Az egér elleni PLA2R1 ELISA szerepe a membrán nefropátiában (SOURIS)

A membrános nephropathia (MN) egy autoimmun vesebetegség, és a nefrotikus szindróma gyakori oka. Az MN betegek körülbelül 30%-a végstádiumú vesebetegségbe (ESKD) fejlődik, míg 30%-a spontán remisszión megy keresztül. A foszfolipáz A2 receptor (PLA2R1) a fő autoantigén idiopátiás MN-ben. Az anti-PLA2R1 autoantitestek az MN aktív fázisában találhatók [2,3]. A betegség progressziójának előrejelzői közé tartozik az anti-PLA2R1 autoantitestek magas titere és a szérum kreatinin szintje a megjelenéskor, valamint a vesefunkció csökkenése a követés első hat hónapjában. A kutatók új prognosztikai tényezőket azonosítottak egy 41 idiopátiás MN-betegből álló kohorszban, akik nephrosis szindrómában és anti-PLA2R1 autoantitestekben szenvedtek a bemutatás időpontjában. A legalább 36 hónapos követés során 21 betegnél volt tartós nephrosis szindróma (A csoport), 20 betegnél pedig részleges vagy teljes remisszió (R csoport). Először Western blot segítségével mértük szérumuk keresztreaktivitását a humán, nyúl és egér rekombináns PLA2R1-nek való bemutatásakor. Minden beteg reaktivitást mutatott az emberi és a nyúl PLA2R1 ellen, de csak néhányuk mutatott reaktivitást egér PLA2R1 ellen. Ezek az eredmények különböző epitópok jelenlétére utalnak, amelyek eltérően konzerváltak a PLA2R1 ortológok között. Ezután három párhuzamos ELISA-t állítottunk be humán, nyúl és egér rekombináns PLA2R1 felhasználásával. Mind a 41 MN beteg mutatott aktivitást humán és nyúl ELISA-ban a bemutatáskor, de közülük csak 32 (78%) egér ELISA-ban.

A kutatók végül elemezték az összefüggést az anti-PLA2R1 titerek között a különböző ELISA-vizsgálatokban történő bemutatáskor és az azt követő klinikai kimenetel között. Az átlagos anti-PLA2R1 aktivitás szignifikánsan különbözött az A és R csoport között egér ELISA-ban mind az egyváltozós, mind a többváltozós elemzésekben (p = 0,006 és p = 0,02), de nem a humán és nyúl ELISA-ban. Az egér ELISA titereinek elemzése 605 RU/ml-es küszöbértéket határoz meg, amely felett a betegek 100%-ának rossz volt a prognózisa, de ilyen küszöbértéket nem lehetett meghatározni nyúl és humán ELISA vizsgálatban. A 605 RU/ml feletti anti-egér PLA2R1 aktivitású betegek szignifikánsan alacsonyabb túlélést mutattak a szérum kreatinin- vagy ESKD-értékének megduplázódása nélkül (p=0,002 a log-rank teszttel), de azok a betegek, akiknél a legmagasabb volt az anti-PLA2R1 aktivitás nyúlban, ill. A humán ELISA-k nem mutattak szignifikánsan megnövekedett veseelégtelenség progresszió kockázatát. Az eredmények arra utalnak, hogy bizonyos anti-PLA2R1 autoantitestek specifikus kimutatása az új anti-egér PLA2R1 ELISA segítségével azonosíthatja az ESKD kockázatának kitett MN betegeket. A cél az, hogy megerősítsük ezeket az eredményeket egy leendő kohorton. Javasoljuk, hogy az MN-diagnózis időpontjában mérjük meg a leendő kohorszban, ha az anti-mPLA2R1 Ab (anti-egér foszfolipáz A2 receptor1 antitestek) magas titere nephrosis proteinuriával (túlhaladva) társul. 3,5 g/g), vagy a kreatininaemia több mint 30%-os növekedése a 6., 12. és 18. hónapban. Egy kiegészítő tanulmány megpróbálja jellemezni az ember, a nyúl és az egér között konzervált nefrogén epitópot.

Minden nephrosis szindrómában szenvedő betegnek részesülnie kell vesebiopsziában. Minden betegnél 2 száraz csövet tárolunk, amelyeket a biopszia idején lefagyasztunk. Ha megerősítjük az MN diagnózisát anti-PLA2R1 Ab-val, javasoljuk, hogy a beteg vegyen részt ebben a vizsgálatban. Az első három hónapban havonta, majd ezt követően háromhavonta meglátogatják a következő adatok gyűjtése során: vérnyomás, testsúly, kreatinin, albumin, vér elektrolitok, proteinuria / kreatinin az 1. mintában Ac anti-PLA2R1 vizsgálat 3 ELISA-n. (ember, nyúl és egér) Ha 6 hónap után tartósan refrakter nephrosis szindróma vagy 30%-os szérum kreatinin-emelkedés jelentkezik, rituximab (2 × 1 g IV 15 nap) kezelés javasolt. A klinikai és biológiai monitorozás 3 havonta folytatódik 18 hónapon keresztül.