Anti-hiiri PLA2R1 ELISA:n rooli kalvonefropatiassa (SOURIS)

Membranoinen nefropatia (MN) on autoimmuuninen munuaissairaus ja yleinen nefroottisen oireyhtymän syy. Noin 30 % MN-potilaista etenee loppuvaiheen munuaissairauteen (ESKD), kun taas 30 % saa spontaanin remission. Fosfolipaasi A2-reseptori (PLA2R1) on tärkein autoantigeeni idiopaattisessa MN:ssä. Anti-PLA2R1-autovasta-aineita löydetään MN:n aktiivisen vaiheen aikana [2,3]. Taudin etenemisen ennustajia ovat anti-PLA2R1-autovasta-aineiden korkeat tiitterit ja seerumin kreatiniinitasot esiintymishetkellä sekä munuaisten toiminnan heikkeneminen seurannan ensimmäisen kuuden kuukauden aikana. Tutkijat tunnistivat uusia prognostisia tekijöitä 41 idiopaattisen MN-potilaan kohortissa, joilla oli nefroottinen oireyhtymä ja anti-PLA2R1-autovasta-aineita esittelyhetkellä. Vähintään 36 kuukauden seurannan aikana 21 potilaalla oli jatkuva nefroottinen oireyhtymä (ryhmä A) ja 20 potilaalla oli osittainen tai täydellinen remissio (ryhmä R). Mittasimme ensin niiden seerumien ristireaktiivisuuden, kun ne esitettiin ihmisen, kanin ja hiiren rekombinanttiselle PLA2R1:lle Western blot -menetelmällä. Kaikki potilaat osoittivat reaktiivisuutta ihmisen ja kanin PLA2R1:tä vastaan, mutta vain osa heistä reagoi hiiren PLA2R1:tä vastaan. Nämä tulokset viittaavat erillisten epitooppien läsnäoloon, jotka ovat erilailla konservoituneita PLA2R1-ortologien joukossa. Asensimme sitten kolme rinnakkaista ELISA:ta käyttämällä ihmisen, kanin ja hiiren rekombinanttia PLA2R1:tä. Kaikki 41 MN-potilasta osoittivat aktiivisuutta ihmisen ja kanin ELISA:ssa esittelyn aikana, mutta vain 32 heistä (78 %) hiiren ELISA:ssa.

Lopulta tutkijat analysoivat anti-PLA2R1-tiitterien välisen yhteyden eri ELISA-testeissä esiintymisen ja myöhemmän kliinisen tuloksen välillä. Keskimääräinen anti-PLA2R1-aktiivisuus oli merkitsevästi erilainen ryhmän A ja R välillä hiiren ELISA:ssa sekä yksimuuttuja- että monimuuttujaanalyyseissä (p = 0,006 ja p = 0,02, vastaavasti), mutta ei ihmisen ja kanin ELISA:ssa. Hiiren ELISA-tiitterien analyysi määrittelee kynnyksen 605 RU/ml, jonka yläpuolella 100 %:lla potilaista oli huono ennuste, mutta sellaista kynnystä ei voitu määrittää kanin ja ihmisen ELISA:ssa. Potilaat, joiden anti-hiiri-PLA2R1-aktiivisuus oli yli 605 RU/ml, osoittivat merkittävästi alhaisempaa eloonjäämistä ilman seerumin kreatiniini- tai ESKD-arvojen kaksinkertaistamista (p=0,002 log-rank-testillä), mutta potilailla, joilla oli korkein anti-PLA2R1-aktiivisuus kaniinilla ja ihmisen ELISA-testit eivät osoittaneet merkittävää lisääntynyttä munuaisten vajaatoiminnan etenemisen riskiä. Tulokset viittaavat siihen, että tiettyjen anti-PLA2R1-autovasta-aineiden spesifinen havaitseminen käyttämällä uutta anti-hiiri-PLA2R1-ELISAa voi tunnistaa MN-potilaat, joilla on ESKD-riski. Tavoitteena on vahvistaa nämä tulokset tulevassa kohortissa. Ehdotamme mittaamista tulevasta kohortista MN-diagnoosin aikana, jos korkea anti-mPLA2R1 Ab:n (anti-hiiren fosfolipaasi A2-reseptori1 -vasta-aineet) tiitteri liittyy nefroottiseen proteinuriaan (yli 3,5 g/g) tai kreatininemia lisääntyi yli 30 % kuukautena 6, 12 ja 18. Apututkimuksessa yritetään karakterisoida ihmisen, kanin ja hiiren välillä säilynyt nefrogeeninen epitooppi.

Jokaisen potilaan, jolla on nefroottinen oireyhtymä, tulisi hyötyä munuaisbiopsiasta. Jokaiselle potilaalle säilytetään 2 kuivaa putkea, jotka on jäädytetty biopsian aikana. Jos vahvistamme MN-diagnoosin anti-PLA2R1 Ab:lla, ehdotamme potilaan ottamista mukaan tähän tutkimukseen. Hän vierailee kuukausittain kolmen ensimmäisen kuukauden ajan ja kolmen kuukauden välein sen jälkeen, jolloin kerätään seuraavat tiedot: verenpaine, paino, kreatiniini, albumiini, veren elektrolyytit, proteinuria / kreatiniini näytteessä 1 Ac anti-PLA2R1 3 ELISAlla. (ihminen, kani ja hiiri) Jos jatkuva refraktaarinen nefroottinen oireyhtymä 6 kuukauden jälkeen tai seerumin kreatiniinipitoisuus nousee 30 %, ehdotetaan hoitoa rituksimabilla (2 × 1 g IV 15 päivää). Kliinistä ja biologista seurantaa jatketaan 3 kuukauden välein 18 kuukauden ajan.