytoplazmatické abnormality (vakuoly). Referenční rozsahy TL byly definovány a fixovány před začátkem náboru, embrya v kontrolní skupině byla vybrána na základě aktuální morfologie. Primárním cílovým ukazatelem byla míra těhotenství (PR; vzestup β lidského choriového gonadotropinu [hCG]) na pacienta na základě záměru léčit. Dalšími cílovými parametry byly pokračující míra těhotenství (OPR; těhotenství, které progreduje po 12. týdnu těhotenství), ztráta těhotenství (ztráta těhotenství po počátečním zvýšení βhCG až do 12. týdne těhotenství), míra živé porodnosti (LBR), gestační věk (GA) v porodní a porodní hmotnost potomka.

Při výpočtu velikosti vzorku jsme předpokládali 13% nárůst míry těhotenství z očekávaných 42% na 55%. Plánovali jsme provést studii s poměrem 1:1 mezi skupinami a provést jedno průběžné monitorování s informačním zlomkem 0,1. Pomocí oboustranného testu a Pocockových hranic pro odhad bylo vypočteno 282 pacientů v každé skupině (síla 80 %, p 5 %). Za předpokladu 10% neúčasti jsme potřebovali zapsat 620 pacientů.

Na základě výsledků interim monitoringu (61 případů ve dvou ramenech) byla míra těhotenství ve skupině TL o 15 % vyšší než u kontrol (58,3 % vs. 44,0 %). Za předpokladu 58% míry otěhotnění v TL skupině a 44% v kontrolách, velikost vzorku 210 na skupinu byla potřebná k dosažení síly 80% na hladině významnosti 5%. Za předpokladu 10% míry předčasného ukončení léčby bylo zapotřebí celkového vzorku o velikosti 462 pacientů.

Skupiny byly porovnány na základě principů odhadu maximální věrohodnosti. Předpokládali jsme a poté jsme ukázali, že pacienti v léčebných ramenech si byli na začátku v průměru podobní s ohledem na proměnné, které by mohly ovlivnit výsledek. Pro analýzu kategoriálních proměnných byly použity chí-kvadrát testy, věrohodnostní testy a exaktní testy. Spojité proměnné byly porovnány pomocí nezávislého skupinového t-testu a. analýza rozptylu. Byla zkoumána normalita a homogenita rozptylů.

Při průběžné analýze studie byl primární cíl (míra těhotenství) mezi TL a kontrolní skupinou porovnán s Fisherovým exaktním testem. Po uzavření studie byl primární cíl (míra těhotenství) mezi skupinami porovnán s Fisherovým exaktním testem. Bonferroniho korekce byla použita pro p-hodnotu na konci pokusu. Všechny ostatní p-hodnoty byly považovány za průzkumné. V rámci analýz byl také zkoumán rozsah a distribuce chybějících dat. Pro chybějící údaje nebyly provedeny žádné imputace.