Papel de ELISA PLA2R1 anti-ratón en la nefropatía membranosa (SOURIS)

La nefropatía membranosa (MN) es una enfermedad renal autoinmune y una causa común de síndrome nefrótico. Alrededor del 30% de los pacientes con MN progresan a enfermedad renal en etapa terminal (ESKD), mientras que el 30% experimenta una remisión espontánea. El receptor de fosfolipasa A2 (PLA2R1) es el autoantígeno principal en la MN idiopática. Los autoanticuerpos anti-PLA2R1 se encuentran durante la fase activa de la MN [2,3]. Los predictores de la progresión de la enfermedad incluyen títulos elevados de autoanticuerpos anti-PLA2R1 y niveles de creatinina sérica en el momento de la presentación, así como una disminución de la función renal durante los primeros seis meses de seguimiento. Los investigadores identificaron nuevos factores pronósticos en una cohorte de 41 pacientes con MN idiopática con síndrome nefrótico y autoanticuerpos anti-PLA2R1 en el momento de la presentación. Durante un seguimiento de al menos 36 meses, 21 pacientes presentaron síndrome nefrótico persistente (grupo A) y 20 mostraron remisión parcial o total (grupo R). Primero medimos la reactividad cruzada de sus sueros en el momento de la presentación a PLA2R1 recombinante humana, de conejo y de ratón mediante transferencia Western. Todos los pacientes mostraron reactividad contra PLA2R1 humano y de conejo, pero solo algunos de ellos lo hicieron contra PLA2R1 de ratón. Estos resultados sugieren la presencia de distintos epítopos que se conservan diferencialmente entre los ortólogos de PLA2R1. Luego configuramos tres ELISA paralelos usando PLA2R1 recombinante humana, de conejo y de ratón. Los 41 pacientes con MN mostraron actividad en ELISA humanos y de conejo en la presentación, pero solo 32 de ellos (78 %) en ELISA de ratón.

Los investigadores finalmente analizaron la asociación entre los títulos de anti-PLA2R1 en la presentación en los diferentes ELISA y el resultado clínico posterior. La actividad anti-PLA2R1 media fue significativamente diferente entre los grupos A y R en ELISA de ratón en análisis univariados y multivariados (p = 0,006 y p = 0,02, respectivamente), pero no en ELISA humanos y de conejo. Un análisis de los títulos de ELISA de ratón define un umbral de 605 RU/ml por encima del cual el 100 % de los pacientes tenían un mal pronóstico, pero tal umbral no pudo definirse en ELISA de conejo y humano. Los pacientes con actividad anti-PLA2R1 de ratón superior a 605 RU/ml mostraron una supervivencia significativamente menor sin duplicar la creatinina sérica o la ERC (p=0,002 usando la prueba de rango logarítmico), pero los pacientes en el tercil más alto de actividad anti-PLA2R1 en conejo y Los ELISA humanos no mostraron un aumento significativo del riesgo de progresión de la insuficiencia renal. Los resultados sugieren que la detección específica de autoanticuerpos anti-PLA2R1 particulares utilizando el novedoso ELISA anti-PLA2R1 de ratón puede identificar a los pacientes con MN en riesgo de ESKD. El objetivo es confirmar estos resultados en una cohorte prospectiva. Proponemos medir en una cohorte prospectiva en el momento del diagnóstico de MN si un título alto de Ab anti-mPLA2R1 (anticuerpos anti-receptor1 de fosfolipasa A2 de ratón) se asocia con proteinuria nefrótica (más 3,5 g/g) o aumento de la creatininemia superior al 30% a los 6, 12 y 18 meses. Un estudio complementario intentará caracterizar el epítopo nefrogénico conservado entre humanos, conejos y ratones.

Todo paciente con síndrome nefrótico debe beneficiarse de una biopsia renal. Para cada paciente se conservarán 2 tubos secos congelados en el momento de la biopsia. Si confirmamos el diagnóstico de MN con Ab anti-PLA2R1, proponemos al paciente ser incluido en este estudio. Tendrá visita mensual durante los primeros tres meses y cada tres meses después, con recolección de lo siguiente: presión arterial, peso, creatinina, albúmina, electrolitos en sangre, proteinuria/creatinina en muestra 1 ensayo Ac anti-PLA2R1 en 3 ELISA (humano, conejo y ratón) En caso de persistencia del síndrome nefrótico refractario a los 6 meses, o de aparición de un aumento del 30% de la creatinina sérica, se propondrá tratamiento con rituximab (2 × 1 g IV 15 días). Se continuará con el seguimiento clínico y biológico cada 3 meses durante 18 meses.