Gyulladásos markerek (VNN1) vizsgálata Crohn-betegségben és fekélyes vastagbélgyulladásban. (VANIN)

A gyulladásos bélbetegségek (IBD) közé tartozik a Crohn-betegség és a fekélyes vastagbélgyulladás. Az IBD pontos eredete eddig ismeretlen. Napjainkban a betegség patogenezisének jelenlegi hipotézise az, hogy az IBD a genetikailag fogékony gazdaszervezetek bélmikrobiális flórájára adott nem szabályozott nyálkahártya immunválasz eredménye. A bél homeosztázis az immun- és a hámsejtek közötti kölcsönhatásoktól függ. Az epiteliális sejtek jelentik az első védelmi vonalat, szorosan kapcsolódnak a mögöttes bélrendszerhez kapcsolódó limfoid szövetekhez, és elváltozásuk a szöveti homeosztázis elvesztését eredményezi.

A vanin-1 (egerekben Vnn1, emberben VNN1) egy epiteliális panteináz, amely szabályozza a sejtek stresszre adott válaszát.

Ez az ektoenzim hidrolizálja a B5-vitamin-származékot, a panteteint, hogy ciszteamint biztosítson a szöveteknek és regenerálja a pantotenátot. Korábbi vizsgálatok kimutatták, hogy a Vnn1 KO egerek ellenállóbbak voltak a kísérleti vastagbélgyulladással szemben, és a cisztamin (a ciszteamin oxidált formája) beadása helyreállította a vastagbélgyulladásra való érzékenységüket. Ezenkívül a VNN1 expressziójának elemzése IBD-s betegekben azt mutatja, hogy a magas VNN1 expresszió súlyos klinikai tünetekkel jár. Így a VNN1 expresszió elemzése jó prognosztikai markert jelenthet.

Egy közelmúltban megjelent cikkünkben 500 IBD-betegből álló retrospektív kohorszot jellemeztünk, és új SNP-ket (egy nukleotid polimorfizmusokat) kontrolláltunk a VNN1 promoterben, és kimutattuk, hogy összefüggésben állnak az IBD előfordulásával és a magas VNN1 expresszióval. Ez arra utalt, hogy a VNN1 gén az IBD új hajlamjelzője lehet.

Egérben a Vnn1 expresszióját szigorúan szabályozza a PPARa és PPARg transzkripciós faktorok aktiválása. Érdekes módon a betegekben azonosított SNP-k egyike részt vesz egy PPARg kötőhelyen. Érdekes módon az IBD-ben általánosan használt 5-ASA családhoz kapcsolódó gyógyszerek PPARgamma agonista potenciállal rendelkeznek. Ezért az 5-ASA-terápia alatt álló betegek VNN1-szintjének számszerűsítése segíthet a terápiára adott válasz előrejelzésében és a terápia szempontjából a legnagyobb haszonnal rendelkező betegek kiválasztásában.

Az új projekt célja a kezdeti elemzésünk kiterjesztése. A vizsgálat prospektív, monocentrikus és kontrollált lesz. Elsődleges célja a VNN1 expresszió szintjének értékelése a vastagbél nyálkahártyájában az IBD betegek és a kontroll alanyok között, hogy megerősítsék a magas VNN1 expresszió és az IBD közötti összefüggést. Prospektív jellege kapcsán megpróbáljuk a VNN1 expressziós szintjét specifikus endofenotípusokhoz (a léziók súlyossága és/vagy lokalizációja, a terápiára adott válasz minősége) társítani. Végül szűrjük a betegeket a korábban azonosított SNP-kre, hogy ezeket az információkat integráljuk az expressziós elemzés eredményeinek értelmezéséhez.

Ezt a tanulmányt 2 évre tervezik. Két betegcsoport kerül kialakításra: az egyik csoportba azok az IBD-betegek tartoznak, akiket a "Service de Gastro-entérologie du Pr Grimaud à l'Hôpital Nord" követnek, a másik csoport pedig a kontrollcsoportot alkotja majd, beleértve azokat a személyeket, akiknek szűrő kolonoszkópiát javasoltak. a családban előfordult vastagbélrák vagy polipok, vagy irritábilis bél szindróma.

A vizsgálónak minden bevont páciensről ki kell töltenie egy kérdőívet, amelyben információkat gyűjt az életkorról, nemről, korábbi kórtörténetről, szedett gyógyszerről, emésztési tünetekről és kolonoszkópia indikációjáról.

Az IBD-ben szenvedő betegek első biopsziás sorozatát (n = 10) és vérmintát vesznek általános érzéstelenítésben az IBD szokásos követése során tervezett kolonoszkópia során; a következő 12 hónapon belül egy második sorozat hasonló mintát gyűjtenek, ha az endoszkópos kontroll orvosilag indokolt. A kontroll alanyoknak csak egy sor biopsziát és vérmintát vesznek általános érzéstelenítésben a kolonoszkópia során. A műtétre szoruló IBD-betegek esetében a reszekció egy kis darabját ex vivo gyűjtik egészséges és patológiás területeken egyaránt.

A vérminta a VNN1 szerikus panteteináz aktivitásának mennyiségi meghatározására és az SNP genetikai vizsgálatára szolgál.

A vastagbélbiopsziákat 5 különböző csípőbél-területről kettős példányban veszik, az egyik kórszövettani analízishez, a másik pedig a qRT-PCR-rel végzett transzkripciós elemzéshez.

A sebészeti mintákat transzkripciós aktivitásra, szöveti panteteináz aktivitásra és a TMA (Tissue MicroArrays) bank felépítésére használják fel az immunhisztokémiai vizsgálatokhoz.

A várható előnyök egy új IBD prognosztikai marker validálása a betegség súlyosságára vagy potenciálisan a terápiás válasz értékelésére.