Studie zánětlivých markerů (VNN1) u Crohnovy choroby a ulcerózní kolitidy. (VANIN)

Zánětlivá onemocnění střev (IBD) zahrnují Crohnovu chorobu a ulcerózní kolitidu. Přesný původ IBD je dosud neznámý. Dnes je současná hypotéza patogeneze onemocnění taková, že IBD je výsledkem dysregulované slizniční imunitní odpovědi na střevní mikrobiální flóru u geneticky citlivých hostitelů. Střevní homeostáza závisí na interakcích mezi imunitními a epiteliálními buňkami. Epiteliální buňky jsou první obrannou linií, jsou pevně spojeny s lymfoidní tkání související se střevem a jejich změna vede ke ztrátě tkáňové homeostázy.

Vanin-1 (Vnn1 u myší, VNN1 u lidí) je epiteliální pantheináza, která reguluje buněčnou odpověď na stres.

Tento ektoenzym hydrolyzuje pantethein derivát vitaminu B5, aby poskytl cysteamin tkáním a regeneroval pantothenát. Předchozí studie ukázaly, že myši Vnn1 KO byly odolnější vůči experimentální kolitidě a podávání cystaminu (oxidovaná forma cysteaminu) obnovilo jejich náchylnost ke kolitidě. Kromě toho analýza exprese VNN1 u pacientů s IBD ukazuje, že vysoká exprese VNN1 je spojena se závažnými klinickými příznaky. Analýza exprese VNN1 by tedy mohla představovat dobrý prognostický marker.

V nedávno publikovaném článku jsme charakterizovali retrospektivní kohortu 500 pacientů s IBD a kontrolovali nové SNP (jednonukleotidové polymorfismy) v promotoru VNN1 a ukázali jsme jejich souvislost s incidencí IBD a vysokou expresí VNN1. To naznačuje, že gen VNN1 by mohl být novým predispozičním markerem IBD.

U myší je exprese Vnn1 přísně regulována aktivací transkripčních faktorů PPARa a PPARg. Je zajímavé, že jeden z SNP identifikovaných u pacientů se účastní vazebného místa PPARg. Je zajímavé, že léky příbuzné rodině 5-ASA, které se běžně používají u IBD, mají potenciál agonisty PPARgama. Proto kvantifikace hladin VNN1 u pacientů pod terapií 5-ASA může pomoci předpovědět odpověď na terapii a vybrat pacienty s nejvyšším přínosem pro tuto terapii.

Účelem tohoto nového projektu je rozšířit naši počáteční analýzu. Studie bude prospektivní, monocentrická a kontrolovaná. Jeho primárním cílem je vyhodnotit úroveň exprese VNN1 ve sliznici tlustého střeva mezi pacienty s IBD a kontrolními subjekty, aby se potvrdila korelace mezi vysokou expresí VNN1 a IBD. V souvislosti s jeho prospektivní povahou se také pokusíme spojit hladinu exprese VNN1 se specifickými endofenotypy (závažnost a/nebo lokalizace lézí, kvalita odpovědi na terapii). Nakonec provedeme screening pacientů na dříve identifikované SNP, abychom tyto informace integrovali do interpretace výsledků analýzy exprese.

Toto studium je plánováno na 2 roky. Budou vytvořeny dvě skupiny pacientů: jedna skupina bude zahrnovat pacienty s IBD sledované v „Service de Gastro-entérologie du Pr Grimaud à l'Hôpital Nord“ a druhá skupina bude tvořit kontrolní kohortu zahrnující osoby, kterým byla navržena screeningová kolonoskopie rodinná anamnéza rakoviny tlustého střeva nebo polypů nebo syndromu dráždivého tračníku.

Zkoušející bude muset pro každého zahrnutého pacienta vyplnit dotazník, který bude shromažďovat informace o věku, pohlaví, minulé anamnéze, užívaném léku, zažívacích příznacích a indikaci kolonoskopie.

Pacienti s IBD budou mít první sadu biopsií (n = 10) a vzorky krve odebrané v celkové anestezii během kolonoskopie plánované v rámci jejich obvyklého sledování IBD; druhá sada podobných vzorků bude odebrána během následujících 12 měsíců, pokud bude endoskopická kontrola lékařsky odůvodněná. Kontrolní subjekty budou mít během kolonoskopie pouze jednu sadu biopsií a vzorků krve odebraných v celkové anestezii. V konkrétním případě pacientů s IBD, kteří vyžadují operaci, bude malý kousek resekce odebrán ex-vivo na zdravých i patologických oblastech.

Vzorek krve bude sloužit pro kvantifikaci aktivity VNN1 sérové ​​panteinázy a genetickou studii SNP.

Biopsie tlustého střeva budou získány v duplikátech z 5 různých ileokolonických oblastí, jedna pro histopatologickou analýzu a druhá pro transkripční analýzu pomocí qRT-PCR.

Chirurgické vzorky budou použity pro transkripční aktivitu, aktivitu tkáňové panteinázy a vytvoření banky TMA (Tissue MicroArrays) pro imunohistochemii.

Očekávaným přínosem je validace nového prognostického markeru IBD pro závažnost onemocnění nebo potenciálně pro hodnocení terapeutické odpovědi.