Seleção de embriões por monitoramento de lapso de tempo para transferência de embrião único ("SET")

RCT prospectivo comparando dois métodos de seleção de embriões (algoritmo TL versus base morfológica padrão) para SET. Casais inférteis agendados para FIV ou injeção intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) e que atenderam aos critérios de inclusão e exclusão foram incluídos. A randomização para os Grupos 1 ou 2 foi realizada antes do início da estimulação. A randomização foi realizada em blocos de dois, selecionando TL ou atribuições de controle de envelopes fechados e opacos. Os pacientes eram cegos para a alocação. Os protocolos luteal longo padrão (Suprefact, Sanofi Aventis) e flexível do hormônio liberador de gonadotropina (GnRH) (Cetrotide, Merck Serono) e FSH recombinante (Gonal-f, Merck Serono) foram usados ​​para estimulação. Os embriões foram colocados em poços individuais de uma placa de cultura Primo Vision de 9 poços (Vitrolife AB, Suécia) no dia 1 de cultura, após verificar a fertilização. O manuseio fora da incubadora foi o mesmo nos grupos;: dia 1: verificação da fertilização; dia 3: troca do meio de cultura; dia 5: transferência. Nos dias 3 e 5, os embriões foram avaliados morfologicamente em microscópio invertido. Embriões no grupo TL foram fotografados em intervalos de 10 minutos. O software Primo Vision foi utilizado para a análise das imagens TL. A primeira aparição dos estágios de 2, 3, 4 e 5 células (t2, t3, t4 e t5, respectivamente) foi anotada. O tempo dos eventos cinéticos foi calculado a partir do momento da fertilização (t0). (para definições dos parâmetros TL ver suplemento) Não houve ajustes dos eventos cinéticos dependendo do método de fertilização. A morfologia do blastocisto foi avaliada usando o escore de Gardner. A fragmentação foi avaliada quando atingiu o grau mais alto na sequência das imagens TL. Anormalidades citoplasmáticas (vacúolos) também foram registradas. Os intervalos de referência TL foram definidos e fixados antes do início do recrutamento, os embriões no grupo de controle foram selecionados com base na morfologia real. O desfecho primário foi a taxa de gravidez (RP; aumento da β gonadotrofina coriônica humana [hCG]) por paciente com base na intenção de tratar. Outros desfechos foram taxa de gravidez contínua (OPR; gravidez que progride além de 12 semanas de gestação), perda de gravidez (perda de gravidez após um aumento inicial de βhCG até 12 semanas de gestação), taxa de nascidos vivos (LBR), idade gestacional (GA) em parto e peso ao nascer da prole.

Ao calcular o tamanho da amostra, assumimos um aumento de 13% na taxa de gravidez, de 42% para 55%. Planejamos executar o estudo com proporção de 1:1 entre os grupos e fazer um monitoramento intermediário com fração de informação de 0,1. Usando o teste bilateral e os limites de Pocock para estimativa, 282 pacientes em cada grupo foram calculados (poder de 80%, p de 5%). Assumindo uma taxa de abandono de 10%, precisávamos inscrever 620 pacientes.

Com base nos resultados do monitoramento intermediário (61 casos em dois braços), a taxa de gravidez no grupo TL foi 15% maior do que nos controles (58,3% vs. 44,0%). Assumindo uma taxa de gravidez de 58% no grupo TL e 44% nos controles, um tamanho de amostra de 210 por grupo foi necessário para atingir um poder de 80%, a um nível de significância de 5%. Assumindo uma taxa de abandono de 10%, seria necessária uma amostra total de 462 pacientes.

Os grupos foram comparados com base nos princípios de estimativa de máxima verossimilhança. Levantamos a hipótese e, em seguida, mostramos que os pacientes nos braços de tratamento eram semelhantes no início do estudo, em média, com relação às variáveis ​​que podem influenciar o resultado. Testes qui-quadrado, testes de razão de verossimilhança e testes exatos foram utilizados para a análise de variáveis ​​categóricas. Variáveis ​​contínuas foram comparadas usando teste t de grupo independente e. análise de variação. A normalidade e a homogeneidade das variâncias foram examinadas.

Na análise interina do estudo, o endpoint primário (taxa de gravidez) entre LT e o grupo controle foi comparado com o teste exato de Fisher. Após o encerramento do estudo, o endpoint primário (taxa de gravidez) entre os grupos foi comparado com o teste exato de Fisher. A correção de Bonferroni foi usada para o valor de p ao final do ensaio. Todos os outros valores de p foram considerados de natureza exploratória. Durante as análises, a extensão e a distribuição dos dados ausentes também foram examinadas. Nenhuma imputação foi feita para dados ausentes.