Badanie markerów stanu zapalnego (VNN1) w chorobie Leśniowskiego-Crohna i wrzodziejącym zapaleniu jelita grubego. (VANIN)

Choroby zapalne jelit (IBD) obejmują chorobę Leśniowskiego-Crohna i wrzodziejące zapalenie jelita grubego. Dokładne pochodzenie IBD jest nieznane do tej pory. Obecna hipoteza dotycząca patogenezy choroby zakłada, że ​​IBD wynika z rozregulowanej odpowiedzi immunologicznej błony śluzowej na florę bakteryjną jelit u genetycznie podatnych gospodarzy. Homeostaza jelitowa zależy od interakcji między komórkami odpornościowymi i nabłonkowymi. Komórki nabłonkowe są pierwszą linią obrony, są ściśle połączone z tkanką limfatyczną związaną z jelitami, a ich zmiana powoduje utratę homeostazy tkanki.

Wanina-1 (Vnn1 u myszy, VNN1 u ludzi) jest nabłonkową panteinazą, która reguluje odpowiedź komórek na stres.

Ten ektoenzym hydrolizuje pantetenę, pochodną witaminy B5, dostarczając cysteaminę do tkanek i regenerując pantotenian. Wcześniejsze badania wykazały, że myszy Vnn1 KO były bardziej odporne na eksperymentalne zapalenie jelita grubego, a podawanie cystaminy (utlenionej postaci cysteaminy) przywróciło ich podatność na zapalenie jelita grubego. Ponadto analiza ekspresji VNN1 u pacjentów z IBD pokazuje, że wysoka ekspresja VNN1 jest związana z poważnymi objawami klinicznymi. Zatem analiza ekspresji VNN1 może stanowić dobry marker prognostyczny.

W niedawno opublikowanym artykule scharakteryzowaliśmy wśród retrospektywnej kohorty 500 pacjentów z IBD i kontrolujemy nowe SNP (polimorfizmy pojedynczego nukleotydu) w promotorze VNN1 i wykazaliśmy ich związek z częstością występowania IBD i wysoką ekspresją VNN1. Sugeruje to, że gen VNN1 może być nowym markerem predyspozycji do IBD.

U myszy ekspresja Vnn1 jest ściśle regulowana przez aktywację czynników transkrypcyjnych PPARa i PPARg. Co ciekawe, jeden z SNP zidentyfikowanych u pacjentów uczestniczy w miejscu wiązania PPARg. Co ciekawe, powszechnie stosowane w nieswoistych zapaleniach jelit leki z rodziny 5-ASA mają potencjał agonisty PPARgamma. Dlatego ilościowe określenie poziomów VNN1 u pacjentów poddawanych terapii 5-ASA może pomóc w przewidywaniu odpowiedzi na terapię i wybraniu pacjentów z największą korzyścią z tej terapii.

Celem tego nowego projektu jest rozszerzenie naszej wstępnej analizy. Badanie będzie prospektywne, monocentryczne i kontrolowane. Jego głównym celem jest ocena poziomu ekspresji VNN1 w błonie śluzowej okrężnicy między pacjentami z IBD a osobami kontrolnymi, aby potwierdzić korelację między wysoką ekspresją VNN1 a IBD. W związku z jej prospektywnym charakterem postaramy się również powiązać poziom ekspresji VNN1 z określonymi endofenotypami (nasileniem i/lub lokalizacją zmian, jakością odpowiedzi na terapię). Na koniec przeprowadzimy badania przesiewowe pacjentów pod kątem wcześniej zidentyfikowanych SNP, aby zintegrować te informacje z interpretacją wyników analizy ekspresji.

To badanie jest zaplanowane na 2 lata. Zostaną utworzone dwie grupy pacjentów: jedna grupa będzie obejmowała pacjentów z IBD obserwowanych w „Service de Gastro-entérologie du Pr Grimaud à l'Hôpital Nord”, a druga grupa będzie stanowić kohortę kontrolną obejmującą osoby, którym zaproponowano kolonoskopię przesiewową w kierunku rodzinna historia raka okrężnicy lub polipów lub zespołu jelita drażliwego.

Badacz będzie musiał wypełnić kwestionariusz dla każdego objętego badaniem pacjenta, zbierając informacje o wieku, płci, historii choroby, przyjmowanych lekach, objawach ze strony przewodu pokarmowego oraz wskazaniach do kolonoskopii.

Pacjenci z nieswoistym zapaleniem jelit będą mieli pierwszy zestaw biopsji (n = 10) i próbki krwi pobrane w znieczuleniu ogólnym podczas kolonoskopii zaplanowanej w ich zwykłej obserwacji z nieswoistym zapaleniem jelit; drugi zestaw podobnych próbek zostanie pobrany w ciągu najbliższych 12 miesięcy, jeśli kontrola endoskopowa będzie uzasadniona medycznie. Osoby kontrolne będą miały tylko jeden zestaw biopsji i próbek krwi pobranych w znieczuleniu ogólnym podczas kolonoskopii. W szczególnym przypadku pacjentów z nieswoistym zapaleniem jelit, którzy wymagają operacji, mały fragment resekcji zostanie pobrany ex vivo zarówno z obszarów zdrowych, jak i patologicznych.

Próbka krwi posłuży do ilościowego oznaczenia aktywności panteinazy serowej VNN1 i badania genetycznego SNP.

Biopsje okrężnicy zostaną uzyskane w dwóch powtórzeniach z 5 różnych obszarów jelita krętego i okrężnicy, jednego do analizy histopatologicznej, a drugiego do analizy transkrypcji metodą qRT-PCR.

Próbki chirurgiczne zostaną wykorzystane do oceny aktywności transkrypcyjnej, aktywności panteeinazy tkankowej i utworzenia banku TMA (Tissue MicroArrays) do immunohistochemii.

Oczekiwane korzyści to walidacja nowego markera prognostycznego IBD dla ciężkości choroby lub potencjalnie ocena odpowiedzi terapeutycznej.