Embryoudvælgelse ved Time Lapse-overvågning for enkelt embryooverførsel ("SET")

Prospektiv RCT, der sammenligner to embryoselektionsmetoder (TL-algoritme vs standardmorfologibaseret) for SET. Infertile par, der var planlagt til at gennemgå IVF eller intracytoplasmatisk spermainjektion (ICSI) og opfyldte inklusions-eksklusionskriterierne, blev tilmeldt. Randomisering til gruppe 1 eller 2 blev udført før starten af ​​stimulationen. Randomisering blev udført i blokke af to ved at vælge TL- eller kontroltildelinger fra lukkede, uigennemsigtige konvolutter. Patienterne blev blindet for tildeling. Standard luteal lange (Suprefact, Sanofi Aventis) og fleksible gonadotropin-frigivende hormon (GnRH) antagonist (Cetrotide, Merck Serono) protokoller og rekombinant FSH (Gonal-f, Merck Serono) blev brugt til stimulering. Embryoer blev anbragt i individuelle brønde i en Primo Vision-kulturskål med 9 brønde (Vitrolife AB, Sverige) på dag 1 af dyrkningen efter kontrol for befrugtning. Håndtering uden for inkubator var den samme i grupperne;: dag 1: befrugtningskontrol; dag 3: kulturmedium ændring; dag 5: overførsel. På dag 3 og 5 blev embryonerne morfologisk vurderet under et omvendt mikroskop. Embryoer i TL-gruppen blev afbildet med 10 minutters intervaller. Primo Vision-softwaren blev brugt til analyse af TL-billeder. Den første fremkomst af 2, 3, 4 og 5 cellestadier (henholdsvis t2, t3, t4 og t5) blev kommenteret. Timing af de kinetiske hændelser blev beregnet fra tidspunktet for befrugtningen (t0). (for TL-parameterdefinitioner se supplement) Der var ingen justeringer af de kinetiske hændelser afhængigt af befrugtningsmetoden. Blastocystmorfologi blev vurderet under anvendelse af Gardner-scoren. Fragmentering blev vurderet, da den nåede den højeste karakter i sekvensen af ​​TL-billederne. Cytoplasmatiske abnormiteter (vakuoler) blev også registreret. TL-referenceintervallerne blev defineret og fastsat før starten af ​​rekrutteringen, Embryoer i kontrolgruppen blev udvalgt baseret på faktisk morfologi. Det primære endepunkt var graviditetsrate (PR; stigning i β humant choriongonadotropin [hCG]) pr. patient baseret på intention om at behandle. Yderligere endepunkter var igangværende graviditetsrate (OPR; graviditet, der skrider frem efter 12 ugers svangerskab), graviditetstab (tab af graviditet efter en indledende stigning i βhCG op til 12 ugers svangerskab), levende fødselsrate (LBR), svangerskabsalder (GA) kl. afkommets fødsel og fødselsvægt.

Ved beregning af stikprøvestørrelsen antog vi en stigning på 13 % i graviditetsraten fra en forventet 42 % til 55 %. Vi planlagde at køre undersøgelsen med et forhold på 1:1 mellem grupperne og lave en midlertidig overvågning med 0,1 informationsfraktion. Ved at bruge tosidet test og Pocock-grænser til estimering blev 282 patienter i hver gruppe beregnet (styrke på 80 %, p på 5 %). Forudsat en frafaldsrate på 10 %, skulle vi tilmelde 620 patienter.

Baseret på resultaterne af den midlertidige monitorering (61 tilfælde i to arme) var graviditetsraten i TL-gruppen 15 % højere end i kontroller (58,3 % vs. 44,0 %). Forudsat en graviditetsrate på 58 % i TL-gruppen og 44 % i kontrollerne, var en stikprøvestørrelse på 210 pr. gruppe nødvendig for at opnå en styrke på 80 % ved et signifikansniveau på 5 %. Forudsat en frafaldsrate på 10 % var der behov for en samlet prøve på 462 patienter.

Grupperne blev sammenlignet ud fra principper for estimering af maksimal sandsynlighed. Vi antog en hypotese og viste derefter, at patienterne i behandlingsarmene var ens ved baseline i gennemsnit med hensyn til variabler, der kunne påvirke resultatet. Chi-square test, likelihood-ratio test og eksakte test blev brugt til analyse af kategoriske variabler. Kontinuerlige variabler blev sammenlignet ved hjælp af uafhængig gruppe t-test og. variansanalyse. Normalitet og homogenitet af varianser blev undersøgt.

Ved den foreløbige analyse af forsøget blev det primære endepunkt (graviditetsrate) mellem TL og kontrolgruppen sammenlignet med Fishers eksakte test. Efter afslutning af forsøget blev det primære endepunkt (graviditetsrate) blandt grupperne sammenlignet med Fishers eksakte test. Bonferroni-korrektion blev brugt til p-værdien ved afslutningen af ​​forsøget. Alle andre p-værdier blev betragtet som undersøgende. Under analyserne blev omfanget og fordelingen af ​​manglende data også undersøgt. Der blev ikke foretaget imputation for manglende data.