Role anti-myší PLA2R1 ELISA u membránové nefropatie (SOURIS)

Membranózní nefropatie (MN) je autoimunitní onemocnění ledvin a častou příčinou nefrotického syndromu. Asi u 30 % pacientů s MN progreduje do konečného stádia onemocnění ledvin (ESKD), zatímco u 30 % dochází ke spontánní remisi. Receptor fosfolipázy A2 (PLA2R1) je hlavním autoantigenem u idiopatické MN. Autoprotilátky anti-PLA2R1 se nacházejí během aktivní fáze MN [2,3]. K prediktorům progrese onemocnění patří vysoké titry autoprotilátek anti-PLA2R1 a hladiny sérového kreatininu při projevu, stejně jako pokles renálních funkcí během prvních šesti měsíců sledování. Výzkumníci identifikovali nové prognostické faktory v kohortě 41 idiopatických pacientů s MN s nefrotickým syndromem a autoprotilátkami anti-PLA2R1 v době prezentace. Během sledování po dobu minimálně 36 měsíců mělo 21 pacientů perzistující nefrotický syndrom (skupina A) au 20 došlo k částečné nebo úplné remisi (skupina R). Nejprve jsme měřili zkříženou reaktivitu jejich sér v době prezentace lidské, králičí a myší rekombinantní PLA2R1 pomocí western blotu. Všichni pacienti vykazovali reaktivitu proti lidskému a králičímu PLA2R1, ale pouze někteří z nich vykazovali reaktivitu proti myšímu PLA2R1. Tyto výsledky naznačují přítomnost odlišných epitopů, které jsou mezi orthology PLA2R1 odlišně konzervované. Poté jsme připravili tři paralelní testy ELISA s použitím lidské, králičí a myší rekombinantní PLA2R1. Všech 41 pacientů s MN vykazovalo aktivitu v lidských a králičích ELISA při prezentaci, ale pouze 32 z nich (78 %) v myších ELISA.

Výzkumníci nakonec analyzovali souvislost mezi titry anti-PLA2R1 při prezentaci v různých testech ELISA a následným klinickým výsledkem. Průměrná anti-PLA2R1 aktivita byla významně odlišná mezi skupinou A a R v myším ELISA v jednorozměrných i vícerozměrných analýzách (p = 0,006 a p = 0,02, v daném pořadí), ale ne v lidských a králičích ELISA. Analýza myších titrů ELISA definuje práh 605 RU/ml, nad nímž mělo 100 % pacientů špatnou prognózu, ale žádný takový práh nemohl být definován v králičím a lidském testu ELISA. Pacienti s anti-myší aktivitou PLA2R1 nad 605 RU/ml vykazovali významně nižší přežití bez zdvojnásobení sérového kreatininu nebo ESKD (p=0,002 s použitím log-rank testu), ale pacienti s nejvyšším tertilem anti-PLA2R1 aktivity u králíků a lidské ELISA neprokázaly signifikantně zvýšené riziko progrese renálního selhání. Výsledky naznačují, že specifická detekce konkrétních anti-PLA2R1 autoprotilátek pomocí nové anti-myší PLA2R1 ELISA může identifikovat MN pacienty s rizikem ESKD. Cílem je potvrdit tyto výsledky na prospektivní kohortě. Navrhujeme změřit na prospektivní kohortě v době diagnózy MN, zda je vysoký titr anti-mPLA2R1 Ab (protilátky proti myšímu fosfolipázovému A2 receptoru1) spojen s nefrotickou proteinurií (nad 3,5 g/g) nebo zvýšení kreatininémie o více než 30 % v 6., 12. a 18. měsíci. Pomocná studie se pokusí charakterizovat nefrogenní epitop konzervovaný mezi člověkem, králíkem a myší.

Každý pacient s nefrotickým syndromem by měl mít prospěch z biopsie ledviny. Pro každého pacienta zakonzervujeme 2 suché zkumavky zmrazené v době biopsie. Pokud potvrdíme diagnózu MN pomocí anti-PLA2R1 Ab, navrhujeme pacientovi zařazení do této studie. Během prvních tří měsíců a každé tři měsíce poté bude mít návštěvy s odběrem následujících údajů: krevní tlak, hmotnost, kreatinin, albumin, krevní elektrolyty, proteinurie / kreatinin ve vzorku 1 test Ac anti-PLA2R1 na 3 ELISA (člověk, králík a myš) V případě přetrvávajícího refrakterního nefrotického syndromu po 6 měsících nebo výskytu 30% zvýšení sérového kreatininu bude navržena léčba rituximabem (2 × 1 g IV 15 dní). Klinické a biologické sledování bude pokračovat každé 3 měsíce po dobu 18 měsíců.