Studie av inflammatoriske markører (VNN1) ved Crohns sykdom og ulcerøs kolitt. (VANIN)

Inflammatoriske tarmsykdommer (IBD) inkluderer Crohns sykdom og ulcerøs kolitt. IBDs nøyaktige opprinnelse er ukjent til nå. I dag er den nåværende hypotesen om sykdomspatogenesen at IBD er et resultat av en dysregulert slimhinneimmunrespons på tarmmikrobielle flora i genetisk mottakelige verter. Tarmhomeostasen avhenger av interaksjoner mellom immun- og epitelceller. Epitelceller er den første forsvarslinjen, er tett koblet til det underliggende tarmassosierte lymfoidvevet og deres endring resulterer i tap av vevshomeostase.

Vanin-1 (Vnn1 hos mus, VNN1 hos mennesker) er en epitelial pantheinase som regulerer celleresponsen på stress.

Dette ektoenzymet hydrolyserer vitamin B5-derivatet pantetein for å gi cysteamin til vev og regenerere pantotenat. Tidligere studier har vist at Vnn1 KO-mus var mer motstandsdyktige mot eksperimentell kolitt og administrering av cystamin (oksidert form av cysteamin) gjenopprettet deres mottakelighet for kolitt. Videre viser analyse av VNN1-uttrykk hos IBD-pasienter at høyt VNN1-uttrykk er assosiert med alvorlige kliniske trekk. Dermed kan analyse av VNN1-uttrykk representere en god prognostisk markør.

I en nylig publisert artikkel karakteriserte vi blant en retrospektiv kohort på 500 IBD-pasienter og kontrollerer nye SNP-er (single nucleotide polymorphisms) i VNN1-promotoren og viste deres assosiasjon med IBD-forekomst og høyt VNN1-uttrykk. Dette antydet at VNN1-genet kan være en ny predisposisjonsmarkør for IBD.

Hos mus er Vnn1-ekspresjon tett regulert ved aktivering av PPARa- og PPARg-transkripsjonsfaktorer. Interessant nok deltar en av SNP-ene identifisert hos pasienter til et PPARg-bindingssted. Interessant nok har legemidler relatert til 5-ASA-familien som ofte brukes i IBD, PPARgamma-agonistpotensial. Derfor kan kvantifisering av VNN1-nivåer hos pasienter under 5-ASA-behandling hjelpe til med å forutsi respons på terapi og velge pasienter med størst fordel for denne terapien.

Hensikten med dette nye prosjektet er å utvide vår første analyse. Studien vil være prospektiv, monosentrisk og kontrollert. Dens primære mål er å evaluere nivået av VNN1-uttrykk i tykktarmsslimhinnen mellom IBD-pasienter og kontrollpersoner for å bekrefte korrelasjonen mellom høyt VNN1-uttrykk og IBD. I forhold til dens prospektive natur, vil vi også prøve å assosiere VNN1-ekspresjonsnivå med spesifikke endofenotyper (alvorlighetsgrad og/eller lokalisering av lesjonene, kvaliteten på responsen på terapi). Til slutt vil vi screene pasienter for de tidligere identifiserte SNP-ene for å integrere denne informasjonen i tolkningen av resultatene av ekspresjonsanalyse.

Denne studien er planlagt over 2 år. To grupper av pasienter vil bli konstituert: en gruppe vil inkludere IBD-pasienter fulgt i "Service de Gastro-entérologie du Pr Grimaud à l'Hôpital Nord" og den andre gruppen vil utgjøre kontrollkohorten inkludert personer som ble foreslått en screening koloskopi for familiær historie med tykktarmskreft eller polypper, eller for irritabel tarmsyndrom.

Etterforskeren må fylle ut et spørreskjema for hver inkluderte pasient, og samle informasjon om alder, kjønn, tidligere sykehistorie, tatt medisin, fordøyelsessymptomer og koloskopi-indikasjon.

IBD-pasienter vil ha et første sett med biopsier (n = 10) og blodprøver tatt under generell anestesi under en koloskopi planlagt i deres vanlige IBD-oppfølging; et andre sett med lignende prøver vil bli samlet inn i løpet av de neste 12 månedene hvis en endoskopisk kontroll er medisinsk begrunnet. Kontrollpersonene vil få bare ett sett med biopsi og blodprøver samlet under generell anestesi under koloskopien. I det spesielle tilfellet med IBD-pasienter som trenger kirurgi, vil en liten del av reseksjonen bli samlet ex vivo på både friske og patologiske områder.

Blodprøven vil tjene til kvantifisering av VNN1 serisk pantheteinase-aktivitet og SNPs genetiske studie.

Kolonbiopsiene vil bli innhentet i duplikater fra 5 forskjellige ileokoloniske områder, ett for histopatologisk analyse og det andre for transkripsjonsanalyse ved qRT-PCR.

De kirurgiske prøvene vil bli brukt til transkripsjonell aktivitet, vevspanteteinaseaktivitet og konstitusjon av TMA (Tissue MicroArrays) bank for immunhistokjemi.

Forventede fordeler er å validere en ny IBD prognostisk markør for sykdoms alvorlighetsgrad eller potensielt for evaluering av den terapeutiske responsen.