Embryonenauswahl durch Zeitrafferüberwachung für den Einzelembryotransfer ("SET")

Prospektive RCT zum Vergleich zweier Embryoselektionsmethoden (TL-Algorithmus vs. Standard-Morphologie-basiert) für SET. Unfruchtbare Paare, die sich einer IVF oder einer intrazytoplasmatischen Spermieninjektion (ICSI) unterziehen sollten und die Einschluss-/Ausschlusskriterien erfüllten, wurden aufgenommen. Die Randomisierung in die Gruppen 1 oder 2 wurde vor Beginn der Stimulation durchgeführt. Die Randomisierung wurde in Zweierblöcken durchgeführt, indem TL oder Kontrollzuweisungen aus geschlossenen, undurchsichtigen Umschlägen ausgewählt wurden. Die Patienten waren bezüglich der Zuordnung verblindet. Für die Stimulation wurden Standardprotokolle für Luteal Long (Suprefact, Sanofi Aventis) und Flexible Gonadotropin-Releasing-Hormon (GnRH)-Antagonisten (Cetrotide, Merck Serono) und rekombinantes FSH (Gonal-f, Merck Serono) verwendet. Embryonen wurden in einzelne Vertiefungen einer Primo Vision-Kulturschale mit 9 Vertiefungen (Vitrolife AB, Schweden) am Tag 1 der Kultur gegeben, nachdem die Befruchtung überprüft worden war. Die Handhabung außerhalb des Inkubators war in den Gruppen gleich: Tag 1: Befruchtungsprüfung; Tag 3: Kulturmediumwechsel; Tag 5: Transfer. An den Tagen 3 und 5 wurden die Embryonen morphologisch unter einem inversen Mikroskop beurteilt. Embryonen in der TL-Gruppe wurden in 10-Minuten-Intervallen abgebildet. Für die Analyse der TL-Bilder wurde die Software Primo Vision verwendet. Das erste Auftreten der Zellstadien 2, 3, 4 und 5 (jeweils t2, t3, t4 und t5) wurde annotiert. Der Zeitpunkt der kinetischen Ereignisse wurde ab dem Zeitpunkt der Befruchtung (t0) berechnet. (Definitionen der TL-Parameter siehe Anhang) Es gab keine Anpassungen der kinetischen Ereignisse in Abhängigkeit von der Befruchtungsmethode. Die Blastozystenmorphologie wurde unter Verwendung des Gardner-Scores bewertet. Die Fragmentierung wurde beurteilt, wenn sie den höchsten Grad in der Sequenz der TL-Bilder erreichte. Zytoplasmatische Anomalien (Vakuolen) wurden ebenfalls aufgezeichnet. Die TL-Referenzbereiche wurden vor Beginn der Rekrutierung definiert und festgelegt, Embryonen in der Kontrollgruppe wurden basierend auf der tatsächlichen Morphologie ausgewählt. Der primäre Endpunkt war die Schwangerschaftsrate (PR; Anstieg des humanen β-Choriongonadotropins [hCG]) pro Patientin basierend auf der Behandlungsabsicht. Weitere Endpunkte waren anhaltende Schwangerschaftsrate (OPR; Schwangerschaft, die über die 12. Schwangerschaftswoche hinaus fortschreitet), Schwangerschaftsverlust (Schwangerschaftsverlust nach anfänglichem Anstieg von βhCG bis zur 12. Schwangerschaftswoche), Lebendgeburtenrate (LBR), Gestationsalter (GA). Geburts- und Geburtsgewicht des Nachwuchses.

Bei der Berechnung der Stichprobengröße gingen wir von einem Anstieg der Schwangerschaftsrate um 13 % von erwarteten 42 % auf 55 % aus. Wir planten, die Studie mit einem Verhältnis von 1:1 zwischen den Gruppen durchzuführen und eine Zwischenüberwachung mit einem Informationsanteil von 0,1 durchzuführen. Unter Verwendung von zweiseitigem Test und Pocock-Grenzen zur Schätzung wurden 282 Patienten in jeder Gruppe berechnet (Power von 80 %, p von 5 %). Unter der Annahme einer Dropout-Rate von 10 % mussten wir 620 Patienten aufnehmen.

Basierend auf den Ergebnissen des Zwischenmonitorings (61 Fälle in zwei Armen) war die Schwangerschaftsrate in der TL-Gruppe 15 % höher als in der Kontrollgruppe (58,3 % vs. 44,0 %). Unter der Annahme einer Schwangerschaftsrate von 58 % in der TL-Gruppe und 44 % in der Kontrollgruppe war eine Stichprobengröße von 210 pro Gruppe erforderlich, um eine Power von 80 % bei einem Signifikanzniveau von 5 % zu erreichen. Unter der Annahme einer Dropout-Rate von 10 % wurde eine Gesamtstichprobe mit einer Größe von 462 Patienten benötigt.

Die Gruppen wurden basierend auf den Prinzipien der Maximum-Likelihood-Schätzung verglichen. Wir stellten die Hypothese auf und zeigten dann, dass die Patienten in den Behandlungsarmen zu Studienbeginn im Durchschnitt ähnlich waren in Bezug auf Variablen, die das Ergebnis beeinflussen könnten. Für die Analyse kategorialer Variablen wurden Chi-Quadrat-Tests, Likelihood-Quotienten-Tests und exakte Tests verwendet. Kontinuierliche Variablen wurden unter Verwendung des unabhängigen Gruppen-t-Tests und verglichen. Varianzanalyse. Normalität und Homogenität der Varianzen wurden untersucht.

Bei der Zwischenanalyse der Studie wurde der primäre Endpunkt (Schwangerschaftsrate) zwischen TL und Kontrollgruppe mit dem exakten Test nach Fisher verglichen. Nach Abschluss der Studie wurde der primäre Endpunkt (Schwangerschaftsrate) zwischen den Gruppen mit dem exakten Test von Fisher verglichen. Am Ende der Studie wurde für den p-Wert eine Bonferroni-Korrektur verwendet. Alle anderen p-Werte wurden als explorativer Natur angesehen. Bei den Analysen wurden auch Umfang und Verteilung fehlender Daten untersucht. Für fehlende Daten wurden keine Imputationen vorgenommen.