Undersøgelse af inflammatoriske markører (VNN1) i Crohns sygdom og colitis ulcerosa. (VANIN)

Inflammatoriske tarmsygdomme (IBD) omfatter Crohns sygdom og colitis ulcerosa. IBD's præcise oprindelse er ukendt indtil nu. I dag er den nuværende hypotese om sygdomspatogenesen, at IBD er et resultat af et dysreguleret slimhindeimmunrespons på tarmens mikrobielle flora i genetisk modtagelige værter. Den intestinale homeostase afhænger af interaktioner mellem immun- og epitelceller. Epitelceller er den første forsvarslinje, er tæt forbundet med det underliggende tarmassocierede lymfoide væv, og deres ændring resulterer i tab af vævshomeostase.

Vanin-1 (Vnn1 hos mus, VNN1 hos mennesker) er en epitelial pantheinase, som regulerer cellens reaktion på stress.

Dette ektoenzym hydrolyserer vitamin B5-derivatet pantethein for at give cysteamin til væv og regenerere pantothenat. Tidligere undersøgelser har vist, at Vnn1 KO-mus var mere modstandsdygtige over for eksperimentel colitis, og administration af cystamin (oxideret form af cysteamin) genoprettede deres modtagelighed for colitis. Endvidere viser analyse af VNN1-ekspression hos IBD-patienter, at høj VNN1-ekspression er forbundet med alvorlige kliniske træk. Således kunne analyse af VNN1-ekspression repræsentere en god prognostisk markør.

I en nylig publiceret artikel karakteriserede vi blandt en retrospektiv kohorte på 500 IBD-patienter og kontrollerer nye SNP'er (single nucleotid polymorphisms) i VNN1-promotoren og viste deres sammenhæng med IBD-incidens og høj VNN1-ekspression. Dette antydede, at VNN1-genet kunne være en ny dispositionsmarkør for IBD.

Hos mus er Vnn1-ekspression stramt reguleret ved aktivering af PPARa- og PPARg-transkriptionsfaktorer. Interessant nok deltager en af ​​SNP'erne identificeret i patienter til et PPARg-bindingssted. Interessant nok har lægemidler relateret til familien af ​​5-ASA, som almindeligvis anvendes i IBD, PPARgamma-agonistpotentiale. Derfor kan kvantificering af VNN1-niveauer hos patienter under 5-ASA-behandling hjælpe med at forudsige respons på terapi og udvælge patienter med den største fordel for denne terapi.

Formålet med dette nye projekt er at udvide vores indledende analyse. Undersøgelsen vil være prospektiv, monocentrisk og kontrolleret. Dets primære mål er at evaluere niveauet af VNN1-ekspression i tyktarmsslimhinden mellem IBD-patienter og kontrolpersoner for at bekræfte sammenhængen mellem høj VNN1-ekspression og IBD. I forhold til dens prospektive natur vil vi også forsøge at associere VNN1-ekspressionsniveau med specifikke endofenotyper (sværhedsgrad og/eller lokalisering af læsionerne, kvaliteten af ​​responsen på terapien). Endelig vil vi screene patienter for de tidligere identificerede SNP'er for at integrere denne information i fortolkningen af ​​resultaterne af ekspressionsanalyse.

Denne undersøgelse er planlagt til 2 år. To grupper af patienter vil blive konstitueret: Den ene gruppe vil omfatte IBD-patienter fulgt i " Service de Gastro-entérologie du Pr Grimaud à l'Hôpital Nord ", og den anden gruppe vil udgøre kontrolkohorten inklusive personer, der blev foreslået en screening koloskopi for familiær historie med tyktarmskræft eller polypper, eller for irritabel tyktarm.

Efterforskeren skal udfylde et spørgeskema for hver inkluderet patient, og indsamle oplysninger om alder, køn, tidligere sygehistorie, indtaget medicin, fordøjelsessymptomer og koloskopi indikation.

IBD-patienter vil have et første sæt biopsier (n = 10) og blodprøver indsamlet under generel anæstesi under en koloskopi planlagt i deres IBD sædvanlige opfølgning; et andet sæt lignende prøver vil blive indsamlet inden for de næste 12 måneder, hvis en endoskopisk kontrol er medicinsk begrundet. Kontrolpersonerne får kun ét sæt biopsi og blodprøver indsamlet under generel anæstesi under deres koloskopi. I det særlige tilfælde med IBD-patienter, som kræver operation, vil et lille stykke af resektionen blive indsamlet ex-vivo på både sunde og patologiske områder.

Blodprøven vil tjene til kvantificering af VNN1 serisk pantheteinase-aktivitet og SNP's genetiske undersøgelse.

Kolonbiopsierne vil blive opnået i dubletter fra 5 forskellige ileokoloniske områder, et til histopatologisk analyse og det andet til transkriptionel analyse ved qRT-PCR.

De kirurgiske prøver vil blive brugt til transkriptionel aktivitet, vævs-pantheteinase-aktivitet og konstitution af TMA (Tissue MicroArrays) bank til immunhistokemi.

Forventede fordele er at validere en ny IBD prognostisk markør for sygdommens sværhedsgrad eller potentielt til evaluering af den terapeutiske respons.