Papel do anti-camundongo PLA2R1 ELISA na nefropatia membranosa (SOURIS)

A Nefropatia Membranosa (MN) é uma doença renal autoimune e uma causa comum de síndrome nefrótica. Cerca de 30% dos pacientes com MN progridem para doença renal terminal (ESKD), enquanto 30% sofrem remissão espontânea. O receptor da fosfolipase A2 (PLA2R1) é o principal autoantígeno na MN idiopática. Autoanticorpos anti-PLA2R1 são encontrados durante a fase ativa da MN [2,3]. Preditores de progressão da doença incluem altos títulos de autoanticorpos anti-PLA2R1 e níveis séricos de creatinina na apresentação, bem como declínio da função renal durante os primeiros seis meses de acompanhamento. Os investigadores identificaram novos fatores prognósticos em uma coorte de 41 pacientes idiopáticos com MN com síndrome nefrótica e autoanticorpos anti-PLA2R1 no momento da apresentação. Durante um seguimento de pelo menos 36 meses, 21 pacientes apresentaram síndrome nefrótica persistente (grupo A) e 20 apresentaram remissão parcial ou total (grupo R). Primeiro, medimos a reatividade cruzada de seus soros no momento da apresentação ao PLA2R1 recombinante humano, de coelho e de camundongo por western blot. Todos os pacientes exibiram reatividade contra PLA2R1 humano e de coelho, mas apenas alguns deles o fizeram contra PLA2R1 de camundongo. Esses resultados sugerem a presença de epítopos distintos que são diferencialmente conservados entre ortólogos de PLA2R1. Em seguida, montamos três ELISAs paralelos usando PLA2R1 recombinante humano, de coelho e de camundongo. Todos os 41 pacientes com MN mostraram atividade em ELISAs de humanos e coelhos na apresentação, mas apenas 32 deles (78%) em ELISA de camundongo.

Os investigadores finalmente analisaram a associação entre os títulos de anti-PLA2R1 na apresentação nos diferentes ELISAs e o resultado clínico subsequente. A atividade anti-PLA2R1 média foi significativamente diferente entre os grupos A e R em ELISA de camundongo em análises univariadas e multivariadas (p = 0,006 ep = 0,02, respectivamente), mas não em ELISAs de humanos e coelhos. Uma análise dos títulos de ELISA do camundongo define um limiar de 605 RU/ml acima do qual 100% dos pacientes tiveram um mau prognóstico, mas nenhum tal limiar pode ser definido em coelho e ELISA humano. Pacientes com atividade PLA2R1 anti-camundongo acima de 605 RU/ml apresentaram uma sobrevida significativamente menor sem duplicação da creatinina sérica ou ESKD (p=0,002 usando o teste de log-rank), mas pacientes no tercil mais alto de atividade anti-PLA2R1 em coelho e os ELISAs humanos não mostraram um risco aumentado significativo de progressão da insuficiência renal. Os resultados sugerem que a detecção específica de autoanticorpos anti-PLA2R1 específicos usando o novo anti-camundongo PLA2R1 ELISA pode identificar pacientes com MN em risco de ESKD. O objetivo é confirmar esses resultados em uma coorte prospectiva. Propomos medir em uma coorte prospectiva no momento do diagnóstico de MN se o alto título de anti-mPLA2R1 Ab (anticorpos anti-receptor1 de fosfolipase A2 de camundongo) está associado a proteinúria nefrótica (mais de 3,5 g/g) ou aumento da creatininemia acima de 30% no mês 6, 12 e 18. Um estudo auxiliar tentará caracterizar o epítopo nefrogênico conservado entre humanos, coelhos e camundongos.

Cada paciente com síndrome nefrótica deve se beneficiar de uma biópsia renal. Para cada paciente serão conservados 2 tubos secos congelados no momento da biópsia. Se confirmarmos o diagnóstico de MN com anti-PLA2R1 Ab, propomos ao paciente ser incluído neste estudo. Ele fará uma visita mensal nos primeiros três meses e a cada três meses depois, com coleta dos seguintes dados: pressão arterial, peso, creatinina, albumina, eletrólitos sanguíneos, proteinúria / creatinina na amostra 1 ensaio Ac anti-PLA2R1 em 3 ELISA (humano, coelho e camundongo) Em caso de síndrome nefrótica refratária persistente após 6 meses, ou aparecimento de aumento de 30% da creatinina sérica, será proposto o tratamento com rituximabe (2 × 1 g IV 15 dias). O monitoramento clínico e biológico será continuado a cada 3 meses por 18 meses.