Estudio de Marcadores Inflamatorios (VNN1) en Enfermedad de Crohn y Colitis Ulcerosa. (VANIN)

Las enfermedades inflamatorias del intestino (EII) incluyen la enfermedad de Crohn y la colitis ulcerosa. El origen preciso de la EII se desconoce hasta el momento. Hoy en día, la hipótesis actual de la patogenia de la enfermedad es que la EII es el resultado de una respuesta inmunitaria desregulada de la mucosa a la flora microbiana intestinal en huéspedes genéticamente susceptibles. La homeostasis intestinal depende de las interacciones entre las células inmunitarias y epiteliales. Las células epiteliales son la primera línea de defensa, están estrechamente conectadas al tejido linfoide asociado al intestino subyacente y su alteración da como resultado la pérdida de la homeostasis tisular.

Vanin-1 (Vnn1 en ratones, VNN1 en humanos) es una panteinasa epitelial que regula la respuesta celular al estrés.

Esta ectoenzima hidroliza la panteteína derivada de la vitamina B5 para proporcionar cisteamina a los tejidos y regenerar el pantotenato. Estudios previos han demostrado que los ratones Vnn1 KO eran más resistentes a la colitis experimental y la administración de cistamina (forma oxidada de la cisteamina) restauró su susceptibilidad a la colitis. Además, el análisis de la expresión de VNN1 en pacientes con EII muestra que la expresión alta de VNN1 se asocia con características clínicas graves. Por lo tanto, el análisis de la expresión de VNN1 podría representar un buen marcador de pronóstico.

En un artículo publicado recientemente, caracterizamos entre una cohorte retrospectiva de 500 pacientes con EII y controles nuevos SNP (polimorfismos de un solo nucleótido) en el promotor VNN1 y mostramos su asociación con la incidencia de EII y la alta expresión de VNN1. Esto sugirió que el gen VNN1 podría ser un nuevo marcador de predisposición a la EII.

En ratones, la expresión de Vnn1 está estrechamente regulada por la activación de los factores de transcripción PPARa y PPARg. Curiosamente, uno de los SNP identificados en pacientes participa en un sitio de unión de PPARg. Curiosamente, los fármacos relacionados con la familia de 5-ASA que se usan comúnmente en la EII tienen potencial agonista de PPARgamma. Por lo tanto, cuantificar los niveles de VNN1 en pacientes bajo terapia con 5-ASA podría ayudar a predecir la respuesta a la terapia y seleccionar a los pacientes con el mayor beneficio para esta terapia.

El propósito de este nuevo proyecto es ampliar nuestro análisis inicial. El estudio será prospectivo, monocéntrico y controlado. Su objetivo principal es evaluar el nivel de expresión de VNN1 en la mucosa del colon entre pacientes con EII y sujetos de control para confirmar la correlación entre la alta expresión de VNN1 y la EII. En relación con su carácter prospectivo, también intentaremos asociar el nivel de expresión de VNN1 con endofenotipos específicos (severidad y/o localización de las lesiones, calidad de la respuesta a la terapia). Finalmente, examinaremos a los pacientes en busca de los SNP previamente identificados para integrar esta información en la interpretación de los resultados del análisis de expresión.

Este estudio está planificado a 2 años. Se constituirán dos grupos de pacientes: un grupo incluirá a los pacientes con EII seguidos en el " Service de Gastro-entérologie du Pr Grimaud à l'Hôpital Nord " y el otro grupo constituirá la cohorte de control que incluirá a las personas a las que se les propuso una colonoscopia de detección para antecedentes familiares de cáncer de colon o pólipos, o para el Síndrome del Intestino Irritable.

El investigador deberá rellenar un cuestionario por cada paciente incluido, recogiendo información sobre edad, sexo, antecedentes patológicos, medicación consumida, síntomas digestivos e indicación de colonoscopia.

Los pacientes con EII tendrán un primer conjunto de biopsias (n = 10) y muestras de sangre recolectadas bajo anestesia general durante una colonoscopia planificada en su seguimiento habitual de EII; se recolectará un segundo conjunto de muestras similares dentro de los próximos 12 meses si se justifica médicamente un control endoscópico. Los sujetos de control tendrán solo un juego de biopsia y muestras de sangre recolectadas bajo anestesia general durante su colonoscopia. En el caso particular de pacientes con EII que requieran cirugía, se recolectará ex-vivo un pequeño trozo de la resección tanto en áreas sanas como patológicas.

La muestra de sangre servirá para la cuantificación de la actividad pantetinasa sérica de VNN1 y el estudio genético de SNP.

Las biopsias colónicas se obtendrán por duplicado de 5 áreas ileocolónicas diferentes, una para análisis histopatológico y otra para análisis transcripcional por qRT-PCR.

Las muestras quirúrgicas se utilizarán para actividad transcripcional, actividad de pantetinasa tisular y constitución del banco TMA (Tissue MicroArrays) para inmunohistoquímica.

Los beneficios esperados son validar un nuevo marcador de pronóstico de EII para la gravedad de la enfermedad o potencialmente para la evaluación de la respuesta terapéutica.