De vitamine D en foetale botlengtestudie (VITFBL)

Algemeen:

De Odense Child Cohort Study (OCC) is een populatie-gebaseerd cohortonderzoek met zwangere vrouwen die tussen 1 januari 2010 en 31 december 2012 zijn geworven. Alle vrouwen die in deze periode in de gemeente Odense zwanger waren, kwamen in aanmerking voor deelname en 6.707 vrouwen werden rechtstreeks benaderd met wervingsmateriaal.

De studie voldeed aan de verklaring van Helsinki en werd goedgekeurd door de Regionale Wetenschappelijk Ethische Commissie voor Zuid-Denemarken, nr. S-20090130. Alle deelnemers gaven geïnformeerde toestemming. Van een populatie van 6.707 zwangere vrouwen, 2.874 (42,9%) ingeschreven in de OCC tot 31 december 2012. De kinderen worden gevolgd tot 18 jaar.

Serummonsters werden genomen in het begin van de zwangerschap (GA 2-25 weken), laat in de zwangerschap (GA 26-30 weken), maternaal serum en navelstrengbloed bij de geboorte, en van de kinderen samen met algemene onderzoeken op de leeftijd van 3 maanden, 1 jaar, 3 jaar.

Vragenlijsten werden ingevuld door de gezinnen tijdens de vroege zwangerschap, late zwangerschap, na de geboorte en tijdens het klinisch onderzoek van de kinderen.

Registergegevens over gezondheidsvariabelen waren verder verkrijgbaar bij de Deense registers.

Objectief:

De vitamine D- en botlengte-studie onderzoekt de relatie tussen de biomarker 25(OH)D in maternaal serum en de lengte van het foetale dijbeen en opperarmbeen tijdens een middellange zwangerschap.

Methode:

25(OH)D-analyse: Serum werd bewaard bij -80º Celsius tot analyse, die werd uitgevoerd met vloeistofchromatografie massaspectrometrie (LC-MS/MS). Drievoudig deuterium gemarkeerd 25(OH)vitamine D3 werd toegevoegd aan serummonsters als interne standaard en gedeproteïneerd met ZnSO4 in methanol, gecentrifugeerd bij 2750 g gedurende 10 minuten, en 100 μl werd geïnjecteerd op de TurboFlow-kolom (Thermo Scientific) op de LC-MS /MEVR. De LC-MS/MS bestond uit een Thermo Scientific TLX1-systeem aangesloten op een Thermo Scientific Vantage TSQ. 25(OH)D2 en 25(OH)D3 werden geconcentreerd op een Thermo Scientific Cyclone P 50 x 1,0 mm kolom en teruggespoeld op de analytische kolom, Phenomenex Gemini C18 50 x 3,0 mm en geëlueerd van de analytische kolom door een gradiënt. Mobiele fasen waren A: 10 mM NH4Ac in water en B: 10 mM NH4Ac in methanol. Menselijk serum werd verrijkt met geschikte hoeveelheden 25(OH)D2 en 25(OH)D3 om zespuntskalibratiekrommen (gewogen 1/x2) en 3 niveaus van QC-monsters (laag, midden, hoog) te produceren. De methode is gekalibreerd tegen NIST-standaard 972.25 De C3-epimeer van D3 werd samen met D3 gedetecteerd en de twee waren niet van elkaar te onderscheiden. Laagst detecteerbare concentraties waren 0,15 nM voor zowel D2 als D3. Waarden van D2 en D3 werden alleen in aanmerking genomen als ze hoger waren dan 6,5 nM.

De vitamine D- en botlengtestudie:

Vitamine D en botlengte tijdens de zwangerschap op middellange termijn.

- In 986 serummonsters die tijdens de vroege zwangerschap werden verzameld, werden de niveaus van serum 25(OH)D onderzocht met LC-MS/. Vragenlijst en medische dossierinformatie werden gebruikt om de factoren te bepalen die van invloed waren op 25(OH)D-niveaus en botlengte bij middellange zwangerschappen door middel van meervoudige lineaire regressie.