Отбор эмбрионов с помощью интервального мониторинга для переноса одного эмбриона («SET»)

Проспективное РКИ, сравнивающее два метода отбора эмбрионов (алгоритм TL и стандартная морфология) для SET. Были включены бесплодные пары, которым планировалось пройти ЭКО или интрацитоплазматическую инъекцию сперматозоидов (ИКСИ) и которые соответствовали критериям включения-исключения. Рандомизацию в группы 1 или 2 проводили до начала стимуляции. Рандомизацию проводили блоками по два, выбирая TL или контрольные задания из закрытых непрозрачных конвертов. Пациенты были слепы к распределению. Для стимуляции использовали стандартные протоколы лютеинового длинного (Супрефакт, Санофи Авентис) и гибкого антагониста гонадотропин-рилизинг-гормона (ГнРГ) (Цетротид, Мерк Сероно) и рекомбинантного ФСГ (Гонал-ф, Мерк Сероно). Эмбрионы помещали в отдельные лунки 9-луночной чашки для культивирования Primo Vision (Vitrolife AB, Швеция) на 1-й день культивирования после проверки на оплодотворение. Обращение вне инкубатора было одинаковым в группах: 1-й день: проверка оплодотворения; день 3: смена питательной среды; 5 день: трансфер. На 3-й и 5-й день эмбрионы оценивали морфологически под инвертированным микроскопом. Эмбрионы в группе TL визуализировали с 10-минутными интервалами. Программное обеспечение Primo Vision использовалось для анализа изображений TL. Аннотировано первое появление стадий 2, 3, 4 и 5 клеток (t2, t3, t4 и t5 соответственно). Время кинетических событий рассчитывали по времени оплодотворения (t0). (определения параметров TL см. в дополнении) Не было никаких корректировок кинетических событий в зависимости от метода оплодотворения. Морфологию бластоцисты оценивали по шкале Гарднера. Фрагментацию оценивали, когда она достигала наивысшей степени в последовательности изображений TL. Также регистрировались цитоплазматические аномалии (вакуоли). Референтные диапазоны TL были определены и зафиксированы до начала набора, Эмбрионы в контрольной группе были отобраны на основе фактической морфологии. Первичной конечной точкой была частота наступления беременности (PR; повышение уровня β-хорионического гонадотропина человека [ХГЧ]) на пациента в зависимости от намерения лечить. Другими конечными точками были частота продолжающейся беременности (OPR; беременность, которая прогрессирует после 12 недель гестации), невынашивание беременности (потеря беременности после первоначального повышения уровня βhCG до 12 недель гестации), частота живорождения (LBR), гестационный возраст (GA) в родов и масса потомства при рождении.

При расчете размера выборки мы предполагали увеличение частоты наступления беременности на 13% с ожидаемых 42% до 55%. Мы планировали провести исследование с соотношением групп 1:1 и провести одно промежуточное наблюдение с долей информации 0,1. Используя двусторонний тест и границы Покока для оценки, было рассчитано 282 пациента в каждой группе (мощность 80%, p = 5%). Предполагая, что показатель отсева составляет 10%, нам нужно было зарегистрировать 620 пациентов.

По результатам промежуточного наблюдения (61 случай в двух группах) частота наступления беременности в группе ТЛ была на 15% выше, чем в контроле (58,3% против 44,0%). Предполагая, что частота наступления беременности составляет 58% в группе TL и 44% в контрольной группе, размер выборки 210 на группу был необходим для достижения мощности 80% при уровне значимости 5%. Предполагая, что показатель отсева составляет 10%, потребовалась общая выборка размером 462 пациента.

Группы сравнивались на основе принципов оценки максимального правдоподобия. Мы выдвинули гипотезу, а затем показали, что пациенты в лечебных группах в среднем были сходны на исходном уровне в отношении переменных, которые могли повлиять на исход. Для анализа категориальных переменных использовались тесты хи-квадрат, тесты отношения правдоподобия и точные тесты. Непрерывные переменные сравнивались с использованием независимого группового t-критерия и. дисперсионный анализ. Проверяли нормальность и однородность дисперсий.

При промежуточном анализе исследования первичную конечную точку (уровень беременности) между TL и контрольной группой сравнивали с точным критерием Фишера. После закрытия исследования первичную конечную точку (уровень беременности) среди групп сравнивали с точным критерием Фишера. Поправка Бонферрони использовалась для p-значения в конце испытания. Все остальные p-значения считались исследовательскими по своему характеру. В ходе анализа также изучались степень и распределение отсутствующих данных. Вменение отсутствующих данных не производилось.