Ruolo dell'anti-topo PLA2R1 ELISA nella nefropatia membranosa (SOURIS)

La nefropatia membranosa (MN) è una malattia renale autoimmune e una causa comune di sindrome nefrosica. Circa il 30% dei pazienti con MN progredisce verso la malattia renale allo stadio terminale (ESKD) mentre il 30% va incontro a remissione spontanea. Il recettore della fosfolipasi A2 (PLA2R1) è il principale autoantigene nella MN idiopatica. Gli autoanticorpi anti-PLA2R1 si trovano durante la fase attiva della MN [2,3]. I predittori della progressione della malattia includono titoli elevati di autoanticorpi anti-PLA2R1 e livelli di creatinina sierica alla presentazione, nonché il declino della funzionalità renale durante i primi sei mesi di follow-up. I ricercatori hanno identificato nuovi fattori prognostici in una coorte di 41 pazienti con MN idiopatica con sindrome nefrosica e autoanticorpi anti-PLA2R1 al momento della presentazione. Durante un follow-up di almeno 36 mesi, 21 pazienti hanno avuto una sindrome nefrosica persistente (gruppo A) e 20 hanno mostrato una remissione parziale o totale (gruppo R). Per prima cosa abbiamo misurato la reattività crociata dei loro sieri al momento della presentazione a PLA2R1 ricombinante umana, di coniglio e di topo mediante western blot. Tutti i pazienti hanno mostrato reattività contro PLA2R1 umano e di coniglio, ma solo alcuni di loro lo hanno fatto contro PLA2R1 di topo. Questi risultati suggeriscono la presenza di epitopi distinti che sono conservati in modo differenziato tra gli ortologi PLA2R1. Abbiamo quindi allestito tre ELISA paralleli utilizzando PLA2R1 ricombinante umana, di coniglio e di topo. Tutti i 41 pazienti con MN hanno mostrato attività in ELISA umano e di coniglio alla presentazione, ma solo 32 di loro (78%) in ELISA di topo.

I ricercatori hanno infine analizzato l'associazione tra i titoli anti-PLA2R1 alla presentazione nei diversi ELISA e il successivo esito clinico. L'attività media anti-PLA2R1 era significativamente diversa tra il gruppo A e R nel topo ELISA sia nelle analisi univariate che multivariate (p = 0,006 e p = 0,02, rispettivamente) ma non negli ELISA umani e di coniglio. Un'analisi dei titoli ELISA del topo definisce una soglia di 605 RU/ml al di sopra della quale il 100% dei pazienti ha avuto una prognosi infausta, ma non è stato possibile definire tale soglia nel coniglio e nell'ELISA umano. I pazienti con attività PLA2R1 anti-topo superiore a 605 RU/ml hanno mostrato una sopravvivenza significativamente inferiore senza raddoppio della creatinina sierica o ESKD (p=0,002 utilizzando il log-rank test), ma i pazienti nel terzile più alto dell'attività anti-PLA2R1 nel coniglio e gli ELISA umani non hanno mostrato un aumento significativo del rischio di progressione dell'insufficienza renale. I risultati suggeriscono che il rilevamento specifico di particolari autoanticorpi anti-PLA2R1 utilizzando il nuovo ELISA PLA2R1 anti-topo può identificare i pazienti affetti da MN a rischio di ESKD. L'obiettivo è confermare questi risultati su una coorte prospettica. Proponiamo di misurare su una coorte prospettica al momento della diagnosi di MN se un alto titolo di Ab anti-mPLA2R1 (anticorpi anti-recettore 1 della fosfolipasi A2 del topo) è associato a proteinuria nefrosica (oltre 3,5 g/g) o aumento della creatininemia superiore al 30% al mese 6, 12 e 18. Uno studio accessorio cercherà di caratterizzare l'epitopo nefrogenico conservato tra uomo, coniglio e topo.

Ogni paziente con sindrome nefrosica dovrebbe beneficiare di una biopsia renale. Per ogni paziente verranno conservate 2 provette asciutte congelate al momento della biopsia. Se confermiamo la diagnosi di MN con anti-PLA2R1 Ab, proponiamo al paziente di essere incluso in questo studio. Farà una visita ogni mese per i primi tre mesi e ogni tre mesi successivi, con raccolta dei seguenti dati: pressione arteriosa, peso, creatinina, albumina, elettroliti ematici, proteinuria/creatinina nel campione 1 dosaggio Ac anti-PLA2R1 su 3 ELISA (umano, coniglio e topo) In caso di sindrome nefrosica refrattaria persistente dopo 6 mesi, o la comparsa di un aumento del 30% della creatinina sierica, verrà proposto il trattamento con rituximab (2 × 1 g EV 15 giorni). Il monitoraggio clinico e biologico sarà continuato ogni 3 mesi per 18 mesi.