D-vitamiinin ja sikiön luun pituustutkimus (VITFBL)

Yleensä ottaen:

Odense Child Cohort Study (OCC) on väestöpohjainen kohorttitutkimus, joka käsittää raskaana olevia naisia, jotka on värvätty 1. tammikuuta 2010 ja 31. joulukuuta 2012 välisenä aikana. Kaikki tänä aikana Odensen kunnassa raskaana olleet naiset olivat oikeutettuja osallistumaan, ja 6 707 naista lähestyttiin suoraan rekrytointimateriaalilla.

Tutkimus noudatti Helsingin julistusta ja sen hyväksyi Etelä-Tanskan alueellinen tieteellinen eettinen komitea, nro. S-20090130. Kaikki osallistujat antoivat tietoisen suostumuksen. 6 707 raskaana olevan naisen väestöpohjasta 2 874 (42,9 %) ilmoittautui OCC:hen 31. joulukuuta 2012 mennessä. Lapsia seurataan 18-vuotiaaksi asti.

Seeruminäytteet otettiin raskauden alkuvaiheessa (GA 2-25 viikkoa), myöhäisessä raskaudessa (GA 26-30 viikkoa), äidin seerumi- ja napanuoraverestä syntyessä sekä lapsilta yleisten tutkimusten iässä 3 kuukautta, 1 vuotta, 3 vuotta.

Perheet täyttivät kyselyt alkuraskauden aikana, raskauden loppuvaiheessa, syntymän jälkeen ja lasten kliinisen tutkimuksen aikana.

Rekisteritietoja terveysmuuttujista oli edelleen saatavilla Tanskan rekistereistä.

Tavoite:

D-vitamiini ja luun pituus -tutkimus tutkii äidin seerumin biomarkkerin 25(OH)D:n ja sikiön reisiluun ja olkaluun pituuden välistä suhdetta raskauden puolivälissä.

Menetelmä:

25(OH)D-analyysi: Seerumia säilytettiin -80 °C:ssa analyysiin asti, joka suoritettiin nestekromatografian massaspektrometrialla (LC-MS/MS). Kolmoisdeuterium, joka oli merkitty 25(OH)-D3-vitamiinilla, lisättiin seeruminäytteisiin sisäisenä standardina ja proteiini poistettiin ZnSO4:lla metanolissa, sentrifugoitiin 2750 g:ssä 10 minuuttia ja 100 μl injektoitiin TurboFlow-kolonniin (Thermo Scientific) LC-MS:llä. /NEITI. LC-MS/MS koostui Thermo Scientific TLX1 -järjestelmästä, joka oli kytketty Thermo Scientific Vantage TSQ:han. 25(OH)D2 ja 25(OH)D3 konsentroitiin Thermo Scientific Cyclone P 50 x 1,0 mm pylvääseen ja huuhdeltiin takaisin analyyttiselle pylväälle, Phenomenex Gemini C18 50 x 3,0 mm ja eluoitiin analyysipylväästä gradientilla. Liikkuvat faasit olivat A: 10 mM NH4Ac vedessä ja B: 10 mM NH4Ac metanolissa. Ihmisseerumiin lisättiin sopivia määriä 25(OH)D2:ta ja 25(OH)D3:a kuuden pisteen kalibrointikäyrän (punnitus 1/x2) ja 3 QC-näytteiden (matala, keski, korkea) tuottamiseksi. Menetelmä kalibroitiin NIST-standardin 972.25 mukaan D3:n C3-epimeeri havaittiin yhdessä D3:n kanssa, eivätkä nämä kaksi olleet erotettavissa toisistaan. Alhaisimmat havaittavat pitoisuudet olivat 0,15 nM sekä D2:lle että D3:lle. D2- ja D3-arvot otettiin huomioon vain, jos ne olivat yli 6,5 nM.

D-vitamiinin ja luun pituuden tutkimus:

D-vitamiini ja luun pituus keskiraskauden aikana.

- 986 raskauden alkuvaiheessa kerätyssä seeruminäytteessä seerumin 25(OH)D-tasot tutkittiin LC-MS/. Kyselylomakkeen ja lääketieteellisten tiedostojen tietoja käytettiin määrittämään tekijät, jotka vaikuttivat 25(OH)D-tasoihin ja luun pituuteen raskauden puolivälissä moninkertaisella lineaarisella regressiolla.