Studie vitaminu D a délky fetální kosti (VITFBL)

Celkově:

Odense Child Cohort Study (OCC) je populační kohortová studie zahrnující těhotné ženy přijaté mezi 1. lednem 2010 a 31. prosincem 2012. Všechny ženy, které byly během této doby v obci Odense těhotné, se mohly zúčastnit a 6 707 žen bylo osloveno přímo s náborovým materiálem.

Studie byla v souladu s Helsinskou deklarací a byla schválena Regionálním vědeckým etickým výborem pro jižní Dánsko, č. S-20090130. Všichni účastníci dali informovaný souhlas. Z populační základny 6 707 těhotných žen se do OCC do 31. prosince 2012 zapsalo 2 874 (42,9 %). Děti budou sledovány do 18 let.

Vzorky séra byly odebrány v časném těhotenství (GA 2-25 týdnů), v pozdním těhotenství (GA 26-30 týdnů), mateřské sérum a pupečníková krev při porodu a od dětí spolu s celkovým vyšetřením ve věku 3 měsíce, 1 rok, 3 let.

Dotazníky vyplňovaly rodiny v časném těhotenství, v pozdním těhotenství, po porodu a v době klinického vyšetření dětí.

Údaje z registrů o zdravotních proměnných byly dále dostupné z dánských registrů.

Objektivní:

Studie vitaminu D a délky kosti zkoumá vztah mezi biomarkerem 25(OH)D v mateřském séru a délkou fetálního femuru a kosti pažní v polovině těhotenství.

Metoda:

Analýza 25(OH)D: Sérum bylo skladováno při -80 °C až do analýzy, která byla provedena pomocí kapalinové chromatografie a hmotnostní spektrometrie (LC-MS/MS). Trojité deuterium označené 25(OH)vitamin D3 bylo přidáno do vzorků séra jako vnitřní standard a deproteinováno pomocí ZnSO4 v methanolu, centrifugováno při 2750 g po dobu 10 minut a 100 μl bylo nastříknuto na kolonu TurboFlow (Thermo Scientific) na LC-MS /SLEČNA. LC-MS/MS sestával ze systému Thermo Scientific TLX1 připojeného k Thermo Scientific Vantage TSQ. 25(OH)D2 a 25(OH)D3 byly koncentrovány na koloně Thermo Scientific Cyclone P 50 x 1,0 mm a zpětně propláchnuty na analytické koloně Phenomenex Gemini C18 50 x 3,0 mm a eluovány z analytické kolony gradientem. Mobilní fáze byly A: 10 mM NH4Ac ve vodě a B: 10 mM NH4Ac v methanolu. Lidské sérum bylo obohaceno příslušnými množstvími 25(OH)D2 a 25(OH)D3, aby se vytvořily šestibodové kalibrační křivky (vážené 1/x2) a 3 úrovně vzorků QC (nízká, střední, vysoká). Metoda byla kalibrována podle standardu NIST 972.25 C3 epimer D3 byl detekován spolu s D3 a oba od sebe nebyly odlišitelné. Nejnižší detekovatelné koncentrace byly 0,15 nM pro D2 i D3. Hodnoty D2 a D3 byly brány v úvahu pouze v případě, že byly vyšší než 6,5 nM.

Studie vitaminu D a délky kostí:

Vitamin D a délka kostí v polovině těhotenství.

- V 986 vzorcích séra odebraných v časném těhotenství byly hladiny séra 25(OH)D vyšetřeny pomocí LC-MS/. Informace z dotazníku a lékařské dokumentace byly použity k určení faktorů, které měly vliv na hladiny 25(OH)D a délku kostí v těhotenství v polovině těhotenství pomocí mnohonásobné lineární regrese.