Étude des marqueurs inflammatoires (VNN1) dans la maladie de Crohn et la rectocolite hémorragique. (VANIN)

Les maladies inflammatoires de l'intestin (MICI) comprennent la maladie de Crohn et la colite ulcéreuse. L'origine précise de l'IBD est inconnue jusqu'à présent. Aujourd'hui, l'hypothèse actuelle de la pathogenèse de la maladie est que les MICI résultent d'une réponse immunitaire muqueuse dérégulée à la flore microbienne intestinale chez des hôtes génétiquement sensibles. L'homéostasie intestinale dépend des interactions entre les cellules immunitaires et épithéliales. Les cellules épithéliales sont la première ligne de défense, sont étroitement connectées au tissu lymphoïde associé à l'intestin sous-jacent et leur altération entraîne une perte d'homéostasie tissulaire.

La vanine-1 (Vnn1 chez la souris, VNN1 chez l'homme) est une panthéinase épithéliale qui régule la réponse cellulaire au stress.

Cette ectoenzyme hydrolyse la pantéthéine dérivée de la vitamine B5 pour fournir de la cystéamine aux tissus et régénérer le pantothénate. Des études antérieures ont montré que les souris Vnn1 KO étaient plus résistantes à la colite expérimentale et l'administration de cystamine (forme oxydée de la cystéamine) a restauré leur susceptibilité à la colite. De plus, l'analyse de l'expression de VNN1 chez les patients atteints de MII montre qu'une expression élevée de VNN1 est associée à des caractéristiques cliniques graves. Ainsi, l'analyse de l'expression de VNN1 pourrait représenter un bon marqueur pronostique.

Dans un article récemment publié, nous avons caractérisé parmi une cohorte rétrospective de 500 patients atteints de MII et témoins de nouveaux SNP (polymorphismes mononucléotidiques) dans le promoteur VNN1 et montré leur association avec l'incidence des MII et l'expression élevée de VNN1. Cela suggère que le gène VNN1 pourrait être un nouveau marqueur de prédisposition aux MII.

Chez la souris, l'expression de Vnn1 est étroitement régulée par l'activation des facteurs de transcription PPARa et PPARg. Fait intéressant, l'un des SNP identifiés chez les patients participe à un site de liaison PPARg. Fait intéressant, les médicaments apparentés à la famille des 5-ASA qui sont couramment utilisés dans les MII ont un potentiel d'agoniste du PPARgamma. Par conséquent, la quantification des niveaux de VNN1 chez les patients sous traitement au 5-ASA pourrait aider à prédire la réponse au traitement et à sélectionner les patients présentant les avantages les plus élevés pour ce traitement.

L'objectif de ce nouveau projet est de prolonger notre analyse initiale. L'étude sera prospective, monocentrique et contrôlée. Son objectif principal est d'évaluer le niveau d'expression de VNN1 dans la muqueuse colique entre les patients atteints de MICI et les sujets témoins afin de confirmer la corrélation entre une expression élevée de VNN1 et la MICI. En relation avec son caractère prospectif, nous chercherons également à associer le niveau d'expression de VNN1 à des endophénotypes spécifiques (sévérité et/ou localisation des lésions, qualité de la réponse au traitement). Enfin, nous sélectionnerons les patients pour les SNP précédemment identifiés afin d'intégrer ces informations dans l'interprétation des résultats de l'analyse de l'expression.

Cette étude est prévue sur 2 ans. Deux groupes de patients seront constitués : un groupe comprendra les patients MICI suivis dans le « Service de Gastro-entérologie du Pr Grimaud à l'Hôpital Nord » et l'autre groupe constituera la cohorte témoin comprenant les personnes à qui on a proposé une coloscopie de dépistage pour antécédents familiaux de cancer du côlon ou de polypes, ou pour le syndrome du côlon irritable.

L'investigateur devra remplir un questionnaire pour chaque patient inclus, recueillant des informations sur l'âge, le sexe, les antécédents médicaux, la prise de médicaments, les symptômes digestifs et l'indication de la coloscopie.

Les patients atteints de MICI auront une première série de biopsies (n = 10) et de prélèvements sanguins effectués sous anesthésie générale lors d'une coloscopie prévue dans leur suivi habituel de MII ; une deuxième série d'échantillons similaires sera prélevée dans les 12 prochains mois si un contrôle endoscopique est médicalement justifié. Les sujets témoins n'auront qu'un seul ensemble de biopsies et d'échantillons sanguins prélevés sous anesthésie générale au cours de leur coloscopie. Dans le cas particulier des patients atteints de MICI nécessitant une intervention chirurgicale, un petit morceau de la résection sera prélevé ex-vivo sur les zones saines et pathologiques.

L'échantillon sanguin servira à la quantification de l'activité panthétéinase sérique VNN1 et à l'étude génétique du SNP.

Les biopsies coliques seront obtenues en double à partir de 5 zones iléocoliques différentes, l'une pour l'analyse histopathologique et l'autre pour l'analyse transcriptionnelle par qRT-PCR.

Les prélèvements chirurgicaux seront utilisés pour l'activité transcriptionnelle, l'activité panthétéinase tissulaire et la constitution d'une banque de TMA (Tissue MicroArrays) pour l'immunohistochimie.

Les bénéfices attendus sont de valider un nouveau marqueur pronostique des MICI pour la sévérité de la maladie ou potentiellement pour l'évaluation de la réponse thérapeutique.