Rôle de l'ELISA anti-souris PLA2R1 dans la néphropathie membraneuse (SOURIS)

La néphropathie membraneuse (MN) est une maladie rénale auto-immune et une cause fréquente de syndrome néphrotique. Environ 30 % des patients atteints de MN évoluent vers une insuffisance rénale terminale (ESKD) tandis que 30 % subissent une rémission spontanée. Le récepteur de la phospholipase A2 (PLA2R1) est le principal auto-antigène dans la MN idiopathique. Les auto-anticorps anti-PLA2R1 sont retrouvés pendant la phase active de la MN [2,3]. Les prédicteurs de la progression de la maladie comprennent des titres élevés d'auto-anticorps anti-PLA2R1 et des taux de créatinine sérique à la présentation, ainsi qu'un déclin de la fonction rénale au cours des six premiers mois de suivi. Les chercheurs ont identifié de nouveaux facteurs pronostiques dans une cohorte de 41 patients MN idiopathiques atteints de syndrome néphrotique et d'auto-anticorps anti-PLA2R1 au moment de la présentation. Au cours d'un suivi d'au moins 36 mois, 21 patients avaient un syndrome néphrotique persistant (groupe A) et 20 présentaient une rémission partielle ou totale (groupe R). Nous avons d'abord mesuré la réactivité croisée de leurs sérums au moment de la présentation à la PLA2R1 recombinante humaine, de lapin et de souris par western blot. Tous les patients ont présenté une réactivité contre la PLA2R1 humaine et de lapin, mais seuls certains d'entre eux l'ont fait contre la PLA2R1 de souris. Ces résultats suggèrent la présence d'épitopes distincts qui sont conservés de manière différentielle parmi les orthologues de PLA2R1. Nous avons ensuite mis en place trois ELISA parallèles en utilisant de la PLA2R1 recombinante humaine, de lapin et de souris. Tous les 41 patients MN ont montré une activité dans les ELISA humains et lapins lors de la présentation, mais seulement 32 d'entre eux (78%) dans les ELISA souris.

Les investigateurs ont finalement analysé l'association entre les titres anti-PLA2R1 lors de la présentation dans les différents ELISA et le résultat clinique ultérieur. L'activité anti-PLA2R1 moyenne était significativement différente entre les groupes A et R dans l'ELISA de souris dans les analyses univariées et multivariées (p = 0, 006 et p = 0, 02, respectivement), mais pas dans les ELISA humains et lapins. Une analyse des titres ELISA souris définit un seuil de 605 RU/ml au-delà duquel 100% des patients avaient un mauvais pronostic, mais aucun tel seuil n'a pu être défini en ELISA lapin et humain. Les patients avec une activité anti-PLA2R1 de souris supérieure à 605 RU/ml ont montré une survie significativement plus faible sans doublement de la créatinine sérique ou de l'ESKD (p = 0,002 en utilisant le test du log-rank), mais les patients dans le tertile le plus élevé d'activité anti-PLA2R1 chez le lapin et les tests ELISA humains n'ont pas montré d'augmentation significative du risque de progression de l'insuffisance rénale. Les résultats suggèrent que la détection spécifique d'auto-anticorps anti-PLA2R1 particuliers à l'aide du nouvel ELISA anti-PLA2R1 de souris peut identifier les patients atteints de MN à risque d'ESKD. L'objectif est de confirmer ces résultats sur une cohorte prospective. Nous proposons de mesurer sur une cohorte prospective au moment du diagnostic de MN si un titre élevé d'Ac anti-mPLA2R1 (anticorps anti-récepteur1 de la phospholipase A2 de souris) est associé à une protéinurie néphrotique (sur 3,5 g/g) ou augmentation de la créatininémie de plus de 30 % aux mois 6, 12 et 18. Une étude ancillaire tentera de caractériser l'épitope néphrogénique conservé entre l'homme, le lapin et la souris.

Chaque patient atteint d'un syndrome néphrotique doit bénéficier d'une biopsie rénale. Pour chaque patient nous conserverons 2 tubes secs congelés au moment de la biopsie. Si nous confirmons le diagnostic de MN par Ac anti-PLA2R1, nous proposons au patient d'être inclus dans cette étude. Il aura une visite tous les mois pendant les trois premiers mois et tous les trois mois après, avec recueil des éléments suivants : tension artérielle, poids, créatinine, albumine, électrolytes sanguins, protéinurie/créatinine dans l'échantillon 1 dosage Ac anti-PLA2R1 sur 3 ELISA (humain, lapin et souris) En cas de syndrome néphrotique réfractaire persistant après 6 mois, ou d'apparition d'une augmentation de 30% de la créatinine sérique, un traitement par rituximab (2 × 1 g IV 15 jours) sera proposé. La surveillance clinique et biologique sera poursuivie tous les 3 mois pendant 18 mois.