Wybór zarodków za pomocą monitorowania poklatkowego do transferu pojedynczego zarodka („SET”)

Prospektywne RCT porównujące dwie metody selekcji zarodków (algorytm TL vs. oparta na standardowej morfologii) dla SET. Włączono niepłodne pary, które miały przejść IVF lub docytoplazmatyczne wstrzyknięcie plemnika (ICSI) i spełniły kryteria włączenia-wykluczenia. Randomizację do grup 1 lub 2 przeprowadzono przed rozpoczęciem stymulacji. Randomizację przeprowadzono w blokach po dwa, wybierając TL lub zadania kontrolne z zamkniętych, nieprzezroczystych kopert. Pacjenci byli zaślepieni co do alokacji. Do stymulacji stosowano standardowy długi lutealny (Suprefact, Sanofi Aventis) i elastyczny antagonista hormonu uwalniającego gonadotropiny (GnRH) (Cetrotide, Merck Serono) oraz rekombinowany FSH (Gonal-f, Merck Serono). Zarodki umieszczono w poszczególnych dołkach 9-dołkowej szalki hodowlanej Primo Vision (Vitrolife AB, Szwecja) pierwszego dnia hodowli, po sprawdzeniu zapłodnienia. Postępowanie poza inkubatorem było takie samo w grupach;: dzień 1: kontrola zapłodnienia; dzień 3: zmiana pożywki hodowlanej; dzień 5: transfer. W dniach 3 i 5 zarodki oceniano morfologicznie pod mikroskopem odwróconym. Zarodki w grupie TL obrazowano w odstępach 10-minutowych. Do analizy obrazów TL wykorzystano oprogramowanie Primo Vision. Opisano pierwsze pojawienie się stadiów komórkowych 2, 3, 4 i 5 (odpowiednio t2, t3, t4 i t5). Czas trwania zdarzeń kinetycznych obliczano na podstawie czasu zapłodnienia (t0). (definicje parametrów TL patrz dodatek) Nie było korekt zdarzeń kinetycznych w zależności od metody zapłodnienia. Morfologię blastocysty oceniano za pomocą skali Gardnera. Fragmentację oceniano, gdy osiągnęła najwyższy stopień w sekwencji obrazów TL. Zarejestrowano również nieprawidłowości cytoplazmatyczne (wakuole). Zakresy referencyjne TL zostały określone i ustalone przed rozpoczęciem rekrutacji, zarodki w grupie kontrolnej zostały wybrane na podstawie rzeczywistej morfologii. Pierwszorzędowym punktem końcowym był odsetek ciąż (PR; wzrost stężenia ludzkiej gonadotropiny kosmówkowej β [hCG]) na pacjentkę w oparciu o zamiar leczenia. Dalszymi punktami końcowymi były odsetek trwających ciąż (OPR; ciąża, która rozwija się po 12 tygodniu ciąży), utrata ciąży (utrata ciąży po początkowym wzroście βhCG do 12 tygodnia ciąży), wskaźnik żywych urodzeń (LBR), porodu i masy urodzeniowej potomstwa.

Przy obliczaniu wielkości próby przyjęliśmy 13% wzrost wskaźnika ciąż z oczekiwanych 42% do 55%. Planowaliśmy przeprowadzić badanie ze stosunkiem 1:1 między grupami i wykonać jedno monitorowanie pośrednie z frakcją informacyjną 0,1. Za pomocą testu dwustronnego i granic Pococka do oszacowania obliczono 282 pacjentów w każdej grupie (moc 80%, p 5%). Zakładając 10% wskaźnik rezygnacji, potrzebowaliśmy zapisać 620 pacjentów.

Na podstawie wyników monitoringu pośredniego (61 przypadków w dwóch ramionach) odsetek ciąż w grupie TL był o 15% wyższy niż w grupie kontrolnej (58,3% vs. 44,0%). Zakładając 58% odsetek ciąż w grupie TL i 44% w grupie kontrolnej, wielkość próby 210 na grupę była potrzebna do osiągnięcia mocy 80%, na poziomie istotności 5%. Zakładając 10% wskaźnik rezygnacji, potrzebna była całkowita próba o wielkości 462 pacjentów.

Grupy porównano w oparciu o zasady oszacowania największej wiarygodności. Postawiliśmy hipotezę, a następnie wykazaliśmy, że pacjenci w ramionach leczenia byli średnio podobni na początku badania w odniesieniu do zmiennych, które mogą wpływać na wynik. Do analizy zmiennych kategorialnych zastosowano testy chi-kwadrat, testy ilorazu wiarygodności oraz testy dokładne. Zmienne ciągłe porównano za pomocą niezależnego testu t-grupy i. analiza wariancji. Zbadano normalność i jednorodność wariancji.

Podczas pośredniej analizy badania porównano pierwszorzędowy punkt końcowy (wskaźnik ciąż) między grupą TL a grupą kontrolną z dokładnym testem Fishera. Po zamknięciu badania porównano pierwszorzędowy punkt końcowy (wskaźnik ciąż) wśród grup z dokładnym testem Fishera. Korektę Bonferroniego zastosowano dla wartości p na koniec badania. Wszystkie inne wartości p uznano za eksploracyjne. W trakcie analiz zbadano również zakres i rozkład braków danych. Nie dokonano imputacji dla brakujących danych.