Studie van inflammatoire markers (VNN1) bij de ziekte van Crohn en colitis ulcerosa. (VANIN)

Inflammatoire darmziekten (IBD) omvatten de ziekte van Crohn en colitis ulcerosa. De precieze oorsprong van IBD is tot nu toe onbekend. Tegenwoordig is de huidige hypothese van de pathogenese van de ziekte dat IBD het gevolg is van een ontregelde mucosale immuunrespons op de microbiële darmflora in genetisch gevoelige gastheren. De intestinale homeostase is afhankelijk van interacties tussen immuun- en epitheelcellen. Epitheelcellen vormen de eerste verdedigingslinie, zijn nauw verbonden met het onderliggende met de darm geassocieerde lymfoïde weefsel en hun verandering resulteert in verlies van weefselhomeostase.

Vanin-1 (Vnn1 bij muizen, VNN1 bij mensen) is een epitheliaal pantheïnase dat de celrespons op stress reguleert.

Dit ecto-enzym hydrolyseert het vitamine B5-derivaat pantetheïne om cysteamine aan weefsels te leveren en pantothenaat te regenereren. Eerdere studies hebben aangetoond dat Vnn1 KO-muizen beter bestand waren tegen experimentele colitis en toediening van cystamine (geoxideerde vorm van cysteamine) herstelde hun vatbaarheid voor colitis. Bovendien toont analyse van VNN1-expressie bij IBD-patiënten aan dat een hoge VNN1-expressie geassocieerd is met ernstige klinische kenmerken. Analyse van VNN1-expressie zou dus een goede prognostische marker kunnen zijn.

In een recent gepubliceerd artikel karakteriseerden we onder een retrospectief cohort van 500 IBD-patiënten en controles nieuwe SNP's (single nucleotide polymorphisms) in de VNN1-promoter en toonden hun associatie met IBD-incidentie en hoge VNN1-expressie. Dit suggereerde dat het VNN1-gen een nieuwe predispositie-marker van IBD zou kunnen zijn.

Bij muizen wordt de Vnn1-expressie strak gereguleerd door activering van PPARa- en PPARg-transcriptiefactoren. Interessant is dat een van de bij patiënten geïdentificeerde SNP's deelneemt aan een PPARg-bindingsplaats. Interessant is dat geneesmiddelen die verwant zijn aan de familie van 5-ASA en die vaak worden gebruikt bij IBD, PPARgamma-agonistpotentieel hebben. Daarom kan het kwantificeren van VNN1-niveaus bij patiënten onder 5-ASA-therapie helpen bij het voorspellen van de respons op therapie en het selecteren van patiënten met het grootste voordeel voor deze therapie.

Het doel van dit nieuwe project is om onze eerste analyse uit te breiden. De studie zal prospectief, monocentrisch en gecontroleerd zijn. Het primaire doel is om het niveau van VNN1-expressie in het colonslijmvlies tussen IBD-patiënten en controlepersonen te evalueren om de correlatie tussen hoge VNN1-expressie en IBD te bevestigen. In verband met de prospectieve aard ervan, zullen we ook proberen het VNN1-expressieniveau te associëren met specifieke endofenotypes (ernst en/of lokalisatie van de laesies, kwaliteit van de respons op therapie). Ten slotte zullen we patiënten screenen op de eerder geïdentificeerde SNP's om deze informatie te integreren in de interpretatie van de resultaten van expressie-analyse.

Deze studie is gepland op 2 jaar. Er zullen twee patiëntengroepen worden samengesteld: de ene groep zal IBD-patiënten omvatten die worden gevolgd in de " Service de Gastro-entérologie du Pr Grimaud à l'Hôpital Nord " en de andere groep zal het controlecohort vormen met personen aan wie een screeningscoloscopie is voorgesteld voor familiegeschiedenis van darmkanker of poliepen, of voor het prikkelbare darmsyndroom.

De onderzoeker zal voor elke geïncludeerde patiënt een vragenlijst moeten invullen en informatie verzamelen over leeftijd, geslacht, medische voorgeschiedenis, ingenomen medicijnen, spijsverteringssymptomen en colonoscopie-indicatie.

IBD-patiënten krijgen een eerste reeks biopsieën (n = 10) en bloedmonsters die onder algemene anesthesie worden afgenomen tijdens een colonoscopie die is gepland in hun gebruikelijke follow-up van IBD; indien een endoscopische controle medisch verantwoord is, zal binnen de komende 12 maanden een tweede reeks gelijkaardige monsters worden genomen. De controlepersonen zullen tijdens hun colonoscopie slechts één set biopsie en bloedmonsters hebben die onder algemene anesthesie zijn afgenomen. In het specifieke geval van IBD-patiënten die een operatie nodig hebben, zal een klein stukje van de resectie ex-vivo worden verzameld op zowel gezonde als pathologische gebieden.

Het bloedmonster zal dienen voor kwantificering van de VNN1 serische pantheteïnase-activiteit en de genetische studie van SNP.

De colonbiopten zullen in duplo worden verkregen uit 5 verschillende ileocolongebieden, één voor histopathologische analyse en de andere voor transcriptionele analyse door middel van qRT-PCR.

De chirurgische monsters zullen worden gebruikt voor transcriptionele activiteit, weefselpantheteïnase-activiteit en opbouw van TMA-bank (Tissue MicroArrays) voor immunohistochemie.

De verwachte voordelen zijn het valideren van een nieuwe prognostische marker voor IBD voor de ernst van de ziekte of mogelijk voor de evaluatie van de therapeutische respons.