Embryoselectie door time-lapse-bewaking voor enkele embryo-overdracht ("SET")

Prospectieve RCT waarin twee methoden voor embryoselectie worden vergeleken (gebaseerd op TL-algoritme versus standaardmorfologie) voor SET. Onvruchtbare paren die IVF of intracytoplasmatische sperma-injectie (ICSI) zouden ondergaan en voldeden aan de criteria voor insluiting en uitsluiting, werden ingeschreven. Randomisatie naar Groep 1 of 2 werd uitgevoerd voorafgaand aan de start van de stimulatie. Randomisatie werd uitgevoerd in blokken van twee, door TL- of besturingstoewijzingen te selecteren uit gesloten, ondoorzichtige enveloppen. Patiënten waren blind voor toewijzing. Standaard luteale lange (Suprefact, Sanofi Aventis) en flexibele gonadotropine-releasing hormoon (GnRH) antagonist (Cetrotide, Merck Serono) protocollen en recombinant FSH (Gonal-f, Merck Serono) werden gebruikt voor stimulatie. Embryo's werden op dag 1 van de kweek in individuele putjes van een Primo Vision-kweekschaal met 9 putjes (Vitrolife AB, Zweden) geplaatst, na controle op bevruchting. Behandeling buiten de couveuse was hetzelfde in de groepen;: dag 1: bevruchtingscontrole; dag 3: verandering van kweekmedium; dag 5: transfer. Op dag 3 en 5 werden de embryo's morfologisch beoordeeld onder een omgekeerde microscoop. Embryo's in de TL-groep werden met tussenpozen van 10 minuten afgebeeld. Voor de analyse van TL-beelden is gebruik gemaakt van de software Primo Vision. De eerste verschijning van de 2-, 3-, 4- en 5-cellige stadia (respectievelijk t2, t3, t4 en t5) werden geannoteerd. De timing van de kinetische gebeurtenissen werd berekend vanaf het tijdstip van de bevruchting (t0). (zie bijlage voor TL-parameterdefinities) Er waren geen aanpassingen van de kinetische gebeurtenissen afhankelijk van de bevruchtingsmethode. De morfologie van de blastocyst werd beoordeeld met behulp van de Gardner-score. Fragmentatie werd beoordeeld wanneer het de hoogste graad in de reeks van de TL-beelden bereikte. Cytoplasmatische afwijkingen (vacuolen) werden ook geregistreerd. De TL-referentiebereiken werden gedefinieerd en vastgelegd vóór de start van de werving, embryo's in de controlegroep werden geselecteerd op basis van de werkelijke morfologie. Het primaire eindpunt was het zwangerschapspercentage (PR; stijging van β-humaan choriongonadotrofine [hCG]) per patiënt op basis van de intentie om te behandelen. Andere eindpunten waren doorgaande zwangerschap (OPR; zwangerschap die voortschrijdt na 12 weken zwangerschap), zwangerschapsverlies (verlies van zwangerschap na een aanvankelijke stijging van βhCG tot 12 weken zwangerschap), levend geboortecijfer (LBR), zwangerschapsduur (GA) bij bevalling en geboortegewicht van de nakomelingen.

Bij het berekenen van de steekproefomvang gingen we uit van een stijging van het zwangerschapspercentage met 13% van de verwachte 42% naar 55%. We waren van plan om het onderzoek uit te voeren met een verhouding van 1:1 tussen de groepen en één tussentijdse monitoring uit te voeren met een informatiefractie van 0,1. Met behulp van een tweezijdige test en Pocock-grenzen voor schatting, werden 282 patiënten in elke groep berekend (vermogen van 80%, p van 5%). Uitgaande van een uitvalpercentage van 10% moesten we 620 patiënten inschrijven.

Op basis van de resultaten van de tussentijdse monitoring (61 gevallen in twee armen) was het zwangerschapspercentage in de TL-groep 15% hoger dan in de controlegroep (58,3% vs. 44,0%). Uitgaande van een zwangerschapspercentage van 58% in de TL-groep en 44% in de controlegroep, was een steekproefomvang van 210 per groep nodig om een ​​power van 80% te bereiken, bij een significantieniveau van 5%. Uitgaande van een uitvalpercentage van 10% was een totale steekproef van 462 patiënten nodig.

De groepen werden vergeleken op basis van maximale waarschijnlijkheidsschattingsprincipes. We stelden een hypothese op en toonden vervolgens aan dat de patiënten in de behandelingsarmen bij aanvang gemiddeld vergelijkbaar waren met betrekking tot variabelen die de uitkomst zouden kunnen beïnvloeden. Voor de analyse van categorische variabelen werden chikwadraattoetsen, waarschijnlijkheidsratiotoetsen en exacte toetsen gebruikt. Continue variabelen werden vergeleken met behulp van onafhankelijke groep t-test en. analyse van variantie. Normaliteit en homogeniteit van varianties werden onderzocht.

Bij de tussentijdse analyse van het onderzoek werd het primaire eindpunt (zwangerschapspercentage) tussen TL en controlegroep vergeleken met Fisher's exact test. Na afsluiting van het onderzoek werd het primaire eindpunt (zwangerschapspercentage) van de groepen vergeleken met de Fisher's exact-test. Bonferroni-correctie werd gebruikt voor de p-waarde aan het einde van de proef. Alle andere p-waarden werden als verkennend van aard beschouwd. Tijdens de analyses is ook gekeken naar de omvang en verspreiding van ontbrekende gegevens. Er werden geen imputaties gemaakt voor ontbrekende gegevens.